改进的IL‑6抗体制造技术

提供了改进的IL‑6抗体。公开了抗体在治疗IL‑6相关疾病例如眼部疾病，诸如糖尿病黄斑水肿中的用途。

The improved IL 6 antibody

Provides improved IL 6 antibody. Open the IL antibody in the treatment of 6 related diseases such as eye diseases, such as diabetic macular edema in use.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】改进的IL-6抗体相关申请本申请要求2014年11月7日提交的美国临时申请号62/077,105；2014年12月4日提交的美国临时申请号62/087,448；和在2015年10月28日提交的美国临时申请号62/247,705的优先权。这些申请的每一个的全部内容通过引用并入本文。专利
本专利
涉及IL-6。更具体地，所述领域涉及IL-6的调节剂及其在治疗疾病如眼病中的用途。专利技术背景IL-6是一种在炎症、造血(hematopoiesis)、血管生成、细胞分化和神经元存活中具有报导作用的多效性细胞因子。本专利技术涉及改进的IL-6抗体及其用途。专利技术概述本专利技术涉及IL-6抗体及其片段(例如抗原结合片段)或衍生物，以及编码IL-6抗体和片段的核酸。本专利技术还涉及此类抗体，片段或衍生物的用途。抗体及其片段或衍生物可用于例如IL-6相关疾病的治疗。在实施方案中，抗体，其片段或衍生物可结合(例如，特异性结合)至IL-6，例如，人IL-6。在实施方案中，抗体，其片段或衍生物可结合(例如，特异性结合)至IL-6的位点II(例如，人IL-6的位点II)。本文提供的一个方面是包含重链可变区的分离的抗体或抗原结合片段，所述重链可变区包含(i)VHCDR1，其包含GYX1LX2NYLIE的序列(SEQIDNO：45)，(ii)VHCDR2，其包含VX3TPGX4GTIN的序列(SEQIDNO：46)和(ii)VHCDR3，其中以下的一个或多个(例如，1,2,3或全部)是真实的：X1不是A，X2不是S，X3不是I，和X4不是S。在实施方案中，X1不是A，X2不是S，X3不是I和X4不是S。在实施方案中，X1是V或V的保守取代。在实施方案中，X2是P或P的保守取代。在实施方案中，X3是T或T的保守取代。在实施方案中，X4是G或G的保守取代。在实施方案中，以下一个，两个，三个或全部是真实的：X1是V或V的保守取代，X2是P或P的保守取代，X3的保守取代是T或T的保守取代，和X4是G或G的保守取代。在实施方案中，X1是V或V的保守取代，X2是P或P的保守取代，X3是T或T的保守取代，和X4是G或G的保守取代。在实施方案中，X1选自V，I，L和M。在实施方案中，X1选自V，I和L。在实施方案中，X2选自P，G和A。在实施方案中，X2选自P和G。在实施方案中，X3选自T和S。在实施方案中，X4选自G和P。在实施方案中，以下的一个或多个(例如，1、2、3个或全部)是真实的：X1是V，X2是P，X3是T，和X4是G。在实施方案中，X1是V，X2是P，X3是T，和X4是G.在实施方案中，VHCDR3包含SEQIDNO:33的序列。在实施方案中，抗体或抗原结合片段具有对人IL-6增加的亲和力和/或增加的效力。在实施方案中，与包含序列，其中以下的一个或多个(例如1、2、3个或全部)是真实的：X1是A，X2是S，X3是I和X4是S的抗体或抗原结合片段(例如，其他方面相同的抗体或抗原结合片段)相比，抗体或抗原结合片段具有对人IL-6增加的亲和力和/或增加的效力。在一些实施方案中，分离的抗体或其抗原结合片段包含含有SEQIDNO：31的序列的VHCDR1，含有SEQIDNO：32的序列的VHCDR2和任选地含有SEQIDNO：NO：33的序列的VHCDR3。在实施方案中，重链可变区包含与SEQIDNO：17至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的序列。在实施方案中，重链可变区由以下序列组成，所述序列与SEQIDNO：17至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的序列或者与SEQIDNO：17差别不超过5个，4个，3个，2个或1个氨基酸。在实施方案中，重链可变区与SEQIDNO：17差别不超过5个，4个，3个，2个或1个氨基酸。在实施方案中，重链可变区与SEQIDNO：17差别1-5个氨基酸。在实施方案中，重链可变区包含与SEQIDNO：37至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的序列。在实施方案中，重链可变区由与SEQIDNO：37至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的序列组成。在实施方案中，重链可变区与SEQIDNO：37差别不超过5、4、3、2或1个氨基酸。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含含有SEQIDNO：37的重链可变区序列。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含由SEQIDNO：37组成的重链可变区序列。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含与SEQIDNO：39至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的序列。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含与SEQIDNO：39差别不超过5、4、3、2或1个氨基酸的序列。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含SEQIDNO：39。在实施方案中，抗体或抗原结合片段是Fab。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含与SEQIDNO：54至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性的序列。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含与SEQIDNO：54差别不超过5、4、3、2或1个氨基酸的序列。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含SEQIDNO：54。在实施方案中，抗体或抗原结合片段是Fab。在实施方案中，抗体或抗原结合片段是scFv。在实施方案中，抗体或抗原结合包含下列scFv序列或由下列scFv序列组成：QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYVLPNYLIEWVRQAPGQGLEWMGVTTPGGGTINYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSRWDPLYYYALEYWGQGTTVTVSSGGGGSGGGGSGGGGSDIVMTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVDNYGIPFMNWYQQKPGQPPKLLIYAASNRGSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSEEVPLTFGQGTKLEIKRTV(SEQIDNO:52)或DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVDNYGIPFMNWYQQKPGQPPKLLIYAASNRGSGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSEEVPLTFGQGTKLEIKRTVGGGGSGGGGSGGGGSQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYVLPNYLIEWVRQAPGQGLEWMGVTTPGGGTINYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSRWDPLYYYALEYWGQGTTVTVSS(SEQIDNO:53)。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含与SEQIDNO：52或SEQIDNO：53至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的序列。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含SEQIDNO：52或SEQIDNO：53。在实施方案中，抗体或抗原结合片段是scFv。在实施方案中，抗体或抗原结合片段包含与SEQIDNO：41至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗体或抗原结合片段，其包含重链可变区，所述重链可变区包含(i)VH CDR1，其包含GYX1LX2NYLIE的序列(SEQ ID NO：45)，(ii)VH CDR2，其包含VX3TPGX4GTIN的序列(SEQ ID NO：46)和(ii)VH CDR3，其中以下的一个或多个是真实的：X1不是A，X2不是S，X3不是I，和X4不是S。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.11.07 US 62/077,105;2014.12.04 US 62/087,448;1.抗体或抗原结合片段，其包含重链可变区，所述重链可变区包含(i)VHCDR1，其包含GYX1LX2NYLIE的序列(SEQIDNO：45)，(ii)VHCDR2，其包含VX3TPGX4GTIN的序列(SEQIDNO：46)和(ii)VHCDR3，其中以下的一个或多个是真实的：X1不是A，X2不是S，X3不是I，和X4不是S。2.权利要求1的抗体或抗原结合片段，其中X1是V或V的保守取代，X2是P或P的保守取代，X3是T或T的保守取代，X4是G或G的保守取代。3.权利要求1或2的抗体或抗原结合片段，其中与包含其中X1是A，X2是S，X3是I并且X4是S的重链可变区序列而其他方面相同的抗体或抗原结合片段相比，所述抗体或抗原结合片段具有对人IL-6增加的亲和力和/或增加的效力。4.分离的抗体或其抗原结合片段，其包含(i)含有SEQIDNO：31的序列的VHCDR1，含有SEQIDNO：32的序列的VHCDR2和含有SEQIDNO：33的序列的VHCDR3。5.权利要求4的抗体或抗原结合片段，其中与包含含有SEQIDNO：4的序列的VHCDR1，含有SEQIDNO：5的序列的VHCDR2，和含有SEQIDNO：6的序列的VHCDR3的抗体或抗原结合片段相比，所述抗体或抗原结合片段具有增加的对人IL-6的亲和力和/或增加的效力。6.前述权利要求中任一项的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含(i)包含SEQIDNO：37的重链可变区序列，或(ii)与SEQIDNO：37至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的重链可变区序列。7.前述权利要求中任一项的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含(i)SEQIDNO：39或SEQIDNO：54，或(ii)与SEQIDNO：39或SEQIDNO：54至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的序列。8.前述权利要求中任一项的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段包含(i)包含SEQIDNO：41的重链可变区序列，或(ii)与SEQIDNO：41至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的重链可变区序列。9.分离的抗体或抗原结合片段，其包含与SEQIDNO：37至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的重链可变区序列，其中所述重链序列包含选自V28，P30，T51和G55(编号根据SEQIDNO：41)的一个或多个(例如，1、2、3或4个)氨基酸。10.分离的抗体或抗原结合片段，其包含与SEQIDNO：39或SEQIDNO：54至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的序列，其中所述序列包含选自V28、P30、T51和G55(编号根据SEQIDNO：41)的一个或多个(例如，1、2、3或4个)氨基酸。11.分离的抗体或抗原结合片段，其包含与SEQIDNO：41至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的重链序列，其中所述重链序列包含选自V28，P30，T51和G55(编号根据SEQIDNO：41)的一个或多个(例如，1、2、3或4个)氨基酸。12.权利要求9至11中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中相对于除了其不包含所述一个或多个氨基酸，而替代地包含选自A28、S30、I51和S55的一个或多个(例如，1、2、3或4个)氨基酸在其他方面相同的抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段具有增加的对人IL-6的亲和力和/或增加的效力。13.权利要求9至11中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中与除了其包含A28，S30，I51和S55在其他方面相同的抗体或抗原结合片段相比，所述包含V28、P30、T51和G55的抗体或抗原结合片段显示对人IL-6改善的亲和力和/或改善的效力。14.前述权利要求中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段进一步包含含有SEQIDNO：34的序列的VLCDR1，含有SEQIDNO：35的序列的VLCDR2，和含有SEQIDNO：36的序列的VLCDR3。15.前述权利要求中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段进一步包含(i)包含SEQIDNO：38的轻链可变区序列或(ii)与SEQIDNO：38至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的轻链可变区序列。16.前述权利要求中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体或抗原结合片段进一步包含(i)包含SEQIDNO：42的轻链序列或(ii)与SEQIDNO：42至少90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％相同的轻链序列。17.权利要求3、5、12或13中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中所述亲和力增加至少1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、3或4倍。18.权利要求17的抗体或抗原结合片段，其中使用表面等离振子共振(SPR)或流式细胞术评估所述亲和力。19.权利要求3、5、12或13中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中如通过以下指明所述效力增加(i)IC50的降低，任选地其中所述IC50降低至少5、10、20、30、40或50倍和/或(ii)IC90的降低，任选地其中所述IC90降低至少10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400或500倍。20.权利要求3、5或13...

【专利技术属性】
技术研发人员：MM施密特，A蒂斯代尔，ES弗法恩，G扎尔比斯帕帕斯托伊特西斯，
申请(专利权)人：十一生物治疗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US