用于预防和/或治疗亨廷顿氏病的物质和方法技术

技术编号:16046580 阅读:63 留言:0更新日期:2017-08-20 05:41
公开了用于预防和/或治疗亨廷顿氏病的HTT蛋白的免疫原性肽和HTT特异性抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于预防和/或治疗亨廷顿氏病的物质和方法本专利技术涉及提供用于治疗和预防亨廷顿氏病的物质和方法。亨廷顿氏病是一种具有常染色体显性遗传模式的罕见的单亲疾病(monogeneticdisease)。它是由人染色体4上的亨廷顿蛋白(Huntingtin,HTT)基因的编码区内的CAG三核苷酸重复扩增引起的(Novak&Tabrizi,2011)。成因性CAG重复扩增与复制期间的遗传不稳定性和RNA剪接的变化相关。然而,最重要的是,编码的蛋白质由于在蛋白质的N-末端部分中的扩展的聚谷氨酰胺(polyQ)段而在结构上改变,导致结构改变的且修饰的亨廷顿蛋白和蛋白质片段在脑和其他器官或细胞中随时间而积累。该过程类似于其他神经变性性蛋白病(proteinopathy),诸如例如阿尔茨海默氏病或帕金森氏病或多系统萎缩,其中共同特征是形成与蛋白质降解产物组合的聚集体或蛋白质原纤维。在亨廷顿氏病中,病理学标志是主要地纹状体和皮层的进行性神经变性,伴有聚集且降解的亨廷顿蛋白的积累。亨廷顿氏病的临床症状以可预测的方式进展,微妙地开始于情绪变化或认知问题,随后是不稳定的步态和运动问题。随着时间的推移,身体能力恶化,伴有明显的运动协调问题,加上精神能力的下降,以及精神和行为问题。平均预期寿命是第一次临床表现后约二十年。症状可以显著变化,并且已经充分证明,发病年龄与突变亨廷顿蛋白基因中CAG重复的数量反相关,这证实突变亨廷顿蛋白的成因作用。没有对亨廷顿氏病的治愈或预防。为了控制症状,在疾病的后期需要全时患者护理,并且患者和他的社会环境的负担是相当大的。症状性治疗如药物和非药物治疗可以缓解一些症状。根据目前对亨廷顿氏病病因和遗传原因的理解,突变体亨廷顿蛋白被认为是疾病缓解靶向策略的主要靶标,尽管不是以常规方式(Yu等人,2014)。基于临床遗传学和来自动物模型的功能证据(Bard等人,2014),亨廷顿蛋白降低策略被认为是最重要意义的方法,尽管存在与这样的构思相关的分子挑战(Zheng&Diamond,2012)。目前的策略通常受到治疗剂缺乏递送到脑中受影响的神经元内的靶向位点的阻碍。这使目前正在开发的DNA或mRNA靶向方法变得有价值(Davidson,2012),所述DNA或mRNA靶向方法包括反义寡核苷酸、siRNA、和使用miRNA、shRNA或ZFP的病毒递送(在基因水平靶向)的基因疗法、或间接的基于小分子的方法如SirT1或mTOR抑制。一种替代方法由使用由靶向脑内细胞内亨廷顿蛋白的病毒载体提供的胞内抗体(intrabody)组成(Butler等,2012)。尽管在临床前模型中已证明其功能性,这些方法中的大部分面临针对靶位点的主要递送挑战。此外,“外来”大分子结构例如诸如基于scFv的胞内抗体(Messer&Joshi,2013)带有潜在地构成针对宿主的新表位的风险,从而诱导针对治疗剂的不期望的体液免疫应答或针对表达和呈递“外源”蛋白质的细胞的不期望的自体反应的T细胞应答。WO2012/140376A1公开了治疗性肽pep4和pep42,两种肽都不延伸到HTT的c6切割位点。提示了这些肽用作HTT聚集抑制剂,并且与任何疫苗接种或免疫应用无关。WO2010/015592A2公开了用于诊断定量目的的单克隆抗体的产生。产生这些单克隆抗体之一(4C9)是为了用于突变的polyQ蛋白的检测/定量测定,但不用于任何治疗应用。使用具有源自HTT蛋白序列的氨基酸65至84的肽产生抗体。Ko等人(BrainRes.Bull.56(2001):319-329)公开了抗HTT单克隆抗体,大多数结合HTT的polyQ结构域。Persichetti等人,(Mol.Med.1(1995):374-383)公开了抗体引发性肽HP1和HP12。Miller等人,(Mol.Ther.7(2003),572-579)公开了用编码与GFP蛋白融合的前17个AA加103个谷氨酰胺残基的DNA进行DNA疫苗接种。US2007/0026029A1公开了用于治疗和预防阿尔茨海默氏病的成分输血装置。Weiss等人(Anal.Biochem.395(2009):8-15)公开了用于动物和人组织中突变体的HTT的检测方法。Butler等人(Prog.Neurobiol.97(2011):190-204)公开了用于动物模型中的HD的基于scFv的胞内抗体治疗。US2010/0233180A1公开了结合HTT的polyP区的抗体。Chen等人(Chem.Biol.18(2011):1113-1125)提示了用于通过直接结合polyQ治疗HD,而不是用于疫苗接种的扩增的polyQ类肽。为了提供用于亨廷顿氏病的替代治疗方法,本专利技术提供能够通过更简单的方式靶向亨廷顿蛋白的主动疫苗和被动疫苗(例如抗原和抗体)。在亨廷顿氏病中,越来越意识到,该病症伴随着全身化的变化,包括免疫系统、外周组织、外周血淋巴细胞(PBL)和代谢,强调这种疾病的系统性质。作为实例,病理性亨廷顿蛋白积聚不仅仅限于CNS,而且也可以在外周血细胞中检测到(Weiss等人,2012)。通过降低原代人巨噬细胞/单核细胞中的亨廷顿蛋白表达,先天免疫系统的干扰可以通过亨廷顿蛋白靶向性RNA干扰部分逆转(等人2014)。除了检测血细胞内的亨廷顿蛋白外,可溶性亨廷顿蛋白或亨廷顿蛋白片段在健康供体的人血浆蛋白质组中偶然检测到(Liu等人2007)或通过ELISA在迄今为止与亨廷顿氏病无关的青光眼患者的血浆中检测到(Tezel等人2012)。尽管免疫系统在亨廷顿氏病中的重要作用已被公认(Ellrichmann等人,2013),但是胞外亨廷顿蛋白的可能的成因作用已经在很大程度上被忽略。新近,血浆和CSF亨廷顿蛋白仅被建议作为监测疾病进展的潜在生物标志物(Weiss等人,2014)。靶向可能致病的,促进疾病的细胞外亨廷顿蛋白先前不被认为是治疗靶标,也未显示是否主动诱导或被动施用的抗体是否可提供治疗益处。本专利技术的一个目的是提供用于亨廷顿氏病的新的治疗策略,特别是超出仅仅控制症状的策略。另一个目的是提供用于预防或延迟与亨廷顿氏病相关症状的发作的方法(means)。因此,本专利技术提供了用于治疗亨廷顿氏病或延迟其临床症状发作的基于肽的疫苗和抗体。因此,本专利技术提供了基于作为治疗靶物的HTT蛋白的全新的治疗概念。本专利技术给“基于抗体的HTT降低策略”提供了可以单独应用或组合的两种策略性变体:基于HTT肽的主动免疫和/或基于抗体的被动免疫。可以认为两种策略就治疗靶标HTT蛋白而言是等效的。两种策略也应用相同(即没有基本差异)的治疗原理和作用模式,因为抗击病原性HTT的活性成分最终总是抗体(无论是主动产生的抗HTT抗体或被动施用的抗体)。这在根据本专利技术以下的实施例部分中已经通过主动免疫实验和用单克隆和多克隆抗体进行的吞噬实验显示,清楚证明了相同最终作用模式。在现有技术中没有公开根据本专利技术的这两种治疗策略。HTT抗体目前仅用于科学目的和检测样品中的HTT。根据本专利技术的疫苗接种和被动免疫是治疗亨廷顿氏病的全新方法,并且通过本专利技术显示是高度有效的。本专利技术提供的免疫细胞和单克隆抗体特异性识别先前已显示在蛋白质的功能和病理学中具有不本文档来自技高网...
用于预防和/或治疗亨廷顿氏病的物质和方法

【技术保护点】
基于HTT肽的疫苗中的HTT蛋白的免疫原性肽和/或抗HTT蛋白抗体,其用于治疗亨廷顿氏病或延迟其临床症状的发作。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.10 EP 14176531.31.基于HTT肽的疫苗中的HTT蛋白的免疫原性肽和/或抗HTT蛋白抗体,其用于治疗亨廷顿氏病或延迟其临床症状的发作。2.HTT蛋白的免疫原性肽,其优选地选自:p6773(LPQPPPQAQPLLPQPQPC,SEQIDNo.1)、p7564(CPSDSSEIVLD,SEQIDNo.2)、p7543(GTDNQYLGLQIGC,SEQIDNo.3)、p7543a(DNQYLGLQIC;SEQIDNo.88)、尤其是衍生物p9394(KTDNQYLGLQIGKC;SEQIDNo.91)、p9395(GTDNQYLGLQIGKKC;SEQIDNo.92)、p9396(KTDNQYLGLQIKKGC;SEQIDNo.93)、p9397(KDNQYLGLQIKKGC;SEQIDNo.94);p7543b(TDNQYLGLQIC;SEQIDNo.89)、p7543c(TDNQYLGLQIGC;SEQIDNo.90)、p6771(LPQPPPQAQPLLPC,SEQIDNo.4)、p8346(CGPAVAEEPLHRP,SEQIDNo.5)、p8855(SDSSEIVLDGTDC,SEQIDNo.6)、p8858(EIVLDGTDNQYLC,SEQIDNo.7)、p8859(IVLDGTDNQYLGC,SEQIDNo.8)、p8860(VLDGTDNQYLGLC,SEQIDNo.9)、p8861(LDGTDNQYLGLQC,SEQIDNo.10)、p8862(DGTDNQYLGLQIGC,SEQIDNo.11)、p8869(CTDNQYLGLQIGQ,SEQIDNo.12)、p8868(CGTDNQYLGLQIG,SEQIDNo.13)、p8870(CDNQYLGLQIGQP,SEQIDNo.14)、p8871(CNQYLGLQIGQPQ,SEQIDNo.15)、p6772(CPQLPQPPPQAQPLLP,SEQIDNo.16)、p8864(TDNQYLGLQIGQC,SEQIDNo.17)、p8865(DNQYLGLQIGQPC,SEQIDNo.18)、p6775(PPPQLPQPPPQAQPLLPQPQPaC,SEQIDNo.19)、p8854(PSDSSEIVLDGTC,SEQIDNo.20)、p8856(DSSEIVLDGTDNC,SEQIDNo.21)、p8857(SEIVLDGTDNQYC,SEQIDNo.22)、p8866(NQYLGLQIGQPQC,SEQIDNo.23)、p8867(QYLGLQIGQPQDC,SEQIDNo.24)、p6763(CaMATLEKLMKAFESLKSFQ,SEQIDNo.25)、p6764(CaKLMKAFESLKSFQ,SEQIDNo.26)、p6765(CEEQQRQQQQQQQ,SEQIDNo.27)、p6768(QQQQQQPPPPPPPPaKKKC,SEQIDNo.28)、p7541(CSEIVLD,SEQIDNo.29)、p7552(CSSEIVLD,SEQIDNo.30)、p7562(CDSSEIVLD,SEQIDNo.31)、p7563(CSDSSEIVLD,SEQIDNo.32)、p7567(CEIVLD,SEQIDNo.33)、p7568(CIVLD,SEQIDNo.34)、p7605(CSEIVL,SEQIDNo.35)、p6776(CSEIVLDGTDNQYL,SEQIDNo.36)、p6777(CSDSSEIVLDGTDN,SEQIDNo.37)、p6776b(SEIVLDGTDNQYLC,SEQIDNo.38)、p7752(CAEIVLDGTDNQYL,SEQIDNo.39)、p7753(CSAIVLDGTDNQYL,SEQIDNo.40)、p7754(CSEAVLDGTDNQYL,SEQIDNo.41)、p7755(CSEIALDGTDNQYL,SEQIDNo.42)、p7756(CSEIVADGTDNQYL,SEQIDNo.43)、p7757(CSEIVLAGTDNQYL,SEQIDNo.44)、p7758(CSEIVLDATDNQYL,SEQIDNo.45)、p7745(CSEIVLDGADNQYL,SEQIDNo.46)、p7746(CSEIVLDGTANQYL,SEQIDNo.47)、p7747(CSEIVLDGTDAQYL,SEQIDNo.48)、p7748(CSEIVLDGTDNAYL,SEQIDNo.49)、p7749(CSEIVLDGTDNQAL,SEQIDNo.50)、和p7750(CSEIVLDGTDNQYA,SEQIDNo.51),更优选地p6773(LPQPPPQAQPLLPQPQPC,SEQIDNo.1)、p7564(CPSDSSEIVLD,SEQIDNo.2)、p7543(GTDNQYLGLQIGC,SEQIDNo.3)、p6771(LPQPPPQAQPLLPC,SEQIDNo.4)、p8346(CGPAVAEEPLHRP,SEQIDNo.5)、p8855(SDSSEIVLDGTDC,SEQIDNo.6)、p8858(EIVLDGTDNQYLC,SEQIDNo.7)、p8859(IVLDGTDNQYLGC,SEQIDNo.8)、p8860(VLDGTDNQYLGLC,SEQIDNo.9)、p8861(LDGTDNQYLGLQC,SEQIDNo.10)、p8862(DGTDNQYLGLQIGC,SEQIDNo.11)、p8869(CTDNQYLGLQIGQ,SEQIDNo.12)、p8868(CGTDNQYLGLQIG,SEQIDNo.13)、p8870(CDNQYLGLQIGQP,SEQIDNo.14)、p8871(CNQYLGLQIGQPQ,SEQIDNo.15)、p6772(CPQLPQPPPQAQPLLP,SEQIDNo.16)、p8864(TDNQYLGLQIGQC,SEQIDNo.17)、p8865(DNQYLGLQIGQPC,SEQIDNo.18)、p6775(PPPQLPQPPPQAQPLLPQPQPaC,SEQIDNo.19)、p6776(CSEIVLDGTDNQYL,SEQIDNo.36)、p6777(CSDSSEIVLDGTDN,SEQIDNo.37)、p8854(PSDSSEIVLDGTC,SEQIDNo.20)、p8856(DSSEIVLDGTDNC,SEQIDNo.21)、p8857(SEIVLDGTDNQYC,SEQIDNo.22)、p8866(NQYLGLQIGQPQC,SEQIDNo.23)、和p8867(QYLGLQIGQPQDC,SEQIDNo.24)、尤其p6773(LPQPPPQAQPLLPQPQPC,SEQIDNo.1)、p7564(CPSDSSEIVLD,SEQIDNo.2)、p7543(GTDNQYLGLQIGC,SEQIDNo.3)、p6771(LPQPPPQAQPLLPC,SEQIDNo.4)、p6776(CSEIVLDGTDNQYL,SEQIDNo.36)、p6777(CSDSSEIVLDGTDN,SEQIDNo.37)、和p8346(CGPAVAEEPLHRP,SEQIDNo.5);其中N-或C-末端半胱氨酸残基(C)可以存在或不存在或备选地提供在C-或N-末端;或包含具有SEQIDNO:1至51的这些肽中的至少一种的肽,优选总长度最多50个氨基酸残基,更优选最多30个氨基酸残基,进一步优选最多20个氨基酸残基,尤其最多16个氨基酸残基,优选地用于基于HTT肽的疫苗,所述疫苗用于治疗亨廷顿氏病或延迟其临床症状的发作。3.用于治疗和/或预防亨廷顿氏病的基于肽的疫苗,其包含亨廷顿蛋白(HTT)蛋白的至少一种免疫原性肽,优选选自权利要求2的肽的至少一种肽,和任选地还有一种或多种佐剂。4.根据权利要求3中使用的基于肽的疫苗,其特征在于所述至少一种免疫原性肽偶联至药学上可接受的载体,优选KLH。5.根据权利要求3...

【专利技术属性】
技术研发人员:O斯姆兹卡S巴特尔
申请(专利权)人:阿费里斯股份公司
类型:发明
国别省市:奥地利,AT

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