一种运用高效液相色谱检测盐酸胍法辛有关物质的方法技术

本发明专利技术提供了一种运用高效液相色谱检测盐酸胍法辛有关物质的方法，包括：将含有关物质的盐酸胍法辛样品或含有关物质的胍法辛样品用稀释液配制成检测溶液，以十八烷基硅烷键和硅胶为固定相，采用含有扫尾剂的无机盐缓冲液‑有机相为流动相并进行梯度洗脱，记录HPLC谱图。与现有技术相比，本发明专利技术以十八烷基硅烷键和硅胶为填料的色谱柱，以含有扫尾剂的无机盐缓冲液体系‑有机相为流动相，可以对盐酸胍法辛或胍法辛可能存在的杂质进行有效分离并定量测定，从而有效控制盐酸胍法辛或胍法辛产品的质量，专属性强，灵敏度高，准确度良好。

A method using HPLC to detect guanfacin hydrochloride related substances

The present invention provides a method using HPLC to detect guanfacin hydrochloride related substances including: related substances containing guanfacin hydrochloride containing samples or related substances guanfacin samples by diluting into test solution, with eighteen alkyl silane bonds and silica as the stationary phase, with the finishing agent inorganic salt buffer organic phase as the mobile phase and gradient elution, recording HPLC spectra. Compared with the prior art, the invention takes eighteen alkyl silicon and silica gel column packing, with outstanding agent of inorganic salt buffer system organic phase as the mobile phase, impurities may have about guanfacin hydrochloride or guanfacine for effective separation and quantitative determination of the quality, so as to control the guanfacin hydrochloride or guanidine fasch products effectively, with strong specificity, high sensitivity, good accuracy.

【技术实现步骤摘要】
一种运用高效液相色谱检测盐酸胍法辛有关物质的方法
本专利技术属于分析化合物
，尤其涉及一种运用高效液相色谱检测盐酸胍法辛有关物质的方法。
技术介绍
盐酸胍法辛是一种治疗儿童、青少年注意力缺乏和多动症的α-2A肾上腺素受体激动剂。盐酸胍法辛化学名N-脒基-2-(2,6-二氯苯基)乙酰胺盐酸盐；CAS号为29110-48-3；分子式为C9H9Cl2N3O·HCl；结构式如下：在合成该化合物的过程中，有关键的中间体由于反应不完全而带到后续的反应中，生成反应副产物；有由于起始原料纯度不高而引入的反应副产物；还有由药物自身降解产生的降解产物；以上均属于该药的有关物质，需要进行严格的质量控制。其包含5个杂质，结构式见表1。表1盐酸胍法辛中杂质的结构式对于盐酸胍法辛合成路线中引入的杂质及降解产物，均需要进行严格的质量控制。因此，选用专属性强、灵敏度高、准确度好、易重现的检测方法对盐酸胍法辛中潜在杂质进行控制，具有非常重要的意义。美国药典USP39中公开了一种采用薄层色谱法检测盐酸胍法辛中有关物质的方法。薄层色谱法检测有关物质，是通过杂质斑点与对照斑点的颜色对比进行检测，只能判断杂质是否低于某限度，而无法确定杂质的确切含量；并且，薄层色谱法的灵敏度较低，杂质含量较少时往往检测不到；同时，薄层色谱法因受到点样时温湿度、展开环境及显色时间等影响，重现性也较差。因此薄层色谱法普遍存在难以确定杂质的确切含量、灵敏度低、重现性差等缺点，无法对产品质量进行更加准确、有效的控制。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种运用高效液相色谱法检测盐酸胍法辛有关物质的方法，该方法可对盐酸胍法辛或胍法辛中存在的具有紫外吸收的杂质进行有效分离并定量测定，从而有效控制盐酸胍法辛或胍法辛产品的质量，专属性强，灵敏度高，准确度良好。本专利技术提供了一种运用高效液相色谱检测盐酸胍法辛有关物质的方法，包括：将含有关物质的盐酸胍法辛样品或含有关物质的胍法辛样品用稀释液配制成检测溶液，以十八烷基硅烷键和硅胶为固定相，采用含有扫尾剂的无机盐缓冲液-有机相为流动相并进行梯度洗脱，记录HPLC谱图。优选的，所述检测溶液中含有关物质的盐酸胍法辛样品或含有关物质的胍法辛样品的浓度为1～20mg/ml；所述稀释液为水、甲醇、乙醇与N,N-二甲基甲酰胺中的一种或多种。优选的，所述无机盐缓冲液中的无机盐为甲酸铵、磷酸二氢铵、磷酸氢二铵、磷酸二氢钠与磷酸二氢钾中的一种或多种；所述有机相为甲醇、乙腈与异丙醇中的一种或多种。优选的，所述扫尾剂为二乙胺和/或三乙胺。优选的，所述无机盐缓冲液中无机盐的浓度为0.01～0.05mol/L；所述无机盐缓冲液的pH值范围为2.0～5.0。优选的，所述含有扫尾剂的无机盐缓冲液中扫尾剂的体积浓度为0.1％～1.0％。优选的，所述流动相的流速为0.8～1.2ml/min。优选的，所述固定相的柱温为25℃～50℃。优选的，所述梯度洗脱中，含有扫尾剂的无机盐缓冲液与部分有机相的混合液为流动相A，余下的有机相为流动相B，以体积百分数计，洗脱程序如下：时间(min)流动相A(％)070～100570～1002040～705030～605170～1006570～100所述含有扫尾剂的无机盐缓冲液与部分有机相的体积比为(70～90)：(30～10)。优选的，所述HPLC谱图为在检测波长210～254nm记录的HPLC谱图。本专利技术提供了一种运用高效液相色谱检测盐酸胍法辛有关物质的方法，包括：将含有关物质的盐酸胍法辛样品或含有关物质的胍法辛样品用稀释液配制成检测溶液，以十八烷基硅烷键和硅胶为固定相，采用含有扫尾剂的无机盐缓冲液-有机相为流动相并进行梯度洗脱，记录HPLC谱图。与现有技术相比，本专利技术以十八烷基硅烷键和硅胶为填料的色谱柱，以含有扫尾剂的无机盐缓冲液体系-有机相为流动相，可以对盐酸胍法辛或胍法辛可能存在的杂质进行有效分离并定量测定，从而有效控制盐酸胍法辛或胍法辛产品的质量，专属性强，灵敏度高，准确度良好。附图说明图1为本专利技术实施例1中混合溶液的色谱图；图2为本专利技术实施例1中空白溶剂的色谱图；图3为本专利技术实施例2中盐酸胍法辛的色谱图；图4为本专利技术实施例3中盐酸胍法辛的色谱图；图5为本专利技术实施例4中稀释液的色谱图；图6为本专利技术实施例5中盐酸胍法辛的色谱图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供了一种运用高效液相色谱检测盐酸胍法辛有关物质的方法，包括：将含有关物质的盐酸胍法辛的样品或含有关物质的胍法辛样品用稀释液配制成检测溶液，以十八烷基硅烷键和硅胶为固定相，采用含有扫尾剂的无机盐缓冲液-有机相为流动相并进行梯度洗脱，记录HPLC谱图。其中，所述稀释液为本领域技术人员熟知的稀释液即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为水、甲醇、乙醇与N,N-二甲基甲酰胺中的一种或多种，更优选为水、甲醇、乙醇与N,N-二甲基甲酰胺中的一种，再优选为N,N-二甲基甲酰胺，使检测溶液更稳定。将含有关物质的盐酸胍法辛样品或含有关物质的胍法辛样品用稀释液配制成检测溶液；所述检测溶液中含有关物质的盐酸胍法辛样品或含有关物质的胍法辛样品的浓度优选为1～20mg/ml，更优选为5～15mg/ml，再优选为8～12mg/ml，最优选为10mg/ml。将检测溶液用高效液相色谱进行检测，其进样量优选为2～10μl，更优选为2～8μl，再优选为4～6μl，最优选为5μl。本专利技术中，所述高效液相色谱以十八烷基硅烷键和硅胶为固定相，优选为InertSustainC18；其规格优选为4.6×250mm，5μm。采用含有扫尾剂的无机盐缓冲液-有机相为流动相并进行梯度洗脱；所述扫尾剂为本领域技术人员熟知的扫尾剂即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为二乙胺和/或三乙胺，更优选为三乙胺；所述含有扫尾剂的无机盐缓冲液中扫尾剂的体积浓度优选为0.1％～1.0％，更优选为0.3％～0.8％，再优选为0.4％～0.6％，最优选为0.5％；所述无机盐缓冲液中的无机盐为本领域技术人员熟知的可作为缓冲试剂的无机盐即可，并无特殊的限制，本专利技术中优选为甲酸铵、磷酸二氢铵、磷酸氢二铵、磷酸二氢钠与磷酸二氢钾中的一种或多种，更优选为磷酸二氢钾；所述无机盐缓冲液中无机盐的浓度优选为0.01～0.05mol/L，更优选为0.01～0.03mol/L，再优选为0.01～0.02mol/L，最优选为0.02mol/L；所述无机盐缓冲液的pH值优选为2.0～5.0，更优选为2.5～4，再优选为3.0～3.5，最优选为3.0；所述流动相中的有机相优选为甲醇、乙腈与异丙醇中的一种或多种，更优选为甲醇和/或乙腈。本专利技术采用加扫尾剂的缓冲盐体系作为流动相，解决了盐酸胍法辛或胍法辛及其有关物质的分离测定问题，从而确保了盐酸胍法辛或胍法辛的质量可控。在本专利技术中，所述流动相的流速优选为0.8～1.2ml/min，更优选为0.9～1.1ml/min，再优选为1.0ml/min；所述固定相的柱温优选为25本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种运用高效液相色谱检测盐酸胍法辛有关物质的方法，其特征在于，包括：将含有关物质的盐酸胍法辛样品或含有关物质的胍法辛样品用稀释液配制成检测溶液，以十八烷基硅烷键和硅胶为固定相，采用含有扫尾剂的无机盐缓冲液‑有机相为流动相并进行梯度洗脱，记录HPLC谱图。

【技术特征摘要】
1.一种运用高效液相色谱检测盐酸胍法辛有关物质的方法，其特征在于，包括：将含有关物质的盐酸胍法辛样品或含有关物质的胍法辛样品用稀释液配制成检测溶液，以十八烷基硅烷键和硅胶为固定相，采用含有扫尾剂的无机盐缓冲液-有机相为流动相并进行梯度洗脱，记录HPLC谱图。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测溶液中含有关物质的盐酸胍法辛样品或含有关物质的胍法辛样品的浓度为1～20mg/ml；所述稀释液为水、甲醇、乙醇与N,N-二甲基甲酰胺中的一种或多种。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述无机盐缓冲液中的无机盐为甲酸铵、磷酸二氢铵、磷酸氢二铵、磷酸二氢钠与磷酸二氢钾中的一种或多种；所述有机相为甲醇、乙腈与异丙醇中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述扫尾剂为二乙胺和/或三乙胺。5.根据权利要求1所述的方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：王朝丽，刘建萍，张秋佳，王珂，陈先红，邹德超，
申请(专利权)人：北京科莱博医药开发有限责任公司，
类型：发明
国别省市：北京,11