一种高通量快速检测食用菌中农药残留的方法技术

本发明专利技术涉及一种高通量快速检测食用菌中农药残留的方法，属于农产品分析检测技术领域。该方法基于气相色谱‑质谱联用技术（GC‑MS），通过建立三元组数据库系统，实现食用菌中农药残留的快速检测和筛查，步骤包括：全自动样品预处理、GC‑MS测定以及三元组数据库筛查系统快速分析。本发明专利技术可根据不同样品模型校准曲线数据库，实现评估食用菌中农药残留的含量，实现了高通量、全自动的农药残留筛查分析。

Method for high throughput rapid detection of pesticide residues in edible fungi

The invention relates to a method for detecting pesticide residues in edible fungi by high throughput and rapid detection, belonging to the technical field of analysis and detection of agricultural products. The method is based on gas chromatography mass spectrometry (GC MS), through the establishment of three tuple database system, to realize the rapid detection and screening of edible fungus, pesticide residues in the steps include: automatic sample pretreatment and determination of GC and MS three tuple database screening system for fast analysis. The invention can calibrate the curve database according to different sample models, and realize the evaluation of the pesticide residue in the edible fungi, and realize the high throughput and full-automatic pesticide residue screening analysis.

【技术实现步骤摘要】
一种高通量快速检测食用菌中农药残留的方法
本专利技术涉及一种快速检测食用菌中农药残留的方法，属于农产品分析检测

技术介绍
我国是世界上最大的食用菌生产、出口大国，随着食用菌工厂化栽培技术的逐渐成熟，食用菌产业逐渐发展壮大，特别是金针菇、杏鲍菇的栽培量逐年增多，食用菌在生产、销售、加工过程中的安全问题也越来越受重视。食用菌在种植、采摘、运输及销售过程中的农药残留、环境污染物、容器包装添加剂、甲醛、二氧化硫、有害金属等有毒有害物质安全问题日益受到国内外重视。然而我国食品安全风险监测工作仍存在监测能力不足、风险物质筛查困难、各地区机构检测能力差异大等问题，与发达国家仍有较大差距，解决食用菌安全问题已成为我国食用菌产业发展的紧迫任务，食用菌的生产也必将要由追求数量型向质量效益型方向转变。食品中农药残留的分析主要由样品的提取净化前处理和检测两部分组成，目前，常用的预处理技术主要有固相萃取（SPE）、超临界流体萃取（SFE）、微波辅助萃取（MAE）、基质固相分散萃取（MSPDE）等，这些传统的食品中农药残留的预处理方法往往样品需求量大、提取和净化步骤复杂繁琐、操作时间长、溶剂消耗大，使得农产品中农药残留的检测效率大大下降，往往导致很多农产品的安全监测严重滞后。在检测技术方面，方法有很多，主要有酶抑制法、酶联免疫法、分光亮度法、色谱法及质谱法等，这些测定方法在提高农药定性定量快速检测等方面发挥着巨大的作用，但往往存在样品需求量大、需要配制标准溶液等问题。目前，国内的研究者在对食品中风险化合物筛查的研究中通常是用标准品构建图谱库来对目标物定性和定量，或者利用已有的谱库（NIST）定性然后用标准品制作标准曲线来定量。一些研究也建立了香菇、杏鲍菇、双孢菇等食用菌中几种氨基甲酸酯和有机氯农药残留的GC-MS测定方法。但是现有的分析方法只是针对特定几种或者一类特定目标物进行检测，而对于可能存在于食品中但不是目标类物质这类有机物则无法进行筛查，难以实现对所有的农药残留进行全扫描和筛查。农药残留定量检测时需要配制其标准溶液和制作标准曲线，分析通量较低，也很难实现统一的和同一条件下的多成分一起分析。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，针对上述问题，提供一种高通量快速检测食用菌中农药残留的方法，步骤为：（1）全自动样品预处理技术：提取：每克食用菌样品加入2mL乙腈，匀浆提取2min，加入0.4g无水硫酸镁和0.1g氯化钠，涡旋振荡1min后离心，取上清液旋蒸浓缩至近干，加1mL乙腈溶解，过0.22μm滤膜待测定。萃取：采用涂有聚二甲氧基硅氧烷的搅拌棒进行萃取。搅拌棒在300℃下加热40min，氮气流速1.2mL/min，萃取时1000r/min搅拌45min。（2）GC-MS测定：色谱条件：色谱柱温度程序：初始温度70℃，保持2min，以25℃/min升至150℃，以3℃/min升至200℃，以8℃/min升至280℃，保持10min；载气：高纯氦气，纯度≥99.999%；载气流速1.0mL/min；进样口温度：280℃；溶剂延迟：3.5min；进样方式：不分流进样；进样量：2µl。质谱条件：电离方式：EI；电子能量70eV；离子源温度230℃；四级杆温度150℃；质谱调谐方式：DFTPP调谐，分辨率和灵敏度均达到最佳匹配。扫描方式：全扫描模式，扫描质量范围35～550，扫描速度：2.86scan/sec。（3）基于GC-MS的三元组数据库系统：由保持时间数据库、MS谱图谱库、化合物的校证曲线组成。本专利技术快速检测食用菌种农药残留的方法，利用全自动预处理与GC-MS结合三元组数据库建立食用菌中农药多残留的快速筛查方法，为食用菌样品的快速筛查提供了可靠的技术支持和更加快速简便的解决途径，本专利技术可应用于食用菌样品突发事件的快速处置应急工作，大大缩短样品的分析时间，提高检测筛查的工作效率。全自动样品预处理解决食用菌中农药残留在预处理过程中样品需求量大、提取和净化步骤复杂繁琐、操作时间长、溶剂消耗大、成本高、人为误差干扰等问题，方法灵活、高通量且能快速筛查。动态顶空进样有效减少了有机溶剂的使用量，利用高纯气体萃取也避免了溶剂引入干扰因素。GC-MS技术结合三元组数据库建立的快速筛查方法不需要配制标准溶液和制作标准曲线，不需要标准物质来定性/定量样品中的有害物质，直接通过校准曲线数据库就可以评估药物和农药的含量，自动检出并定量化学风险物所需时间短，可以检测农药残留，环境污染物，容器包装添加剂等的多成分分析用的近100种化合物，有效解决食用菌中风险物筛选困难、检测速度慢、获得数据差异大，以及在传统分析中需要配制标准溶液进行定性/定量分析时所耗费的人力、财力、物力等诸多问题。具体实施方式以下结合具体实例对本专利技术的方法和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。实施例检测香菇中的农药残留准确称量10.0000g香菇样品加入20mL乙腈，匀浆提取2min，加入4g无水硫酸镁和1g氯化钠，涡旋振荡1min，4000r/min离心10min，取上清液旋蒸浓缩至近干，加1mL乙腈溶解，过0.22μm滤膜待测定。采用涂有聚二甲氧基硅氧烷的搅拌棒进行萃取，设置搅拌棒在300℃下加热40min，氮气流速1.2mL/min，萃取时1000r/min搅拌45min。GC-MS测定：色谱条件：色谱柱温度程序：初始温度70℃，保持2min，以25℃/min升至150℃，以3℃/min升至200℃，以8℃/min升至280℃，保持10min；载气：高纯氦气，纯度≥99.999%；载气流速1.0mL/min；进样口温度：280℃；溶剂延迟：3.5min；进样方式：不分流进样；进样量：2µl。质谱条件：电离方式：EI；电子能量70eV；离子源温度230℃；四级杆温度150℃；质谱调谐方式：DFTPP调谐，分辨率和灵敏度均达到最佳匹配。扫描方式：全扫描模式，扫描质量范围35～550，扫描速度：2.86scan/sec。建立基于GC-MS的三元组数据库系统，由保持时间数据库、MS谱图谱库、化合物的校证曲线组成，由此改进和建立的18种食用菌中常见的农药的保留时间、目标离子和定量离子数据库。三元组数据库自动检出化合物并相对定量仅需2分钟。检出限为0.001mg/kg～0.050mg/kg，平均回收率为79%～110%，相对标准偏差为1.0%～5.8%，完全符合农药残留分析方法的要求。试验结果表明，本方法操作简单、灵敏度高、重现性好，能满足食用菌中农药残留的筛查检测要求。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高通量快速检测食用菌中农药残留的方法，其特征在于：将以下三个步骤连接起来：（1）全自动样品预处理；（2）GC‑MS测定；（3）三元组数据库快速分析与筛查。

【技术特征摘要】
1.一种高通量快速检测食用菌中农药残留的方法，其特征在于：将以下三个步骤连接起来：（1）全自动样品预处理；（2）GC-MS测定；（3）三元组数据库快速分析与筛查。2.根据权利要求1所述的一种高通量快速检测食用菌中农药残留的方法，其特征在于：具体步骤如下：（1）全自动样品预处理：提取：每克食用菌样品加入2mL乙腈，匀浆提取，加入0.4g无水硫酸镁和0.1g氯化钠，涡旋振荡后离心，取上清液旋转蒸发至近干，加1mL乙腈溶解，过0.22μm滤膜待测定；萃取：采用涂有聚二甲氧基硅氧烷的搅拌棒进行萃取，搅拌棒在300℃下加热40min，氮气流速1.2mL/min，萃取时1000r/min搅拌45min；（2）GC-MS测定：色谱...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨文建，王柳清，胡秋辉，方勇，裴斐，马宁，
申请(专利权)人：南京财经大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32