一种可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物及其制备方法和应用，该组合物中活性成分由替莫唑胺和吲哚菁绿组成，可制备成靶向纳米粒。吲哚菁绿的光学治疗联合化疗药物替莫唑胺构建纳米载体用于抗黑素瘤治疗，体外、体内实验成功地证明了其具有协同治疗作用，可为皮肤黑素瘤治疗提供新的治疗方法和治疗模式。

Anti tumor synergistic composition capable of realizing combination treatment of chemotherapy and PTT/PDT and application thereof

The invention discloses a realization of chemotherapy combined with PTT/PDT in treating the synergistic anti-tumor composition and preparation method and application thereof, the composition of active ingredients by temozolomide and indocyanine green composition can be prepared into targeted nanoparticles. Optical indocyanine green therapy combined with temozolomide for construction of nano carrier anti melanoma treatment, in vitro and in vivo experiment successfully demonstrated the synergistic therapeutic effect, treatment methods and treatment can provide a new model for the treatment of cutaneous melanoma.

【技术实现步骤摘要】
一种可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物及其应用
本专利技术属于纳米生物医学
，具体而言，涉及一种可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物及其制备方法和应用，尤其涉及一种以树枝状聚合物作为载体的复合药物靶向纳米粒子及其制备方法和应用。
技术介绍
黑素瘤是由异常黑素细胞过度增生引发的皮肤肿瘤，恶性程度极高，预后较差，其病死率占皮肤肿瘤死亡病例的80％左右。近年来发病率不断增加，年增长率为3～5％，且具有年轻化的趋势(SiegelRL,MillerKD,JemalA.Cancerstatistics,2016.CACancerJClin.2016,66(1):7-30.)。临床上治疗黑素瘤常用的化疗药物有达卡巴嗪、替莫唑胺(TMZ)、铂类、紫杉醇、福莫司汀等，然而疗效并不令人满意。其中，占主导地位的达卡巴嗪有效率仅为7.5％～12.2％，患者中位生存期5～6月(GogasHJ,KirkwoodJM,SondakVK.Chemotherapyformetastaticmelanoma.Cancer.2007,109(3):455-464.)。替莫唑胺是一种新型的第2代口服烷化剂，因其可口服，生物利用度高，能透过血脑屏障，对脑转移有治疗和预防作用，被很多国家推荐用于黑素瘤一线治疗(AgarwalaSS,KirkwoodJM.Temozolomide,anovelalkylatingagentwithactivityinthecentralnervoussystem,mayimprovethetreatmentofadvancedmetastaticmelanoma.Theoncologist.2000,5(2):144-151.)。TMZ通过DNA链甲基化，引起DNA单链或双链断裂，阻断DNA复制，最终导致肿瘤细胞死亡。然而，同其它化疗药物一样，TMZ的疗效有限，且由于缺少靶向性，TMZ在杀伤肿瘤细胞的同时对其他非肿瘤细胞也有杀伤作用，引起毒副作用。药代动力学显示口服TMZ后血浆药物浓度于1h内达峰，之后消除迅速，平均半衰期为1.8h。TMZ在生理环境下很容易降解，在肿瘤部位的酸性环境中反而较稳定(郑蓉,蒋德锡,廖心丹，等.温度及pH对替莫唑胺溶液稳定性的影响.华西药学杂志.2012,(05):550-551.)。此外，TMZ作用机制会启动细胞内修复机制，上调O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基因表达，后者通过自身活性中心的半胱氨酸残基与O6-甲基鸟嘌呤上的烷基基团共价结合并将其移除，从而使损伤的DNA修复，导致肿瘤细胞对TMZ耐药(BradburyPA,MiddletonMR.DNArepairpathwaysindrugresistanceinmelanoma.Anti-CancerDrugs.2004,15(5):421-426.)。因此，如何提高TMZ的稳定性和敏感性，增强其靶向性从而降低其副作用是目前研究的热点与难点，也是提高黑素瘤整体疗效的关键。近年来，纳米技术在肿瘤的诊断和治疗上的研究发展快速，越来越多的研究人员将研究焦点放于纳米技术的生物医学应用上，利用纳米粒独特的结构和理化性质为恶性肿瘤的诊断和治疗提供新的策略和手段。目前研究较多的用作药物载体的纳米材料有脂质体、聚合物胶束、树枝状聚合物、二氧化硅、金纳米粒等，其中聚酰胺-胺(polyamidoamine,PAMAM)是一种人工合成的纳米级大分子化合物。Tomalia等(TomaliaD,BakerH,DewaldJ,etal.ANewClassofPolymers:Starburst-Dendritic.PolymerJournal.1985,17(1):117-132.)首次研究的树枝状高分子PAMAM，是以乙二胺为核，通过Michael加成反应和对酯基的酰胺化反应这两个重复的步骤合成的。但是PAMAM表面的正电荷对细胞具有一定的细胞毒性和溶血毒性(ImaeT,HamaguchiS.Networkofsodiumhyaluronatewithnano-knotsjunctionofpoly(amidoamine)dendrimer[J].Carbohydratepolymers.2012,88(1):352-360.)，因此需要进一步修饰才能更好的发挥作用。Kim等(KimT,SeoHJ,ChoiJS,etal.PAMAM-PEG-PAMAM:noveltriblockcopolymerasabiocompatibleandefficientgenedeliverycarrier.Biomacromolecules.2004,5(6):2487-2492.)用PEG修饰PAMAM来降低其正电荷毒性，细胞活力实验证明修饰PEG后的PAMAM毒性明显降低。然而，PEG的存在会导致纳米粒的粒径急剧增大(JiangG,LiR,TangJ,etal.Formulationoftemozolomide-loadednanoparticlesandtheirtargetingpotentialtomelanomacells.Oncologyreports,2016.)，影响纳米载体的被动靶向性和肿瘤渗透性。另外，经PEG修饰后的载体会在一定程度上降低药物的释放，且对PAMAM本身的酸敏感性及质子海绵效应造成一定的影响，这将降低药物的抗肿瘤效果。再者，纳米载体负载化疗药物用于抗肿瘤治疗在近几十年里取得了较大的成绩，但是单一治疗模式仍然有很多不足，例如药物释放不良、需要多次给药、疗效差等。
技术实现思路
鉴于现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，同时提供一种毒性小、抗肿瘤效果显著的、以树枝状聚合物作为载体的复合药物靶向纳米粒子的制备方法。为了实现上述技术目的，本专利技术人通过大量试验研究并不懈努力，最终获得了如下技术方案：一种可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，该组合物中活性成分由替莫唑胺和吲哚菁绿组成。优选地，如上所述可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，其中的活性成分中替莫唑胺和吲哚菁绿的重量比为(10～240)：1。进一步优选地，如上所述可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，其中的活性成分中替莫唑胺和吲哚菁绿的重量比为(40～120)：1。需要说明的是，吲哚菁绿是经美国FDA批准可以用于临床近红外成像的有机小分子，属于一种良好的光敏剂，在NIR照射下可以产生单线态氧发挥肿瘤杀伤作用。然而，吲哚菁绿在生理介质中不稳定，容易与培养基或者血液中的蛋白质发生非特异性吸附而被清除，且其同样不具有靶向性，因此不能特异性的进入病灶局部，这些缺点限制了其应用。为了提高其稳定性和局部浓度，本专利技术人创造性地使用纳米载体将替莫唑胺和吲哚菁进行装载，获得了一种毒性小、抗肿瘤效果显著的复合药物靶向纳米粒子。具体地，上述所述可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物可以为靶向纳米粒，所述的靶向纳米粒的通式为HA-PAMAM-COOH-TMZ-ICG，其中HA为透明质酸，PAMAM为树枝状聚合物；COOH为羧基，TM本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，其特征在于，该组合物中活性成分由替莫唑胺和吲哚菁绿组成。

【技术特征摘要】
1.一种可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，其特征在于，该组合物中活性成分由替莫唑胺和吲哚菁绿组成。2.根据权利要求1所述可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，其特征在于，所述活性成分中替莫唑胺和吲哚菁绿的重量比为(10～240)：1。3.根据权利要求2所述可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，其特征在于，所述活性成分中替莫唑胺和吲哚菁绿的重量比为(40～120)：1。4.根据权利要求1-3任一项所述可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，其特征在于，该组合物为靶向纳米粒，所述的靶向纳米粒的通式为HA-PAMAM-COOH-TMZ-ICG，其中HA为透明质酸，PAMAM为树枝状聚合物；COOH为羧基，TMZ为替莫唑胺，ICG为吲哚菁绿。5.根据权利要求4所述可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，其特征在于，所述的树枝状聚合物为以乙二胺为核的第1-10代聚酰胺-胺树状大分子。6.根据权利要求5所述可实现化疗和PTT/PDT联合治疗的抗肿瘤协同组合物，其特征在于，所述的树枝状聚合物为以乙二胺为核的第4-6代聚酰胺-胺树状大分子。7.一种根据权利要求4所述可实现化疗和PTT...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋冠，侯晓阳，唐建琴，李荣花，庞雁宇，刘彦群，
申请(专利权)人：徐州医科大学附属医院，
类型：发明
国别省市：江苏,32