尿中1‑溴丙烷顶空气相色谱测定方法技术

本发明专利技术公开了一种尿中1‑溴丙烷顶空气相色谱测定方法，配置不同浓度的1‑溴丙烷溶液作为标样，采用顶空气相色谱对多组标样溶液进行分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线；采用顶空气相色谱对样品溶液进行分析，得到峰面积，将峰面积带入标样曲线的回归方程中，得到尿中1‑溴丙烷的浓度。出峰时间短，灵敏度高，检测时间短，检出限低至2.0μg/L，相对标准偏差为1.0‑8.5，精密度高，批内精密度为2.4％～5.7％，批间精密度为4.8％～6.6％。本法使用的仪器和试剂，在国内职业卫生监测实验室较普及，适合推广使用。

In the urine of 1 bromopropane top gas chromatographic method for determination of

The invention discloses a urine 1 bromopropane headspace gas chromatographic method for the determination of different concentrations of 1 bromide solution as the standard sample, chromatography on groups of sample solution were analyzed by headspace gas concentration as abscissa and peak area for the vertical drawing standard curve; chromatography the sample solution was analyzed by headspace gas, obtained the peak area, peak area into the regression equation of standard curve, get the concentration of urine 1 1-bromopropane. The peak time is short, high sensitivity, short detection time, low detection limit to 2 g/L, the relative standard deviation is 1 8.5, high precision, intra assay precision ranged from 2.4% to 5.7%, inter batch precision is 4.8% ~ 6.6%. The instruments and reagents used in this method are more popular in the laboratory of occupational health monitoring in China, and are suitable for popularization and application.

【技术实现步骤摘要】
尿中1-溴丙烷顶空气相色谱测定方法
本专利技术属于尿中1-溴丙烷的检测方法，具体涉及尿中1-溴丙烷顶空气相色谱测定方法。
技术介绍
1-溴丙烷为无色液体，有刺激性气味；分子量为122.99；蒸汽压为16.39kPa/25℃；闪点为26℃；熔点为-110℃；沸点为70.9℃；不溶于水，溶于醇、醚、四氯化碳；相对密度(水=1)为1.36；相对密度(空气=1)为4.3；化学性质稳定；主要用作溶剂，常用于生产喷雾黏合剂、精密仪器的清洗剂和脱脂剂，也作为制药产业、杀虫剂和季胺类化合物合成的中间体。1-溴丙烷生产时的主要原料为正丙醇，其主要副产物为2-溴丙烷，因此职业接触人群的尿中有可能含有正丙醇和2-溴丙烷,与2-溴丙烷相比,1-溴丙烷对精原细胞的毒性较小，但神经毒性和抑制精子成熟的毒性较强,且能损害人的中枢神经系统。近年来我国电子、农药、染料、医药、造纸、制革等产业发展迅速，每年溴代烷烃的需求量超过14000t，其中高纯度的I-BP为8000t。接触工人数量大，从国外人群流行病学资料研究表明其短期大剂量接触和长期接触均可以对人体造成职业性损害，故其潜在隐患不容忽视。为切实做好I-BP中毒的三级预防，做到防患于未然，目前亟须在1-BP中毒机制、生物接触限值及检测、中毒诊断标准等诸多方面进行深入研究，尽快制定尿中1-BP检测标准。1-BP的代谢过程较为复杂,JonesAR等人进行1-BP毒代动力学动物实验时，发现大部分1-BP可不经过转变以原型随呼吸或尿液排出，染毒后100h25%的1-BP经尿液排出，部分代谢为N-乙酰基-S-(正丙基)-L-半胱氨酸（AcPrCys）及其相应的氧化产物。另外，Kawai等人在日本1-BP职业暴露人群中开展的研究，分析显示职业暴露工人班后尿样中1-BP浓度同外暴露量呈高度线性相关，同时未暴露1-BP的对照组工人，尿样中均未检出1-BP的存在，提示班后尿中1-BP可以很好地用于监测1-BP暴露。目前，见诸报道的测定尿中1-BP的检测方法均为顶空-气相色谱法，区别在于所选用的顶空装置和检测器不同。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种尿中1-溴丙烷顶空气相色谱测定方法，使用毛细管色谱柱，响应值大，1-BP和溶剂峰及尿样中其他杂质峰实现了较好分离，检测时间短，灵敏度高。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：一种尿中1-溴丙烷顶空气相色谱测定方法，包括如下步骤：1）样品溶液的配置：在顶空瓶中加入尿样和无水硫酸钠密封；2）标样溶液的配置：在顶空瓶中加入不同浓度的1-溴丙烷溶液和无水硫酸钠密封；3）绘制标准曲线：采用顶空气相色谱对多组标样溶液进行分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线；4）对样品溶液进行检测：采用顶空气相色谱对样品溶液进行分析，得到峰面积，将峰面积带入标样曲线的回归方程中，得到尿中1-溴丙烷的浓度。步骤2）中1-溴丙烷溶液浓度从0μg/L开始，以20~100μg/L递增至1000μg/L。步骤3）和4）所述顶空气相色谱中顶空进样器的平衡温度为80~100℃，平衡时间为5~15min。步骤3）和4）所述顶空气相色谱中色谱条件为：进样口温度200℃,柱温55℃，保持2min，再以15℃/min升至130℃，保持1min;以6∶1的分流比进样;载气高纯氦气;柱流量1mL/min。电离方式EI，离子源温度230℃;辅助接口温度280℃;电子轰击电压70eV;扫描方式单离子检测扫描。无水硫酸钠的用量为0.05~0.5g/每毫升尿样。顶空瓶中加无水硫酸钠可提高1-BP在顶空相中浓度以提高实验灵敏度。色谱柱选择毛细管色谱柱，所述检测器为氢火焰离子检测器。色谱柱为PEG-20M石英毛细管柱或者HP-5MS石英毛细柱。色谱柱为PEG-20M石英毛细管柱时优选平衡温度为100℃，平衡时间为8min。色谱柱为HP-5MS石英毛细柱时优选平衡温度为90℃，平衡时间为10min。本专利技术选用色谱柱HP-5MS，与HP-5相比，HP-5色谱柱固定相为：（5%）-二苯基（95%）-二甲基聚硅氧烷；而HP-5MS柱的固定相为：（5%）-二苯基（95%）-二甲基亚芳基硅氧烷共聚物，两者相差了“亚芳基”，因此HP-5MS具有更好的热稳定性，流失降低，基线低，响应好。有益效果：本专利技术使用PEG-20M石英毛细管柱或者HP-5MS石英毛细管色谱柱，热稳定性好，1-BP响应值大，且1-BP和溶剂峰及尿样中其他杂质峰实现了较好分离，出峰时间短，灵敏度高，检测时间短。应用本方法经河南省职业病防治院、深圳市职业病防治院、扬州市疾病预防控制中心三家单位的方法验证，检出限低至2.0μg/L，相对标准偏差为1.0-8.5，精密度高，批内精密度为2.4％～5.7％，批间精密度为4.8％～6.6％。本法使用的仪器和试剂，在国内职业卫生监测实验室较普及。附图说明图1顶空温度选择实验结果；图2顶空平衡时间选择实验结果；图3尿中1-BP测定的工作曲线图；图41-BP测定干扰试验色谱图；图5尿中1-BP稳定性实验结果。具体实施方式以下实施例中，顶空气相色谱中色谱条件为：进样口温度200℃,柱温55℃，保持2min，再以15℃/min升至130℃，保持1min;以6∶1的分流比进样;载气高纯氦气;柱流量1mL/min。电离方式EI，离子源温度230℃;辅助接口温度280℃;电子轰击电压70eV;扫描方式单离子检测扫描。顶空瓶中尿样与无水硫酸钠的用量关系为每毫升尿样加入0.5g无水硫酸钠。实施例1本实施例说明色谱柱的选择分别试验了HP-5、HP-1、HP-FFAP、PEG-20M、HP-5MS柱等不同毛细管色谱柱及色谱条件测定尿中1-BP，结果表明，使用HP-FFAP、PEG-20M、HP-5MS毛细管色谱柱，1-BP和溶剂峰及尿样中其他杂质峰实现了较好分离，其中PEG-20M、HP-5MS的分离时间更短，出峰稳定，峰形好，灵敏度更高。顶空温度选择：分别在60℃、70℃、80℃、90℃、100℃条件下，对尿样（100μg/L）进行测定，均恒温10min，结果表明，采用PEG-20M石英毛细管柱，在100℃时1-BP响应到达最大值，110℃时开始显著下降，故选择100℃作为顶空温度，在顶空温度为100℃，振摇速率为250rpm的条件下，对尿样（100μg/L）进行测定，在平衡时间为4、8、10、20min分别进样，8min后峰面积不再增加，故选择平衡时间为8min。采用HP-5MS石英毛细柱，在90℃时1-BP响应到达最大值，故选择90℃作为顶空温度，见图1。在顶空温度为90℃，振摇速率为250rpm的条件下，对尿样（100μg/L）进行测定，在平衡时间为5、10、15、20min分别进样，10min后峰面积不再增加，故选择平衡时间为10min，见图2。尿样成分复杂，水占96%-97%，其他为尿素，尿酸，肌酐，氨等非蛋白氮化合物、硫酸盐等成分，1-溴丙烷含量低微，由于填充柱柱效低，采用填充柱很难使各组分完全分离，且峰形宽，只能检出少量组分，结果不理想。因此我们选用石英毛细管色谱柱。1-溴丙烷与2-溴丙烷分子量相近，只在结构上稍有差异，采用弱极性和中等极性的色谱柱不能使它们完全分离，而选用强极性的PEG-20M毛细管色谱柱，并用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种尿中1‑溴丙烷顶空气相色谱测定方法,其特征在于，包括如下步骤：1）样品溶液的配置：在顶空瓶中加入尿样和无水硫酸钠密封；2）标样溶液的配置：在顶空瓶中加入不同浓度的1‑溴丙烷溶液和无水硫酸钠密封；3）绘制标准曲线：采用顶空气相色谱对多组标样溶液进行分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线；4）对样品溶液进行检测：采用顶空气相色谱对样品溶液进行分析，得到峰面积，将峰面积带入标样曲线的回归方程中，得到尿中1‑溴丙烷的浓度。

【技术特征摘要】
1.一种尿中1-溴丙烷顶空气相色谱测定方法,其特征在于，包括如下步骤：1）样品溶液的配置：在顶空瓶中加入尿样和无水硫酸钠密封；2）标样溶液的配置：在顶空瓶中加入不同浓度的1-溴丙烷溶液和无水硫酸钠密封；3）绘制标准曲线：采用顶空气相色谱对多组标样溶液进行分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线；4）对样品溶液进行检测：采用顶空气相色谱对样品溶液进行分析，得到峰面积，将峰面积带入标样曲线的回归方程中，得到尿中1-溴丙烷的浓度。2.根据权利要求1所述的一种尿中1-溴丙烷顶空气相色谱测定方法，其特征在于，步骤2）中1-溴丙烷溶液浓度从0μg/L开始，以50~100μg/L递增至1000μg/L。3.根据权利要求1所述的一种尿中1-溴丙烷顶空气相色谱测定方法，其特征在于，步骤3）和4）所述顶空气相色谱中顶空进样器的平衡温度为80~100℃，平衡时间为5~15min。4.根据权利要求1所述的一种尿中1-溴丙烷顶空气相色谱测定方法，其特征在于，步骤3）和4）所述顶空气相色谱中色谱条件为：进样口温度200℃，柱温55℃，保持2min，再以15℃/min升至1...

【专利技术属性】
技术研发人员：缪荣明，
申请(专利权)人：缪荣明，
类型：发明
国别省市：江苏,32