兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法技术

兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法涉及生物工程的植物组织培养繁育方法，包括以下步骤：A、人工杂交授粉；B、无菌播种及原球茎萌发阶段；C、增殖分化培养阶段；D、壮苗生根阶段；E、炼苗及移栽。“优优兜兰”综合了双亲的优良性状，具有株型紧凑，花形独特典雅，花色绚烂靓丽，易于栽培，平均花期长达50天等优点，避免了花数单一和花葶过长易倒伏和折断的缺点。通过本发明专利技术方法，种子萌发率和开花率高，栽培周期为3‑4年，是获得大量“优优兜兰”种苗的高效率试管繁殖方法，具有萌发率高，成苗快，种苗品质好、生长势强等优势，能够得到整齐化一的试管苗，并在短时间内提供大量的种苗，从而更好的保护野生资源。

Tissue culture and rapid propagation method of \Lan You Lan\

About new varieties youyou Paphiopedilum \micropropagation method involves biological engineering plant tissue culture breeding method, which comprises the following steps: A, B, artificial pollination; aseptic seeding and protocorm germination stage; C, D, proliferation and differentiation of cultured stage; seedling rooting stage, seedling and transplanting; E. Youyou Paphiopedilum \has good comprehensive traits from parents, with a compact plant type, flower shaped unique and elegant, gorgeous and beautiful color, easy cultivation, the average flowering for 50 days has avoided the flower number of single and long scapes lodging and broken disadvantages. By the method of the invention, the seed germination rate and flowering rate is high, the cultivation period of 3 4 years, breeding high efficiency tube to obtain a large number of \youyou Paphiopedilum\ seedling method has high germination rate, seedling seedling fast, good quality, strong growth potential and other advantages, can get a neat plantlets. And provide a large number of seedlings in a short period of time, in order to better protect the wild resources.

【技术实现步骤摘要】
兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法
本专利技术涉及生物工程的植物组织培养繁育方法，特别是涉及一种兜兰新品种“优优兜兰”的组培快繁方法。
技术介绍
兰科植物是自然界最大的家族之一，是有花植物中最为庞大和进化水平极高的类群之一，在被子植物当中仅次于菊科和禾本科位于第三大科。全世界的兰科植物约有700属，20000-30000种，广泛分布于从温带、亚热带到热带的广大区域。我国已发现并定名的兰花约170余属1300余种，其中2/3为附生兰，1/3为地生兰。目前，整个兰科植物已被列入《濒危野生动植物种国际贸易公约》附录Ⅰ或Ⅱ。贵州是一个喀斯特地貌广泛发育的高原省份，在地理环境上属于亚热带气候，具有独特复杂的地形地貌、植被类型多样和良好的水热条件，适宜多种植物繁衍生息，同时也孕育了较丰富的兰花资源。贵州省境内分布有兰科植物约76属320余种，包括大量的变种及品种。兜兰属（PaphiopedilumPfitz）植物是兰科植物最具观赏价值的物种之一，兜兰由于独特的花朵造型、绚丽的花朵色彩、持久的观赏花期而具有极高的观赏价值，全世界广泛栽培。中国是兜兰属植物的主要产地之一，是世界兜兰属的重要分布地和许多新种的模式产地，有18种（Chen，1999）。自20世纪80年代初，我国的兜兰属植物开始出现在欧美市场；80年代末至90年代中期是我国野生兜兰属植物贸易的高峰，兜兰市场迅速扩大，不计其数的植株出现在一些欧美种植场和花卉市场。兜兰新品种“优优”（PaphiopedilumGZSLKYYouyou），于2016年08月17日在英国皇家园艺学会（RoyalHorticulturalSociety简称RHS）登陆，并获得了兰花新品种登记证书。英国皇家园艺学会是世界上唯一的、权威的兰花新品种登录机构，该机构只登录首次育成的兰花属间和种间杂交种。“优优兜兰”是以长瓣兜兰（Paphiopedilumdianthum）为母本，小叶兜兰（Paphiopedilumbarbigerum）为父本，进行杂交育种方法选育而成，由于“优优兜兰”胚发育不完全，在自然状态下繁殖困难，存在种子萌发率极低，成苗率低，生长速度慢等缺点；传统的无性分株繁殖法，周期长，繁殖系数低，每年只能增殖1～3倍，常规繁殖难度大。因此如何运用植物生物促成方法快速繁殖“优优兜兰”已成为兰科植物保育及应用的重点课题。兜兰属的杂交育种由于受种子萌发条件的限制，发展很缓慢，自从兰科植物无菌播种技术应用后，兜兰属植物杂交育种得到了快速发展。但“优优兜兰”属于兰科、兜兰属植物的新品种，其组培快繁方法尚处于摸索、处理阶段，“优优兜兰”种子极其微小，采用其它兜兰属的成熟的组培快繁育苗方法，导致败育率极高，甚至出现完全败育的状态。而兰花的培育周期又长，仅杂交、育苗期动辄就要1-3年。所以研究一种败育率低、采用组培快繁方法、可实现批量工厂化育苗方法，就成为“优优兜兰”快速走向市场、满足人们需求的重要前提条件。
技术实现思路
为解决现有技术中“优优兜兰”因胚发育不完全，在自然状态下繁殖困难的技术问题，本专利技术提供一种败育率低，可以极大的提高繁殖系数的高效率试管繁殖方法，即兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法。兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，包括以下步骤：A、人工杂交授粉：以长瓣兜兰为母本，小叶兜兰为父本，选取生长健壮的长瓣兜兰母本及父本在开花时开展人工辅助授粉，授粉后370到390天，将发育至基本成熟而未开裂的果实作为外植体；B、无菌播种及原球茎萌发阶段：选用饱满的果实用酒精浸泡，置于升汞溶液中消毒，无菌水冲洗，用解剖刀切开果实，用接种针将褐色粉末种子接种到培养基上，培养80-100天，形成原球茎及芽混合体；C、增殖分化培养阶段：为获得更多的种苗，将芽和原球茎混合组织接种在1/2MS添加6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、α-萘乙酸（NAA）培养基上，经140-160天培养，长成丛生带短根的小苗；D、壮苗生根阶段：将长成的丛生植株分开，接种到1/4MS添加α-萘乙酸（NAA）的培养基上，直到长成具2-3条根、3-4片叶的完整植株。E、炼苗及移栽：当试管苗长至3-4厘米时出瓶，出瓶前在温室中的自然光照下炼苗，然后将其从玻璃瓶中取出，移入碎树皮和腐殖土的混合基质中；加强温度、温度、遮阴及通风管理，“优优兜兰”即可正常生长，成苗的移栽成活率可达90％以上；定期浇一次含氮、磷、钾的复合肥，薄肥勤施，栽培中加强病虫害管护措施即可建立兜兰新品种“优优兜兰”种苗的产业化培育方法体系。本专利技术的有益效果是：“优优兜兰”综合了双亲的优良性状，具有株型紧凑，花形独特典雅，花色绚烂靓丽，易于栽培，平均花期可达50天，其保持了母本的多花特性和父本的短花葶特性，避免了花数单一和花葶过长易倒伏和折断的缺点，具有极高的观赏价值。种子萌发率和开花率高，栽培周期为3-4年，是兜兰新品中极具观赏价值的珍品，本专利技术通过兜兰新品种“优优兜兰”的组培繁殖方法研究，可以提高繁殖系数，是获得大量“优优兜兰”种苗的高效率试管繁殖方法，具有萌发率高，成苗快，种苗品质好、生长势强等优势，能够得到整齐化一的试管苗，并在短时间内提供大量的种苗，为“优优兜兰”的种苗生产提供一条有效的途径，从而更好的保护野生资源。附图说明本专利技术的附图说明如下：图1：兜兰新品种“优优兜兰”开花图片；图2：兜兰新品种“优优兜兰”栽培图片。具体实施方式下面对本专利技术作进一步的说明：兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，包括以下步骤：A、人工杂交授粉：以长瓣兜兰为母本，小叶兜兰为父本，选取生长健壮的长瓣兜兰母本及父本在开花时开展人工辅助授粉，授粉后370到390天，将发育至基本成熟而未开裂的果实作为外植体；B、无菌播种及原球茎萌发阶段：选用饱满的果实用酒精浸泡，置于的升汞溶液中消毒，无菌水冲洗，用解剖刀切开果实，用接种针将褐色粉末种子接种到培养基上，培养80-100天，形成原球茎及芽混合体；C、增殖分化培养阶段：为获得更多的种苗，将芽和原球茎混合组织接种在1/2MS添加6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、α-萘乙酸（NAA）培养基上，经140-160天培养，长成丛生带短根的小苗；D、壮苗生根阶段：将长成的丛生植株分开，接种到1/4MS添加α-萘乙酸（NAA）的培养基上，直到长成具2-3条根、3-4片叶的完整植株；E、炼苗及移栽：当试管苗长至3-4厘米时出瓶，出瓶前在温室中的自然光照下炼苗，然后将其从玻璃瓶中取出，移入碎树皮和腐殖土的混合基质中；加强温度、温度、遮阴及通风管理，“优优兜兰”即可正常生长，成苗的移栽成活率可达90％以上；定期浇一次含氮、磷、钾的复合肥，薄肥勤施，栽培中加强病虫害管护措施即可建立兜兰新品种“优优兜兰”种苗的产业化培育方法体系。进一步的，获取“优优兜兰”的组培苗，父本和母本之间的杂交过程是实现以下三个问题的至关重要的步骤：1、获得的种子是否为“优优兜兰”新品种；2、杂交获取的种子是否可以培育出“优优兜兰”；3、培育出的“优优兜兰”是否达到品质要求。具体的做法为：8月初兜兰开花季节，人工控制调节父母本的开花状况，母本长瓣兜兰花苞快张开时，喷洒一次浓度为1000PPM的乙烯利来促进长瓣兜兰开花，一周后再用同样的方法促进小叶兜兰开花，以长瓣兜兰开花开始计算时间两周后再进本文档来自技高网...

【技术保护点】
兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，包括以下步骤：A、人工杂交授粉：以长瓣兜兰为母本， 小叶兜兰为父本，选取生长健壮的长瓣兜兰母本及父本在开花时开展人工辅助授粉，授粉后370到390天，将发育至基本成熟而未开裂的果实作为外植体；B、 无菌播种及原球茎萌发阶段：选用饱满的果实用酒精浸泡 ，置于的升汞溶液中消毒，无菌水冲洗，用解剖刀切开果实，用接种针将褐色粉末种子接种到培养基上，培养80‑100天，形成原球茎及芽混合体；C、增殖分化培养阶段：为获得更多的种苗，将芽和原球茎混合组织接种在1/2MS添加6‑苄基氨基嘌呤(6‑BA)、α‑萘乙酸（NAA）培养基上，经140‑160天培养，长成丛生带短根的小苗；D、壮苗生根阶段：将长成的丛生植株分开，接种到1/4MS添加α‑萘乙酸（NAA）的培养基上，直到长成具2‑3条根、3‑4片叶的完整植株；E、 炼苗及移栽：当试管苗长至3‑4厘米时出瓶，出瓶前在温室中的自然光照下炼苗，然后将其从玻璃瓶中取出，移入碎树皮和腐殖土的混合基质中；加强温度、温度、遮阴及通风管理，“优优兜兰”即可正常生长，成苗的移栽成活率可达90％以上；定期浇一次含氮、磷、钾的复合肥，薄肥勤施，栽培中加强病虫害管护措施即可建立兜兰新品种“优优兜兰”种苗的产业化培育方法体系。...

【技术特征摘要】
1.兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，包括以下步骤：A、人工杂交授粉：以长瓣兜兰为母本，小叶兜兰为父本，选取生长健壮的长瓣兜兰母本及父本在开花时开展人工辅助授粉，授粉后370到390天，将发育至基本成熟而未开裂的果实作为外植体；B、无菌播种及原球茎萌发阶段：选用饱满的果实用酒精浸泡，置于的升汞溶液中消毒，无菌水冲洗，用解剖刀切开果实，用接种针将褐色粉末种子接种到培养基上，培养80-100天，形成原球茎及芽混合体；C、增殖分化培养阶段：为获得更多的种苗，将芽和原球茎混合组织接种在1/2MS添加6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、α-萘乙酸（NAA）培养基上，经140-160天培养，长成丛生带短根的小苗；D、壮苗生根阶段：将长成的丛生植株分开，接种到1/4MS添加α-萘乙酸（NAA）的培养基上，直到长成具2-3条根、3-4片叶的完整植株；E、炼苗及移栽：当试管苗长至3-4厘米时出瓶，出瓶前在温室中的自然光照下炼苗，然后将其从玻璃瓶中取出，移入碎树皮和腐殖土的混合基质中；加强温度、温度、遮阴及通风管理，“优优兜兰”即可正常生长，成苗的移栽成活率可达90％以上；定期浇一次含氮、磷、钾的复合肥，薄肥勤施，栽培中加强病虫害管护措施即可建立兜兰新品种“优优兜兰”种苗的产业化培育方法体系。2.根据权利要求1所述的兜兰新品种“优优兜兰”组培快繁方法，其特征在于：8月初兜兰开花季节，人工控制调节父母本的开花状况，母本长瓣兜兰花苞快张开时，喷洒一次浓度为1000PPM的乙烯利来促进长瓣兜兰开花，一周后再用同样的方法促进小叶兜兰开花，以长瓣兜兰开花开始计算时间两周后再进行人工辅助授粉，这时长瓣兜兰柱头分泌大量粘液，小叶兜兰花粉具活力，杂交亲和力强，效果最佳，果实饱满，种子组培后成活率高。3.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：王莲辉，田凡，颜风霞，杨林，姜运力，侯娜，李从瑞，罗在柒，潘得权，廖小锋，
申请(专利权)人：贵州省林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：贵州,52