治疗或预防胆固醇相关疾病的方法技术

本发明专利技术涉及使用针对前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin型9(PCSK9)的抗体来治疗或预防胆固醇相关疾病(如高胆固醇血症、高脂血症或血脂异常)的方法。还描述了制剂及产生所述制剂的方法。

Methods for the treatment or prevention of cholesterol related diseases

The present invention relates to methods for treating or preventing cholesterol related diseases, such as hypercholesterolemia, hyperlipidemia, or dyslipidemia, using antibodies against Subtilisin Protease type /kexin 9 (PCSK9). Formulations and methods of producing the formulations are also described.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本申请要求于2012年5月3日提交的美国临时申请号61/642,363、于2012年3月22日提交的美国临时申请号61/614,417、于2012年2月6日提交的美国临时申请号61/595,526、于2011年11月21日提交的美国临时申请号61/562,303、于2011年5月10日提交的美国临时申请号61/484,610的权益，以上所有申请以引用方式并入本文。参考序列表本申请连同序列表以电子格式一同提交。所述序列表以命名为A-1635-WO-PCT_Sequence_Listing.txt、创建于2012年5月10日、大小为315KB的文件来提供。所述序列表的电子格式中的信息以引用的方式整体并入本文。专利
本专利技术涉及使用针对前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin型9(PCSK9)的抗原结合蛋白(包括抗体)来治疗或预防胆固醇相关疾病(如高胆固醇血症、高脂血症或血脂异常)的方法。还描述了药物制剂及产生所述制剂的方法。背景“胆固醇相关疾病”(其包括”血清胆固醇相关疾病”)包括以下任何一种或多种：高胆固醇血症、高脂血症、心脏病、代谢综合征、糖尿病、冠心病、中风、心血管疾病、阿兹海默症(Alzheimer'sdisease)以及(一般来说)血脂异常，其可表现为例如总血清胆固醇升高、LDL升高、甘油三酯升高、VLDL升高和/或低HDL。实际上，高胆固醇血症为人类冠心病(CHD)的一个已确定的风险因素。降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)会使心血管风险降低并且是针对CHD的药物疗法的主要目标。他汀类(Statin)(羟甲基戊二酰基辅酶A[HMGCoA]还原酶抑制剂)为当前用于高胆固醇血症治疗的首选。然而，新出现的数据指示更积极的高胆固醇血症治疗伴有更低的CHD事件风险。此外，一部分患者不耐受他汀类疗法或不对他汀类疗法充分起反应。因此，可单独或与现有药剂组合使用来更有效地降低LDL-C的新型疗法可能有用。充分确定的是肝细胞表面低密度脂蛋白受体(LDLR)的再循环通过调控血浆LDL-C水平而在维持细胞和全身胆固醇平衡方面起关键作用。更近来，已经显示前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin型9(PCSK9)在LDLR的再循环及调控方面起重要作用。PCSK9为丝氨酸蛋白酶的枯草杆菌蛋白酶家族的成员并且主要在肝脏中表达。在分泌之后，它通过涉及直接结合LDLR的机制使肝细胞表面LDLR发生转译后下调。肝LDLR的下调又致使循环的LDL-C的水平增加。因此，PCSK9可以代表高胆固醇血症背景下新型治疗剂所抑制的目标。所述方法的强有力的理论依据可以从临床前模型的研究并且从以下研究结果获得：具有PCSK9功能丧失型突变的人的胆固醇水平低于正常且CHD的发病率降低。各种实施方案的概述在本专利技术的一些方面，提供了一种稳定的制剂，其包含至少一种特异性结合PCSK9的单克隆抗体，其中PCSK9包含氨基酸SEQIDNO1，所述单克隆抗体的含量为约40mg/ml至约300mg/ml；以及含量为约.05mM至约40mM的药学上可接受的缓冲剂；以及含量为约.01%w/v至约20%w/v的药学上可接受的表面活性剂；以及至少一种含量为约0.5%w/v至约10%w/v的药学上可接受的稳定剂，其中所述稳定的制剂具有在约4.0至约6.0之间的pH。在一些实施方案中，上述稳定的制剂包含药学上可接受的缓冲剂，其选自由以下组成的组：谷氨酸盐、磷酸盐、磷酸盐缓冲盐水、乙酸钠、柠檬酸钠、以及三羟甲基氨基甲烷缓冲剂。在具体的实施方案中，上述稳定的制剂的药学上可接受的缓冲剂以10mM至20mM的量存在。在一个具体的实施方案中，所述药学上可接受的缓冲剂是含量为10mM至20mM的乙酸钠。在一些实施方案中，所述药学上可接受的表面活性剂是以约0.004%w/v至约0.01%w/v的量存在。在具体的实施方案中，上述稳定的制剂的药学上可接受的表面活性剂是聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。在其它的实施方案中，所述药学上可接受的表面活性剂是以约0.004%w/v至约0.01%w/v的量存在的聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。在一些实施方案中，上述稳定的制剂的药学上可接受的稳定剂是选自由以下组成的组：多羟基烃、二糖、多元醇、脯氨酸、精氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、牛磺酸以及苯甲醇。在一些实施方案中，所述药学上可接受的稳定剂是多羟基烃，其选自由以下组成的组：山梨糖醇、甘露糖醇以及甘油。在一个具体的实施方案中，上述稳定的制剂的多羟基烃是山梨糖醇。在一些实施方案中，所述药学上可接受的稳定剂是二糖，其选自由以下组成的组：蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖以及海藻糖。在一些实施方案中，二糖稳定剂以约9%w/v的量存在。在一些实施方案中，所述二糖是蔗糖。在具体的实施方案中，在上述稳定的制剂中的蔗糖以约9%w/v的量存在。在一些实施方案中，稳定剂是氨基酸，其选自由以下组成的组：脯氨酸、精氨酸、赖氨酸、蛋氨酸以及牛磺酸。在一个具体的实施方案中，所述稳定剂是脯氨酸。在另一个实施方案中，在上述稳定的制剂中的脯氨酸以在约2%w/v与3%w/v之间的量存在。在一些实施方案中，上述稳定的制剂的pH是在约5.0至约5.5之间。在一些实施方案中，上述稳定的制剂包含单克隆抗体，其包含：包含与SEQIDNO:23至少90%相同的氨基酸序列的轻链可变区和包含与SEQIDNO:49至少90%相同的氨基酸序列的重链可变区；包含与SEQIDNO:12至少90%相同的氨基酸序列的轻链可变区和包含与SEQIDNO:67至少90%相同的氨基酸序列的重链可变区；包含与SEQIDNO:461至少90%相同的氨基酸序列的轻链可变区和包含与SEQIDNO:459至少90%相同的氨基酸序列的重链可变区；包含与SEQIDNO:465至少90%相同的氨基酸序列的轻链可变区和包含与SEQIDNO:463至少90%相同的氨基酸序列的重链可变区；或者包含与SEQIDNO:485至少90%相同的氨基酸序列的轻链可变区和包含与SEQIDNO:483至少90%相同的氨基酸序列的重链可变区。在一些实施方案中，上述稳定的制剂包含单克隆抗体，其包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:23的轻链可变区和包含氨基酸序列SEQIDNO:49的重链可变区；包含氨基酸序列SEQIDNO:12的轻链可变区和包含氨基酸序列本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种稳定的制剂，其包含至少一种特异性结合PCSK9的单克隆抗体，其中PCSK9包含SEQ ID NO 1的氨基酸，所述单克隆抗体的量为约40 mg/ml至约300 mg/ml；及含量为约.05 mM至约40 mM的药学上可接受的缓冲剂；及含量为约.01% w/v至约20% w/v的药学上可接受的表面活性剂；及约0.5% w/v至约10% w/v的至少一种药学上可接受的稳定剂，其中所述稳定的制剂的pH在约4.0至约6.0之间。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.05.10 US 61/484610;2011.11.21 US 61/562303;201.一种稳定的制剂，其包含至少一种特异性结合PCSK9的单克隆抗体，其中PCSK9包含SEQIDNO1的氨基酸，所述单克隆抗体的量为约40mg/ml至约300mg/ml；及含量为约.05mM至约40mM的药学上可接受的缓冲剂；及含量为约.01%w/v至约20%w/v的药学上可接受的表面活性剂；及约0.5%w/v至约10%w/v的至少一种药学上可接受的稳定剂，其中所述稳定的制剂的pH在约4.0至约6.0之间。
2.如权利要求1中任一项所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体包含：
a)包含与SEQIDNO:23至少90%相同的氨基酸序列的轻链可变区和包含与SEQIDNO:49至少90%相同的氨基酸序列的重链可变区，
b)包含与SEQIDNO:465至少90%相同的氨基酸序列的轻链可变区和包含与SEQIDNO:463至少90%相同的氨基酸序列的重链可变区，
c)包含与SEQIDNO:461至少90%相同的氨基酸序列的轻链可变区和包含与SEQIDNO:459至少90%相同的氨基酸序列的重链可变区，
d)包含与SEQIDNO:485至少90%相同的氨基酸序列的轻链可变区和包含与SEQIDNO:483至少90%相同的氨基酸序列的重链可变区；或
e)包含与SEQIDNO:582至少90%相同的氨基酸序列的轻链可变区和包含与SEQIDNO:583至少90%相同的氨基酸序列的重链可变区。
3.如权利要求2所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体包含：
a)包含氨基酸序列SEQIDNO:23的轻链可变区和包含氨基酸序列SEQIDNO:49的重链可变区，
b)包含氨基酸序列SEQIDNO:465的轻链可变区和包含氨基酸SEQIDNO:463的重链可变区，
c)包含氨基酸序列SEQIDNO:12的轻链可变区和包含氨基酸序列SEQIDNO:67的重链可变区，
d)包含氨基酸序列SEQIDNO:461的轻链可变区和包含氨基酸序列SEQIDNO:459的重链可变区，
e)包含氨基酸序列SEQIDNO:485的轻链可变区和包含氨基酸序列SEQIDNO:483的重链可变区，或
f)包含氨基酸序列SEQIDNO:582的轻链可变区和包含氨基酸序列SEQIDNO:583的重链可变区。
4.如权利要求2所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体选自由以下组成的组：21B12、11F1、31H4、8A3以及8A1。
5.如权利要求2所述的稳定的制剂，其中所述药学上可接受的缓冲剂选自由以下组成的组：谷氨酸盐、磷酸盐、磷酸盐缓冲盐水、乙酸钠、柠檬酸钠、以及三羟甲基氨基甲烷缓冲剂(Trisbuffer)。
6.如权利要求5所述的稳定的制剂，其中所述药学上可接受的缓冲剂为乙酸钠。
7.如权利要求6所述的稳定的制剂，其中所述药学上可接受的缓冲剂以10-20mM的量存在。
8.如权利要求2所述的稳定的制剂，其中所述药学上可接受的表面活性剂为聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。
9.如权利要求7所述的稳定的制剂，其中所述药学上可接受的表面活性剂为聚山梨醇酯80。
10.如权利要求7所述的稳定的制剂，其中所述药学上可接受的表面活性剂为聚山梨醇酯20。
11.如权利要求8、9或10中任一项所述的稳定的制剂，其中药学上可接受的表面活性剂以约0.004%w/v至约0.01%w/v的量存在。
12.如权利要求2中任一项所述的稳定的制剂，其中所述药学上可接受的稳定剂选自由以下组成的组：多羟基烃、二糖、多元醇、脯氨酸、精氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、牛磺酸以及苯甲醇。
13.如权利要求12所述的稳定的制剂，其中所述稳定剂为选自由山梨糖醇、甘露糖醇及甘油组成的组的多羟基烃。
14.如权利要求11所述的稳定的制剂，其中所述稳定剂为山梨糖醇。
15.如权利要求12所述的稳定的制剂，其中所述稳定剂为选自由蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖及海藻糖组成的组的二糖。
16.如权利要求11所述的稳定的制剂，其中所述稳定剂为蔗糖。
17.如权利要求16所述的稳定的制剂，其中所述稳定剂以约9%w/v的量存在。
18.如权利要求11所述的稳定的制剂，其中所述稳定剂为脯氨酸。
19.如权利要求18所述的稳定的制剂，其中所述脯氨酸以介于约2%至3%w/v之间的量存在。
20.如权利要求17所述的稳定的制剂，其中所述制剂的pH介于约5.0至约5.5之间。
21.如权利要求19所述的稳定的制剂，其中所述制剂的pH介于约5.0至约5.5之间。
22.如权利要求17所述的稳定的制剂，其中所述稳定的制剂包括在25℃下30cP或更小的粘度。
23.如权利要求19所述的稳定的制剂，其中所述稳定的制剂包括在25℃下30cP或更小的粘度。
24.如权利要求19所述的稳定的制剂，其中单克隆抗体的量为约70mg/ml至约150mg/ml且所述稳定的制剂包括在25℃下12cP或更小的粘度。
25.如权利要求20所述的稳定的制剂，其包括介于约250mOsmol/kg至约350mOsmol/kg之间。
26.如权利要求21所述的稳定的制剂，其包括介于约250mOsmol/kg至约350mOsmol/kg之间。
27.如权利要求20所述的稳定的制剂，其中所述稳定的制剂保持稳定持续至少3、6、12或24个月。
28.如权利要求21所述的稳定的制剂，其中所述稳定的制剂保持稳定持续至少3、6、12或24个月。
29.如权利要求27所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体包含与氨基酸序列SEQIDNO:23至少90%相同的轻链可变区和与氨基酸序列SEQIDNO:49至少90%相同的重链可变区。
30.如权利要求27所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:23的轻链可变区和包含氨基酸序列SEQIDNO:49的重链可变区，并且其中所述单克隆抗体的量为约70mg/ml。
31.如权利要求28所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体包含与氨基酸序列SEQIDNO:23至少90%相同的轻链可变区和与氨基酸序列SEQIDNO:49至少90%相同的重链可变区。
32.如权利要求28所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:23的轻链可变区和包含氨基酸序列SEQIDNO:49的重链可变区，并且其中所述单克隆抗体的量为约140mg/ml。
33.如权利要求27所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体包含与序列SEQIDNO:465至少90%相同的轻链可变区及与序列SEQIDNO:463至少90%相同的重链可变区。
34.如权利要求28所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体包含与序列SEQIDNO:465至少90%相同的轻链可变区及与序列SEQIDNO:463至少90%相同的重链可变区。
35.如权利要求27所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:465的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQIDNO:463的重链可变区，并且其中所述单克隆抗体的量为约150mg/ml。
36.如权利要求27所述的稳定的制剂，其中所述单克隆抗体包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:465的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQIDNO:463的重链可变区，并且其中所述单克隆抗体的量为约150mg/ml。
37.一种稳定的制剂，其包含
a.含量为约70mg/ml至约200mg/ml的单克隆抗体，所述单克隆抗体包含：
i)包含与序列SEQIDNO:577有至少90%同一性的氨基酸序列的轻链可变区及包含与序列SEQIDNO:576有至少90%同一性的氨基酸序列的重链可变区；
ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:577的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQIDNO:576的重链可变区；
iii)包含与序列SEQIDNO:588有至少90%同一性的氨基酸序列的轻链可变区及包含与序列SEQIDNO:599有至少90%同一性的氨基酸序列的重链可变区；或
iv)包含氨基酸序列SEQIDNO:588的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQIDNO:589的重链可变区；
(b)约10mM乙酸钠；
(c)约9.0%w/v蔗糖；
(d)约0.004%至约0.01%w/v聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80；以及
(e)约5.2的pH。
38.一种稳定的制剂，其包含：含量为约70mg/ml至约200mg/ml的单克隆抗体，所述单克隆抗体包含：
i)包含与序列SEQIDNO:577有至少90%同一性的氨基酸序列的轻链可变区及包含与序列SEQIDNO:576有至少90%同一性的氨基酸序列的重链可变区；
ii)包含氨基酸序列SEQIDNO:577的轻链可变区及包含氨基酸序列SEQIDNO:576的重链可变区；
iii)包含与序列SEQIDNO:588有至少90%同一性的氨基酸序列的轻链可变区及包含与序列SEQIDNO:589有至少90%同一性的氨基酸序列的重链可变区；或<...

【专利技术属性】
技术研发人员：JCY陈，JP吉布斯，CS迪亚斯，S瓦泽尔曼，RAD斯科特，CL克罗斯顿，TD奥斯伦德，EA斯坦，
申请(专利权)人：安姆根有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US