卤虫卵孵化液提取物的制备方法技术

技术编号:15945000 阅读:49 留言:0更新日期:2017-08-08 06:37
本发明专利技术公开了一种卤虫卵孵化液提取物的制备方法。卤虫卵孵化后用超声波对整个孵化体系进行处理,促进相关产物的释放,离心收集孵化液并用硫酸铵进行沉淀,然后凝胶层析脱盐后冷冻干燥。提取时间短,活性损失小,减少了外部杂质的引入,为进一步研究开发其功能和用途提供了现实基础。

Preparation method of brine egg hatching liquid extract

The invention discloses a preparation method of a brine egg hatching liquid extract. After hatching of Artemia eggs, the whole incubation system was treated with ultrasound to promote the release of related products, centrifugal collection of incubation fluid and precipitation with ammonium sulfate, and then freeze-dried by gel chromatography. The extraction time is short, the activity loss is small, and the introduction of external impurities is reduced, which provides a realistic basis for further research and development of its function and use.

【技术实现步骤摘要】
卤虫卵孵化液提取物的制备方法
本专利技术涉及一种天然产物的提取方法,具体涉及卤虫卵孵化液提取物的制备方法。
技术介绍
卤虫也称丰年虾,是一种生活在高盐水域中的甲壳类生物。卤虫含有丰富的蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸和无机元素,被广泛用作饵料生物和实验动物材料。卤虫卵一般指卤虫休眠卵,主要用来孵化卤虫无节幼体,用作水产饵料。由于卤虫卵营养丰富且易于保存,可以随用随取,其用途也逐渐扩大,卤虫卵、卵壳已开始用于化妆品、食品等传统用途以外的领域,尤其是孵化过程中卵壳、孵化膜以及孵化液中包含的活性成分也在日益受到关注。这些成分在孵化后期卵壳及孵化膜破裂后,部分释放至孵化液中,含量极低,包含一系列和孵化有关的酶,直接影响卵的激活和孵化特性。对其进行分离和提取,对于进一步研究和开发其功能具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种卤虫卵孵化液提取物的制备方法,简单高效的分离孵化液中的活性成分。为实现上述目的,本专利技术采取的技术措施如下:1.将卤虫卵充分清洗、水合后,按每克干卵50-100毫升人工海水的比例将卵分散于三角瓶中,摇床100rpm/min振荡,温度25℃;2.孵化24-30小时后,孵化液中加入0.5%-1%聚乙二醇,超声波处理20秒,功率密度0.1w-4w/cm2,离心分离,收集孵化液。将沉淀重新溶于100毫升人工海水,搅拌5分钟,离心分离,将两次离心上清液合并;3.将孵化液离心,转速500g,5分钟,上清液加入硫酸铵,将沉淀用磷酸盐缓冲液重新溶解,凝胶层析脱盐,冷冻干燥。本专利技术有以下优点:超声波在孵化液中的的高频振荡有效提高了孵化膜内含物的释放,缩短了提取时间,保护了提取物活性。同时聚乙二醇有效保护了无节幼体免于破碎,减少了杂质的引入。用人工海水所有成分已知,减少了天然海水中杂质对提取物的影响。具体实施方式下面结合具体的实施例对本专利技术方法做进一步的详细说明。实施例11.将卤虫卵充分清洗、水合后,按每克干卵80毫升人工海水的比例将卵分散于三角瓶中,摇床100rpm/min振荡,温度25℃;2.孵化24小时后,孵化液中加入0.5%聚乙二醇,超声波处理20秒,功率密度0.5w/cm2,离心分离,收集孵化液。将沉淀重新溶于100毫升人工海水,搅拌5分钟,离心分离,将两次离心上清液合并;3.将孵化液离心,转速500g,5分钟,上清液加入硫酸铵至饱和度为50%,将沉淀用磷酸盐缓冲液重新溶解,葡聚糖凝胶sephadexG-25层析脱盐,冻干。经Bradford法测定,提取物中蛋白含量53%,以干卤虫卵计得率为0.87%。实施例21.将卤虫卵充分清洗,按每克干卵100毫升人工海水的比例将卵分散于三角瓶中,摇床100rpm/min振荡,温度25℃;2.孵化28小时后,孵化液中加入0.8%聚乙二醇,超声波处理20秒,功率密度0.5w/cm2,离心分离,收集孵化液。将沉淀重新溶于100毫升人工海水,搅拌5分钟,离心分离,将两次离心上清液合并;3.将孵化液离心,转速500g,5分钟,上清液加入硫酸铵至饱和度为55%,将沉淀用磷酸盐缓冲液重新溶解,葡聚糖凝胶sephadexG-25层析脱盐,冻干。经Bradford法测定,提取物中蛋白含量55%,以干卤虫卵计得率为0.94%。本文档来自技高网...

【技术保护点】
卤虫卵孵化液提取物的制备方法,其特征是步骤如下:(1)将卤虫卵充分清洗、水合后,按每克干卵50‑100毫升人工海水的比例将卵分散于三角瓶中,摇床100rpm/min振荡,温度25℃;(2)孵化24‑30小时后,孵化液中加入0.5%‑1%聚乙二醇,超声波处理20秒,功率密度0.1w‑4w/cm

【技术特征摘要】
1.卤虫卵孵化液提取物的制备方法,其特征是步骤如下:(1)将卤虫卵充分清洗、水合后,按每克干卵50-100毫升人工海水的比例将卵分散于三角瓶中,摇床100rpm/min振荡,温度25℃;(2)孵化24-30小时后,孵化液中加入0.5%-1%聚乙二醇,超声波...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴闯张诗嘉佟洪波柳青
申请(专利权)人:辽宁石油化工大学
类型:发明
国别省市:辽宁,21

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