一种聚乙二醇修饰的白藜芦醇磁性纳米脂质体及其制备方法技术

一种包裹四氧化三铁的聚乙二醇修饰的白藜芦醇纳米脂质体，包括白藜芦醇药物、聚乙二醇、磷脂双分子层。磷脂双分子层的成分包含卵磷脂、磷脂酰胆碱、胆固醇。白藜芦醇药物包封在双分子层中，聚乙二烯暴露在脂质体层，四氧化三铁磁性纳米颗粒包裹在脂质体腔内。卵磷脂、磷脂酰胆碱、胆固醇、聚乙二醇、白藜芦醇的质量比为2.5:5.5:2.1:0.32:1.8。本发明专利技术提供的聚乙二醇修饰的白藜芦醇磁性纳米脂质体，不仅降低了脂质体间发生相互融合、聚集的概率，延长脂质体在体内的循环时间，且具有磁性，可通过外加磁场有效控制脂质体在体内的位置，靶向输送药物。本发明专利技术还提供了该脂质体的制备方法。

Polyethylene glycol modified magnetic nano liposome of resveratrol and preparation method thereof

A polyethylene glycol modified nano liposome containing resveratrol, including resveratrol, polyethylene glycol and phospholipid bilayer. The phospholipid bilayer consists of lecithin, phosphatidylcholine, and cholesterol. Resveratrol was encapsulated in the bilayer, and poly (ethylene oxide) was exposed to the lipid layer. Fe3O4 nanoparticles were encapsulated in the lipid cavity. The mass ratio of lecithin, phosphatidylcholine, cholesterol, polyethylene glycol and resveratrol was 2.5:5.5:2.1:0.32:1.8. Resveratrol magnetic liposomes modified with polyethylene glycol provided by the invention, not only reduces the probability of the occurrence of mutual integration, aggregation of liposomes, prolong the cycle time of liposome in vivo, and has a magnetic, magnetic field can effectively control the position of liposomes in vivo, targeted drug delivery. The invention also provides the preparation method of the liposome.

【技术实现步骤摘要】
一种聚乙二醇修饰的白藜芦醇磁性纳米脂质体及其制备方法
本专利技术涉及脂质体药物
，具体涉及一种聚乙二醇修饰的白藜芦醇磁性纳米脂质体及其制备方法。
技术介绍
白藜芦醇是一种抗癌药物，但是其极易发生光化学反应而转化为弱活性的顺势结构并且其水溶性极差。而采用脂质体包裹白藜芦醇可有效解决这一问题。但是普通的脂质体不稳定，容易相互融合形成大粒径且不易被吸收的脂质体，引起药物渗漏。现有技术通常采用多糖或聚乙二醇等修饰脂质体，但稳定性得到改善的同时，药物包封率和脂质体粒径也受到了影响。因此，获得高包封率、粒径合适且稳定性良好的白藜芦醇脂质体是目前仍需解决的重要问题。另外，如何保证白藜芦醇脂质体对肿瘤细胞的靶向性，降低对正常细胞的毒性也是该药物研究的一个关键问题。
技术实现思路
为了实现白藜芦醇药物的靶向输入，本专利技术的目的是提供一种具有磁性的聚乙二醇修饰的白藜芦醇药物脂质体及其制备方法。本专利技术使用聚乙二醇修饰脂质体，减低脂质体在体内发生融合和聚集的概率，延长药物循环时间，包裹四氧化三铁后具有磁性，可由外加磁场控制实现药物的靶向输送。为了实现上述目的，本专利技术所采用的材料配方是：卵磷脂、磷脂酰胆碱、胆固醇、聚乙二醇、白藜芦醇的质量比为2.5:5.5:2.1:0.32:1.8；磁性包裹物四氧化三铁的纳米粒径为10-13nm。以及一种聚乙二醇修饰的白藜芦醇磁性纳米脂质体的制备方法，聚乙二醇修饰白藜芦醇脂质体，并包裹四氧化三铁磁性纳米颗粒，具体步骤如下：1）将配方比例的卵磷脂、磷脂酰胆碱、胆固醇、白藜芦醇混合溶解在足量的乙醇溶剂中；2）将步骤1）得到的混合溶液在0.01~0.1MPa真空度下恒温减压蒸馏，去除溶剂；3）待溶剂全部挥发，将步骤2）得到的混合物于20~35℃温度条件下0.01~0.1MPa真空干燥3~5h；4）用溶有聚乙二醇的足量的10mM、pH7.4的PBS缓冲液分散步骤3）得到的混合物，并加入含有3.4-6.5g四氧化三铁纳米颗粒悬液，40~55℃条件下水化2~4小时，得到悬浮液；5）将步骤4）得到的悬浮液在冰浴条件下，超声震荡10~30min，即得聚乙二醇修饰的白藜芦醇磁性纳米脂质体。所述步骤2）中的减压蒸馏采用旋转蒸发仪，在45℃恒温下蒸发溶剂。所述步骤4）中，采用旋转或者搅拌的方式加速混合物在PBS缓冲溶液中的水化过程。所述步骤5）的超声震荡采用超声细胞粉碎仪，以每隔5s工作3s的方式，在功率780W的条件下进行分散。与现有技术相对比，本专利技术取得的有益效果是：1、本专利技术中的白藜芦醇脂质体不仅稳定性良好，包封率高且粒径均匀，具有磁性靶向性。2、本专利技术中的有机溶剂为乙醇，无毒副作用。3、本专利技术中的制备方法简易。附图说明图1为实施例1得到的产品的粒径分布图；图2为实施例2得到的产品的粒径分布图；图3为实施例3得到的产品的粒径分布图。具体实施方式下面通过具体实施实例对本专利技术的内容作进一步详细说明，但这些实施例并不限制本专利技术的保护范围。实施例1分别称取卵磷脂2.5g、磷脂酰胆碱5.5g、胆固醇2.1g、白藜芦醇1.8g，使其质量比为2.5:5.5:2.1:1.8。将脂类和白藜芦醇混合溶解在足量的乙醇溶剂中；将材料全部倒入200ml烧瓶中，充分混合。将充分混合后的溶液移入茄型瓶中，使用真空旋转蒸发仪在45℃恒温下蒸发溶剂，不断提升真空度，至溶剂挥发完全，真空度达0.08Mpa以上。将附有混合物的茄型瓶置于真空干燥箱中，20℃、0.01MPa条件下干燥3h。将溶有0.32g聚乙二醇的足量的10mM、pH7.4的PBS缓冲液分散步骤3）得到的混合物加入茄型瓶中，并加入含有3.4g四氧化三铁纳米颗粒悬液，在40℃条件下旋转水化2小时，得到悬浮液，再用超声细胞粉碎仪，在0℃冰浴条件下，探头超声10min，工作3s，间歇5s，功率780W。超声后得粒径在175nm左右的单室脂质体囊泡，白藜芦醇包封率为91.8%，冷藏放置一周，粒径变化较小。实施例2分别称取卵磷脂2.5g、磷脂酰胆碱5.5g、胆固醇2.1g、聚乙二醇0.32g、白藜芦醇1.8g，使其质量比为2.5:5.5:2.1:0.32:1.8。将脂类和白藜芦醇混合溶解在足量的乙醇溶剂中；将材料全部倒入200ml烧瓶中，充分混合。将充分混合后的溶液移入茄型瓶中，使用真空旋转蒸发仪在45℃恒温下蒸发溶剂，不断提升真空度，至溶剂挥发完全，真空度达0.08Mpa以上。将附有混合物的茄型瓶置于真空干燥箱中，30℃、0.08MPa条件下干燥4h。将溶有聚乙二醇的足量的10mM、pH7.4的PBS缓冲液分散步骤3）得到的混合物加入茄型瓶中，并加入含有5.8g四氧化三铁纳米颗粒悬液，在45℃条件下旋转水化3小时，得到悬浮液，再用超声细胞粉碎仪，在0℃冰浴条件下，探头超声20min，工作3s，间歇5s，功率780W。超声后得粒径在160-175nm左右的单室脂质体囊泡，白藜芦醇包封率为93.2%，冷藏放置一周，粒径变化较小。实施例3分别称取卵磷脂2.5g、磷脂酰胆碱5.5g、胆固醇2.1g、聚乙二醇0.32g、白藜芦醇1.8g，使其质量比为2.5:5.5:2.1:0.32:1.8。将脂类和白藜芦醇混合溶解在足量的乙醇溶剂中；将材料全部倒入200ml烧瓶中，充分混合。将充分混合后的溶液移入茄型瓶中，使用真空旋转蒸发仪在45℃恒温下蒸发溶剂，不断提升真空度，至溶剂挥发完全，真空度达0.08Mpa以上。将附有混合物的茄型瓶置于真空干燥箱中，35℃、0.08MPa条件下干燥5h。将溶有聚乙二醇的足量的10mM、pH7.4的PBS缓冲液分散步骤3）得到的混合物加入茄型瓶中，并加入含有6.5g四氧化三铁纳米颗粒悬液，在55℃条件下旋转水化4小时，得到悬浮液，再用超声细胞粉碎仪，在0℃冰浴条件下，探头超声30min，工作3s，间歇5s，功率780W。超声后得粒径在170-175nm左右的单室脂质体囊泡，白藜芦醇包封率为90.6%，冷藏放置一周，粒径变化较小。实施例4脂质体的纳米粒径评价。采用动态光散射纳米粒度仪检测实施例1~3得到的白藜芦醇磁性纳米脂质体。具体步骤如下：制得脂质体5份，取相等适量，分别用PBS缓冲液（pH=7.4）稀释5倍后，利用动态光散射纳米粒度仪进行检测并记录。检测结果如图1~3所示，其中，图1为实施例1得到的产品的粒径分布图，图2为实施例2得到的产品的粒径分布图，图3为实施例3得到的产品的粒径分布图。检测结果显示，本专利技术制备的药物脂质体粒径分布均匀，具有较好的分散性和均一性。实施例5药物包封率检测。采用高效液相色谱法检测实施例1-3得到的白藜芦醇磁性纳米脂质体，检测结果显示，实施例1、实施例2、实施例3中，白藜芦醇包封率分别为91.8%、93.2%、90.65%，药物包封效果良好。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种聚乙二醇修饰的白藜芦醇磁性纳米脂质体，其特征在于，重量份配方具体包括：卵磷脂            2.5份；磷脂酰胆碱        5.5份；胆固醇            2.1份；聚乙二醇          0.32份；白藜芦醇          1.8份；四氧化三铁        3.4~6.5份。

【技术特征摘要】
1.一种聚乙二醇修饰的白藜芦醇磁性纳米脂质体，其特征在于，重量份配方具体包括：卵磷脂2.5份；磷脂酰胆碱5.5份；胆固醇2.1份；聚乙二醇0.32份；白藜芦醇1.8份；四氧化三铁3.4~6.5份。2.根据权利要求1所述的一种聚乙二醇修饰的白藜芦醇磁性纳米脂质体，其特征在于，所述四氧化三铁选用纳米粒径为10-13nm的四氧化三铁纳米粒子。3.一种用于制备权利要求1所述聚乙二醇修饰的白藜芦醇磁性纳米脂质体的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将配方比例的卵磷脂、磷脂酰胆碱、胆固醇、白藜芦醇混合溶解在足量的乙醇溶剂中；2）将步骤1）得到的混合溶液恒温减压蒸馏，去除溶剂；3）待溶剂全部挥发，将步骤2）得到的混合物于20~35℃温度条件下0.01~0.1MPa真空干燥3~5h；4）用溶有（0.32份）聚乙二醇的足量的10mM、pH7.4的PBS缓冲液分散步骤3）得到的混合物，并加入含有3.4-6.5g四氧化三铁纳米颗粒悬液，40~55℃条件下水化2~4小...

【专利技术属性】
技术研发人员：王娟，辛督强，王永仓，周晓华，李拓，徐强，马亚红，张亚萍，
申请(专利权)人：西京学院，
类型：发明
国别省市：陕西,61