一株室温下长货架期存活的罗伊氏乳杆菌制造技术

本发明专利技术公开了一株室温下长货架期存活的罗伊氏乳杆菌，命名为：罗伊氏乳杆菌WHH1689，该菌株已于2016年11月15日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏，其保藏编号为CGMCC No.13122。本发明专利技术能在20‑37℃环境温度下、在发酵乳制品中存活3‑7个月，且活菌数能维持10

Lactobacillus plantarum with a long shelf life at room temperature

The invention discloses a long shelf life at room temperature the survival of Lactobacillus reuteri, named as Lactobacillus reuteri WHH1689, in November 15, 2016 the strain has been preserved in common microbe center China microbe preservation management committee, the preservation number of CGMCC No.13122. The invention can in 20 37 C ambient temperature in fermented dairy products survived 3 and 7 months, and the number of live bacteria can maintain 10

【技术实现步骤摘要】
一株室温下长货架期存活的罗伊氏乳杆菌
本专利技术涉及微生物
，特别涉及一株室温下长货架期存活的罗伊氏乳杆菌。
技术介绍
乳酸菌(Lacticacidbacteria，LAB)是一类能够分解糖类以产生乳酸为主要代谢产物的细菌的通称。人类引用发酵乳品有非常悠久的历史，所以乳酸菌被认为是非常安全的菌种，能增进肠内菌群质量，提升人类健康，是益生菌中最重要的一类。随着益生菌的保健作用越来越来被消费者理解和接受，益生菌市场在迅速膨胀。益生菌主要以冻干菌粉或液态发酵制剂的形式在食品、保健品、膳食补充剂和药品中应用，其在食品中的产品形式主要有：益生菌乳制品-添加双歧杆菌、嗜酸乳杆菌等活菌的酸奶，含干酪乳杆菌、植物乳杆菌等的活性乳酸菌饮料；益生菌非乳制品-益生菌发酵大豆饮料、益生菌果汁饮料、益生菌燕麦饮料等；益生菌谷物食品-益生菌麦片及其他谷物食品；益生菌蛋白粉；益生菌巧克力；益生菌冰淇淋等。目前市场上含活性乳酸菌饮料或酸奶都需要在4-10℃保藏，且保质期一般在20-30天左右，保藏条件要求高，且保质期短。产品受冷链运输、低温储藏等因素的制约，目前销售市场主要集中于一、二线城市，很难覆盖到三四线城市或偏僻的农村地区。然而，随着越来越多消费者对健康产品的需求升级，地级市及以下城市地区消费者对益生菌产品的增长贡献连年增加，显示出强劲的增长潜力。一方面是由冷链系统不完善而导致的活性益生菌饮料制品无法全程低温保存的现实困境，另一方面是消费者对健康饮品的巨大需求所形成的巨大市场潜力，使得能够适应常温运输、储存的活性乳酸菌更具有市场前景。此类产品将打破市场分布的局限性，让偏远地区的消费者也能饮用健康的益生菌发酵产品。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一株室温下长货架期存活的罗伊氏乳杆菌，能在20-37℃环境温度下、在发酵乳制品中存活3-7个月，且活菌数能维持104CFU/ml以上，该罗伊氏乳杆菌在室温下既可长时间存活，且能维持较高的活菌数，拓宽了活性乳酸菌产品的销售范围。本专利技术解决技术问题所采用的技术方案是：一株室温下长货架期存活的罗伊氏乳杆菌，命名为：罗伊氏乳杆菌Lactobacillusreuteri，该菌株已于2016年10月18日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏，其保藏编号为CGMCCNo.13122。目前，乳酸菌发酵制品为保证在货架期内的有效活菌数，必须有相应的冷链系统配套支持，这样不仅限制了乳酸菌发酵制品中的市场发展，同时也大大增加了产品的生产及运营成本。因此，开发能够室温(20-37℃环境温度)且长时间保存(简称室温长保)的乳酸菌发酵制品成为乳酸菌产业发展的必然趋势和新的增长点。室温长保乳酸菌关键技术研究及产业化方面，国内外的研发投入及产品开发等方面都明显不足，主要理论困惑及技术瓶颈有以下三个方面：首先，具有活性的乳酸菌在室温条件下，代谢活动将持续进行，改变发酵产品原有的pH值、组织状态、风味等性状；其次，随着时间推移，乳酸菌发酵产酸降低产品pH值，较强的酸性环境导致菌体逐渐死亡失活；再次，如何保证室温长保性乳酸菌发酵制品的稳定性及益生功能。本专利技术所提供的罗伊氏乳杆菌Lactobacillusreuteri可在相关食品饮料产品中解决以上3个问题，即(1)该株菌株添加到目前市售常温酸奶(或灭活酸奶)中，菌株进入休眠状态，代谢活动处于停滞状态，原有产品pH值、组织状态、风味等性状不发生改变；(2)随着时间推移，该株乳酸菌不进行发酵产酸，不会使产品中出现较强的酸性环境，不会因为酸度过强而造成的菌体逐渐死亡失活；(3)所生产的乳酸菌发酵制品其稳定性及益生功能不改变。除上述3点外，该株菌能够在20-37℃环境温度下，3-7个月长时间货架期内维持104CFU/ml以上的活菌数。目前，在此相关领域内的乳酸菌菌株及产品应用还处于空白。本专利技术所提供的罗伊氏乳杆菌Lactobacillusreuteri应用领域包括但不限于食品、饮料(液体、固体)、饼干、水、药品等产品范畴内，优选应用范围：牛乳制品、发酵牛乳制品(含其他活性乳酸菌或灭活乳酸菌的制品)、植物蛋白制品、发酵植物蛋白制品、果汁制品(包括复原果汁制品、原汁果汁制品)、茶饮料、水等。作为优选，所述罗伊氏乳杆菌Lactobacillusreuteri具有在20-37℃环境温度下、在发酵乳制品中存活3-7个月，且活菌数能维持104CFU/ml以上。作为优选，所述罗伊氏乳杆菌Lactobacillusreuteri具有在25-32℃环境温度下、在发酵乳制品中存活3-7个月，且活菌数能维持104CFU/ml以上。作为优选，所述罗伊氏乳杆菌Lactobacillusreuteri的16SrDNA序列见SEQIDNo.1所示。所述罗伊氏乳杆菌Lactobacillusreuteri的用途，应用于发酵乳制品、含果汁饮料、茶饮料、固体饮料中。本专利技术的有益效果，能在20-37℃环境温度下、在发酵乳制品中存活3-7个月，且活菌数能维持104CFU/ml以上，该罗伊氏乳杆菌在室温下即可长时间存活，且能维持较高的活菌数，拓宽了活性乳酸菌产品的销售范围。附图说明图1是本专利技术罗伊氏乳杆菌Lactobacillusreuteri电镜照片。具体实施方式下面通过具体实施例，对本专利技术的技术方案作进一步的具体说明。本专利技术中，若非特指，所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。实施例：一、菌株筛选10％(w/w)复原脱脂乳配置为将脱脂奶粉100g与900g水混匀后，灭菌，冷却。专利技术人拟从传统食品中获得所需菌株，将从中国西藏、新疆、青海、云南等地采集到的传统发酵制品，包括酸奶，酥油茶，青稞酒，马奶酒，泡菜等样品，无菌生理盐水梯度稀释至10-2，各稀释梯度依次涂MRS平板，37℃培养48h。接种针挑取菌落形态各异的菌落至MRS平板三区交叉划线直至出现单菌落大小均一、形态一致。选择革蓝氏染色为紫色(阳性)的菌株，进行10％(w/w)复原脱脂乳凝乳实验，得到5株具有下述(1)所规定发酵性的菌株。将5株菌添加到中性乳体系和酸性乳体系中，得到1株具有下述(2)和(3)所规定室温活性的菌株，命名为WHH1689(来源自西藏地区的青稞酒)。筛选标准如下：(1)涉及发酵性。在10％(w/w)复原脱脂乳中，在20～37℃的温度范围内培养3个月，如果具有发酵性的菌株，则会发生凝乳。为了实现室温添加活性乳酸菌不改变产品原有风味质构，因此筛选不具有发酵性的菌株，即菌株在10％(w/w)复原脱脂乳中，20～37℃的温度范围内培养3个月，不凝乳。(2)涉及活性。在10％(w/w)复原脱脂乳中，20～37℃的温度范围内培养3个月，一般不发生凝乳的乳酸菌，3个月后基本检测不到活菌数。所述具有室温存活能力的菌株，当初始加入量107CFU/ml时，3个月后活菌数能够维持在104CFU/ml以上。(3)涉及室温活性。通常益生菌发酵乳制品，pH在4.0～4.5之间，保质期20天左右。此类产品需要低温储存，即便如此，乳酸菌在保质期内还会发生大量死亡。所述具有室温活性的菌株，在pH为4.2的发酵乳体系中，20～37℃储存3个月，活菌数维持在104CFU/ml以上。二、微本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株室温下长货架期存活的罗伊氏乳杆菌，其特征在于，命名为：罗伊氏乳杆菌WHH1689，该菌株已于2016年11月15日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏，其保藏编号为CGMCC No.13122。

【技术特征摘要】
1.一株室温下长货架期存活的罗伊氏乳杆菌，其特征在于，命名为：罗伊氏乳杆菌WHH1689，该菌株已于2016年11月15日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏，其保藏编号为CGMCCNo.13122。2.根据权利要求1所述的罗伊氏乳杆菌，其特征在于，所述罗伊氏乳杆菌WHH1689具有在20-37℃环境温度下、在发酵乳制品中存活3-7个月，且活菌数能维持104CFU/ml以上。3.根据权利要求2所述的罗伊氏...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯保朝，李言郡，陈丽娥，陈苏，李宝磊，陈琳，马广辉，葛红娟，康国凯，李理，赵建云，柯雪琴，翁潞薇，
申请(专利权)人：杭州娃哈哈科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33