一种胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种胶原蛋白‑溶菌酶抗菌膜的制备方法，包括以下步骤：取改性的胶原蛋白溶液，将不同质量的溶菌酶分别溶解在改性的胶原蛋白溶液中，搅拌均匀后，得到不同浓度的胶原蛋白‑溶菌酶共混液；将不同浓度的胶原蛋白‑溶菌酶共混液进行最小抑菌浓度试验，得到溶菌酶的最小抑菌浓度；将具有最小抑菌浓度以及浓度大于最小抑菌浓度的胶原蛋白‑溶菌酶共混液进行最小杀菌浓度试验，得到溶菌酶的最小杀菌浓度；将具有最小杀菌浓度以及接近最小杀菌浓度的胶原蛋白‑溶菌酶共混液进行真空脱气、流延成膜后揭膜，制得胶原蛋白‑溶菌酶抗菌膜。该制备方法得出最小抑菌浓度和最小杀菌浓度后，用来指导抗菌膜的制备，方法简单易行。

Collagen lysozyme antibacterial membrane and preparation method thereof

The present invention provides a method for preparing collagen lysozyme antimicrobial film, which comprises the following steps: Taking collagen solution modification, different quality of lysozyme were dissolved in modified collagen solution, mixing evenly, get collagen lysozyme blend solution of different concentration; collagen lysozyme blend solution of different concentration the minimum inhibitory concentration test, obtained the minimum inhibitory concentration of lysozyme; with collagen lysozyme blend solution concentration is greater than the minimum inhibitory concentration and minimum inhibitory concentration of minimum bactericidal concentration test, obtained the minimum bactericidal concentration of lysozyme; with minimum bactericidal concentration and minimum bactericidal concentration close to the collagen lysozyme blend solution were vacuum degassing after the film, cast film uncovering, prepared collagen lysozyme antibiotic Film. The preparation method reaches the minimum inhibitory concentration and minimum bactericidal concentration to guide the preparation of antibacterial membrane, and the method is simple and easy.

【技术实现步骤摘要】
一种胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜及其制备方法
本专利技术涉及食品包装材料领域，具体涉及一种胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜及其制备方法。
技术介绍
可食性包装膜由于能够减少食品的风味物质散失和营养成分消耗，防止微生物侵染，能够有效地延长食品贮藏保鲜和销售期限，从而受到广泛关注。在众多的可食性包装膜载体中，胶原蛋白因其安全无毒、营养丰富、良好的成膜性和气体阻隔性能而备受青睐。但是胶原蛋白不具有抗菌活性，对食品表面在加工、储运和处理过程中的污染的微生物不具有抑制或杀死的效果，因而其在食品保存期限的长度上有局限性。另外，现有技术在制备包装膜过程中，一般先制备出包装膜成品材料，再将成品材料采用牛津杯法测得对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等的抑菌圈以测试成品材料的抗菌效果，如果测试得到的抗菌结果不好，还需调整抗菌剂的浓度重新制备包装膜，然后再测试抗菌效果，直至得到抗菌效果良好的包装膜成品材料，该制备方法缺乏科学的指导，制备方法复杂、耗时较长，浪费了大量的时间和精力。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的制备方法，该方法先对溶菌酶的抗菌效果进行测试，得出最小抑菌浓度及最小杀菌浓度后，用来指导抗菌膜的制备，使制备方法更有目的性和针对性，同时节省了大量的时间和精力。本专利技术第一方面提供了一种胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的制备方法，包括以下步骤：取改性的胶原蛋白溶液，将不同质量的溶菌酶分别溶解在所述改性的胶原蛋白溶液中，搅拌均匀后，得到不同溶菌酶浓度的胶原蛋白-溶菌酶共混液；将所述胶原蛋白-溶菌酶共混液进行最小抑菌浓度试验，得到所述溶菌酶的最小抑菌浓度；将具有所述最小抑菌浓度以及浓度大于所述最小抑菌浓度的所述胶原蛋白-溶菌酶共混液进行最小杀菌浓度试验，得到所述溶菌酶的最小杀菌浓度；将具有所述最小杀菌浓度以及浓度接近所述最小杀菌浓度的胶原蛋白-溶菌酶共混液进行真空脱气、流延成膜后揭膜，制得胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜。其中，所述最小抑菌浓度试验方法为：将不同质量的溶菌酶分别溶解到改性的胶原蛋白溶液中，搅拌均匀后，得到溶菌酶浓度分别为100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.56、0.78、0.39、0.195和0.098mg/mL的胶原蛋白-溶菌酶共混液，将大肠杆菌或与金黄色葡萄球菌菌悬液加入到所述胶原蛋白-溶菌酶共混液中，观察所述胶原蛋白-溶菌酶共混液中是否有肉眼可见的细菌沉淀，无肉眼可见细菌沉淀的所述胶原蛋白-溶菌酶共混液对应的最小的溶菌酶浓度即为胶原蛋白-溶菌酶共混液中溶菌酶对大肠杆菌或对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度。其中，所述胶原蛋白-溶菌酶共混液中溶菌酶对大肠杆菌或对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为6.25-12.5mg/mL。其中，所述最小杀菌浓度试验方法为：将具有所述最小抑菌浓度的胶原蛋白-溶菌酶共混液以及浓度大于所述最小抑菌浓度的胶原蛋白-溶菌酶共混液分别加入到培养皿中与大肠杆菌或金黄色葡萄球菌37℃共培养24-48h，然后观察所述培养皿中的细菌生长情况，无生长菌落的培养皿对应的最小的溶菌酶浓度即为胶原蛋白-溶菌酶共混液中溶菌酶对大肠杆菌或对金黄色葡萄球菌的最小杀菌浓度。其中，所述胶原蛋白-溶菌酶共混液中溶菌酶对大肠杆菌或对金黄色葡萄球菌的最小杀菌浓度为12.5-25mg/mL。其中，所述真空脱气的方法为：在真空度0.08-0.09Mpa的环境下将所述胶原蛋白-溶菌酶共混液脱气3-6min，重复脱气三次后，静置0.5-1h。其中，所述真空脱气后，将所述胶原蛋白-溶菌酶共混液进行流延成膜，然后在30-60℃下干燥4-20h，冷却后揭膜，得到胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜。其中，所述改性的胶原蛋白溶液的制备方法为：将胶原蛋白溶于蒸馏水中，在20℃-60℃温度下热处理5-30min，得到所述改性的胶原蛋白溶液。本专利技术第一方面提供的胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的制备方法，该方法先对溶菌酶的抗菌效果进行测试，得出最小抑菌浓度及最小杀菌浓度后，用来指导抗菌膜的制备，使制备方法更有目的性和针对性，同时节省了大量的时间和精力。本专利技术第二方面提供了一种胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜，其由上述的制备方法制得的。其中，所述胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的厚度为0.08-0.12mm。本专利技术第二方面提供的胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜，包括胶原蛋白和溶菌酶，两者均可生物降解，生物相容性较好，另外，溶菌酶的抗菌性能较好，得到的胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜具有抗菌防腐特性，能够抑制贮藏过程中食品微生物的生长并避免食品的二次污染，从而延长食品的保质期。综上，本专利技术有益效果包括以下几个方面：1、本专利技术提供了一种胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的制备方法，该制备方法先进行抑菌试验和杀菌试验，然后在进行成膜，制备方法具有目的性和针对性，节省了大量的时间和精力；2、本专利技术提供了一种胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜，具有抗菌防腐特性，能够抑制贮藏过程中食品微生物的生长并避免食品的二次污染，从而延长食品的保质期。附图说明图1为本专利技术实施例1的胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的制备方法的流程图；图2为本专利技术实施例1测试溶菌酶对大肠杆菌的最小抑菌浓度的细胞培养板图；图3为本专利技术实施例1测试溶菌酶对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度的细胞培养板图；图4为本专利技术实施例1测试溶菌酶对大肠杆菌的最小杀菌浓度的培养皿图；图5为本专利技术实施例1测试溶菌酶对金黄色葡萄球菌的最小杀菌浓度的培养皿图。具体实施方式以下所述是本专利技术的优选实施方式，应当指出，对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本专利技术的保护范围。本专利技术第一方面提供了一种胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的制备方法，包括以下步骤：取改性的胶原蛋白溶液，将不同质量的溶菌酶分别溶解在改性的胶原蛋白溶液中，搅拌均匀后，得到不同溶菌酶浓度的胶原蛋白-溶菌酶共混液；将胶原蛋白-溶菌酶共混液进行最小抑菌浓度试验，得到溶菌酶的最小抑菌浓度；将具有最小抑菌浓度以及浓度大于最小抑菌浓度的胶原蛋白-溶菌酶共混液进行最小杀菌浓度试验，得到溶菌酶的最小杀菌浓度；将具有最小杀菌浓度以及浓度接近最小杀菌浓度的胶原蛋白-溶菌酶共混液进行真空脱气、流延成膜后揭膜，制得胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜。本专利技术实施方式中，胶原蛋白为Ⅰ型胶原蛋白。本专利技术实施方式中，胶原蛋白为从鱼鳞、牛皮或猪皮中提取得到的。本专利技术一优选实施方式中，胶原蛋白为鱼鳞胶原蛋白，鱼鳞胶原蛋白的纯度大于90％。溶菌酶广泛分布于各种生物组织及其分泌物中，是一种无味、无毒、无害、安全性很高的高盐基蛋白质，具有生物相容性好，对组织无刺激，且具有一定的保健作用。溶菌酶催化某些细菌细胞壁多糖的水解，从而溶解这些细菌的细胞壁。溶解酶的底物特异性很强，不同来源溶菌酶作用的底物不同。按作用细胞壁不同分为细菌细胞壁溶菌酶和真菌细胞壁溶菌酶。细菌细胞壁溶菌酶又细分为一种是作用于β-1,4糖苷键的细胞壁溶解酶，另一种是作用于肽链“尾”端和酰胺部分的细胞壁溶解酶。溶菌酶不仅对细菌有明显的抑制作用，对真菌和病毒也有一定的抑制作用，在一定程度上能够阻止或延缓食物变质，同时延长食物货架保存期，溶菌酶可以作为一种绿色食品防腐剂应用于食品的防腐、保鲜和杀菌等方面的应用。本专利技术将胶原蛋白和溶菌酶混合用于制备胶原蛋白-溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胶原蛋白‑溶菌酶抗菌膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取改性的胶原蛋白溶液，将不同质量的溶菌酶分别溶解在所述改性的胶原蛋白溶液中，搅拌均匀后，得到不同溶菌酶浓度的胶原蛋白‑溶菌酶共混液；将所述胶原蛋白‑溶菌酶共混液进行最小抑菌浓度试验，得到所述溶菌酶的最小抑菌浓度；将具有所述最小抑菌浓度以及浓度大于所述最小抑菌浓度的所述胶原蛋白‑溶菌酶共混液进行最小杀菌浓度试验，得到所述溶菌酶的最小杀菌浓度；将具有所述最小杀菌浓度以及浓度接近所述最小杀菌浓度的胶原蛋白‑溶菌酶共混液进行真空脱气、流延成膜后揭膜，制得胶原蛋白‑溶菌酶抗菌膜。

【技术特征摘要】
1.一种胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取改性的胶原蛋白溶液，将不同质量的溶菌酶分别溶解在所述改性的胶原蛋白溶液中，搅拌均匀后，得到不同溶菌酶浓度的胶原蛋白-溶菌酶共混液；将所述胶原蛋白-溶菌酶共混液进行最小抑菌浓度试验，得到所述溶菌酶的最小抑菌浓度；将具有所述最小抑菌浓度以及浓度大于所述最小抑菌浓度的所述胶原蛋白-溶菌酶共混液进行最小杀菌浓度试验，得到所述溶菌酶的最小杀菌浓度；将具有所述最小杀菌浓度以及浓度接近所述最小杀菌浓度的胶原蛋白-溶菌酶共混液进行真空脱气、流延成膜后揭膜，制得胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜。2.如权利要求1所述的胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的制备方法，其特征在于，所述最小抑菌浓度试验方法为：将不同质量的溶菌酶分别溶解到改性的胶原蛋白溶液中，搅拌均匀后，得到溶菌酶浓度分别为100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.56、0.78、0.39、0.195和0.098mg/mL的胶原蛋白-溶菌酶共混液，将大肠杆菌或与金黄色葡萄球菌菌悬液加入到所述胶原蛋白-溶菌酶共混液中，观察所述胶原蛋白-溶菌酶共混液中是否有肉眼可见的细菌沉淀，无肉眼可见细菌沉淀的所述胶原蛋白-溶菌酶共混液对应的最小的溶菌酶浓度即为胶原蛋白-溶菌酶共混液中溶菌酶对大肠杆菌或对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度。3.如权利要求2所述的胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的制备方法，其特征在于，所述胶原蛋白-溶菌酶共混液中溶菌酶对大肠杆菌或对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为6.25-12.5mg/mL。4.如权利要求1所述的胶原蛋白-溶菌酶抗菌膜的制备方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：王喆，叶忱，王怀雨，
申请(专利权)人：深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44