尿液有机酸滤纸片质控品及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种尿液有机酸滤纸片质控品及其制备方法，制备方法包括如下步骤：(1)配制有机酸标准溶液：分别配制甲基丙二酸、戊二酸、异戊酰甘氨酸、苯丙酮酸、乳清酸以及4‑羟基苯乳酸的标准溶液；(2)配制工作液：以尿液为溶剂，加入所述有机酸标准溶液，得所述工作液；(3)将所述工作液滴加于滤纸片，晾干，即得所述尿液有机酸滤纸片质控品。采用本发明专利技术提供的制备方法制得的尿液有机酸滤纸片质控品在‑20℃的条件下可保存至少2个月，从‑20℃条件取出恢复常温后的均一性、稳定性都能符合质控品要求。

Urine organic acid filter paper quality control product and preparation method thereof

The invention relates to a urine organic acid filter paper quality control and a preparation method thereof. The preparation method comprises the following steps: (1) preparation of organic acid standard solution were prepared: methylmalonic acid, glutaric acid, isoamyl acyl glycine, phenylpyruvic acid, whey acid and 4 hydroxy benzene lactic acid standard solution; (2) preparation of liquid in urine as solvent, adding the organic acid standard solution, the working solution; (3) the work of liquid droplet on filter paper, drying, and obtaining the urine organic acid filter paper quality control. The preparation method of urine organic acid filter paper quality product can be stored for at least 2 months in 20 DEG condition by using the invention, remove the homogeneity and stability in normal temperature from 20 DEG C can accord with qualitative quality control requirements.

【技术实现步骤摘要】
尿液有机酸滤纸片质控品及其制备方法
本专利技术涉及分析检测领域，特别是涉及一种尿液有机酸滤纸片质控品的制备方法。
技术介绍
遗传代谢病是指一类有生理代谢缺陷的遗传病，包括代谢大分子类疾病：包括溶酶体贮积症(三十几种病)、线粒体病等等，代谢小分子类疾病：氨基酸、有机酸、脂肪酸等。患儿临床表现个体差异很大，临床诊断困难，容易被漏诊或误诊。如不能及时诊断和治疗，死亡率很高。因此，早期诊断、合理治疗是挽救患者生命的关键。尿液作为人体重要的代谢物质之一，由于无创性、丰富、易于收集、可以提供诊断代谢紊乱的信息等优势，是遗传代谢病检测诊断中非常重要而关键的生物样品。自1966年，Tanaka应用气相色谱-质谱联用技术诊断的检测出尿液中的异戊酰甘氨酸，诊断了异戊酸血症后，这一技术开始应用于有机酸血症的筛查。目前尿液有机酸检测已经成为新生儿筛查中的常规手段了。有机酸项目共检测132个指标(例如：乳酸、甲基丙二酸、3－羟基丙酸、丙二酸、戊二酸、异戊酰甘氨酸、苯丙酮酸、乳清酸、4－羟基苯乳酸等有机酸)，可诊断多种有机酸血症，辅助诊断氨基酸代谢病和脂肪酸代谢病。但尿液中的化学成分非常复杂且不稳定。根据文献调研，尿液的储存条件十分苛刻，需添加防腐剂以及-70℃冷冻保存，虽然在冷冻条件下可抑制细菌活动，但仍不可避免化合物分解、细菌繁殖而引起基质改变等问题。且由于质控配制数量较大，储存空间也是一个需要重点考虑的问题。另外，目前市面上还未有商品化的尿有机酸滤纸片质控可用于临床实验室检测，故需要一种既能方便保存，又能稳定作为质量监控的质控品的配制方法。
技术实现思路
基于此，本专利技术提供一种尿液有机酸滤纸片质控品的制备方法。具体的技术方案如下：一种尿液有机酸滤纸片质控品的制备方法，包括如下步骤：(1)配制有机酸标准溶液：分别配制甲基丙二酸、戊二酸、异戊酰甘氨酸、苯丙酮酸、乳清酸以及4-羟基苯乳酸的标准溶液；(2)配制工作液：以尿液为溶剂，加入所述有机酸标准溶液，得所述工作液，所述工作液中有机酸的含量为：100-150mg/L的甲基丙二酸，100-150mg/L的苯丙酮酸，100-150mg/L的戊二酸，100-150mg/L的异戊酰甘氨酸，80-120mg/L的4-羟基苯乳酸以及100-150mg/L的乳清酸；(3)将所述工作液滴加于滤纸片，晾干，即得所述尿液有机酸滤纸片质控品。在其中一个实施例中，所述有机酸标准溶液的浓度为20-30mg/mL。在其中一个实施例中，所述工作液中有机酸的含量为：120-130mg/L的甲基丙二酸，120-130mg/L的苯丙酮酸，120-130mg/L的戊二酸，120-130mg/L的异戊酰甘氨酸，90-110mg/L的4-羟基苯乳酸以及120-130mg/L的乳清酸。在其中一个实施例中，所述工作液中有机酸的含量为：125mg/L的甲基丙二酸，125mg/L的苯丙酮酸，125mg/L的戊二酸，125mg/L的异戊酰甘氨酸，100mg/L的4-羟基苯乳酸以及125mg/L的乳清酸。在其中一个实施例中，所述滤纸片的面积20-30cm2，其中所述工作液的加样量为750-850μL。在其中一个实施例中，所述工作液的加样量为800μL。在其中一个实施例中，甲基丙二酸标准溶液、戊二酸标准溶液以及异戊酰甘氨酸标准溶液的溶剂为水；苯丙酮酸标准溶液和4-羟基苯乳酸标准溶液的溶剂为乙醇；乳清酸标准溶液的溶剂为弱碱性水。在其中一个实施例中，所述尿液为健康人源尿液。在其中一个实施例中，所述尿液有机酸滤纸片质控品储存于-(18-22)℃条件下。本专利技术的另一目的是提供上述制备方法得到的尿液有机酸滤纸片质控品。有机酸项目一共检测132个指标(包括：乳酸-2、2-羟基异丁酸-2、己酸-1、乙醇酸-2、草酸-2、2-羟基丁酸-2、乙醛酸-OX-2、3－羟基丙酸-2、丙酮酸-OX-2、丙戊酸-1、3－羟基丁酸-2、3－羟基异丁酸-2、2－羟基异戊酸-2、2－甲基－3－羟基丁酸-1-2、丙二酸-2、3－羟基-异戊酸-2、2－酮－异戊酸-OX-2、甲基丙二酸-2、乙羟基丙酸-2、尿素-2、4－羟基丁酸-2、2－羟基-异葵酸-2、3－羟基戊酸-2、乙酰乙酸、2－羟基－3甲基戊酸-2、安息香酸、乙酰乙酸－OX-2、辛酸-1、2－酮－3－甲基戊酸-2、2－酮－3－甲基戊酸-2、甘油酸-3、磷酸-3、2－甲基－3－羟基戊酸-2(2)、乙基丙二酸-2、2－酮-异己酸－0X-2、乙酰甘氨酸-1、苯乙酸-1、马来酸-2、琥珀酸-2、甲基琥珀酸-2、甘油酸-3(1)、尿嘧啶-2、福马酸-2、丙酰甘氨酸-1、乙酰甘氨酸-1(1)、甲羟戊酸内酯－2、甲羟戊酸内酯－1、异丁酰甘氨酸-1、2－丙基－3－羟基戊酸-2、甲基福马酸-2、戊二酸-2、3－甲基戊烯二酸-2、3－甲基戊二酸-2、2－丙基3－酮-戊酸-2、丙酰甘氨酸-2、异丁酰甘氨酸、2-脱氧－4羟基-乙酰乙酸、丁酰甘氨酸-1、3－甲基戊烯二酸-2(1)、戊烯二酸-2、琥珀酰丙酮-OX-2(1)、癸酸-1、2－丙基－5－羟基戊酸-2、3－甲基戊烯二酸-2(2)、异戊酰甘氨酸-1、丁酰甘氨酸、苹果酸-3、己二酸-2、异戊酰甘氨酸-2、2－己烯二酸-2、5-氧合脯氨酸-2、3-甲基己二酸、亚硫基二乙酸-2、2-丙基-羟基戊二酸－2、7－羟基-辛酸-2、5-羟基-甲基-2-糠酸-1、甲基巴豆酰甘氨酸-2、3-甲基巴豆酰甘氨酸-1、甲基巴豆酰甘氨酸-1、3-甲基巴豆酰甘氨酸-2、2－羟基戊二酸-3、3－羟基戊二酸-3、苯乳酸-2、庚二酸-2、3－羟基－3－甲基戊二酸-3、3－羟基苯乙酸-2、2－酮戊二酸－OX-2(1)、4－羟基安息香酸-2、4－羟基苯乙酸、2－酮戊二酸－OX－2(1)、己酰甘氨酸-1、苯丙酮酸-OX-2、N-乙酰天冬氨酸-2、2-羟基己二酸-3、辛烯二酸-2、3-羟基己二酸-3、辛二酸-2、3－甲基戊烯二酸-2(3)、2-酮己二酸-OX-3、乌头酸-3、乳清酸-3、香草酸-2、高香草酸-2、壬二酸-2、马尿酸－2、异枸橼酸-4、枸橼酸-4、尿黑酸-3、马尿酸－1、甲基枸橼酸-4(1)、3-(3-羟苯基)-3-羟基丙酸-3、甲基枸橼酸-4(2)、3-羟基辛烯二酸-3、3－羟基辛二酸-3、尿香草扁桃酸-3、癸二酸-2、葵二烯酸-3、4－羟基苯乳酸-2、4－羟基苯丙酮酸-OX-2、2-羟基马尿酸-3、吲哚-3-乙酸-2、辛二酰甘氨酸-2、棕榈酸-1、2-羟基葵二酸-3、3-羟基葵二酸-3、2－羟基马尿酸-2、十二烷二酸、N-乙酰酪氨酸-3、尿酸-4、3，6-环氧-十二烷二酸-2、3-羟基-十二烷二酸、3，6-环氧-十四烷二酸-2，其中化合物后的-2代表参加衍生化基团的个数，-OX代表参加肟化反应，-(1)代表不同的结构式)，本案从中选取了6个具有针对性的目标物作为质控指标(甲基丙二酸、戊二酸、异戊酰甘氨酸、苯丙酮酸、乳清酸以及4-羟基苯乳酸)，该6个作为质控的指标是综合考虑气质联用检测方法的特点和这132个有机酸检测指标对疾病的提示的重要性之后选出的，最具代表性。同时，该6个作为质控的指标的浓度(工作液中有机酸的含量为：100-150mg/L的甲基丙二酸，100-150mg/L的苯丙酮酸，100-150本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种尿液有机酸滤纸片质控品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)配制有机酸标准溶液：分别配制甲基丙二酸、戊二酸、异戊酰甘氨酸、苯丙酮酸、乳清酸以及4‑羟基苯乳酸的标准溶液；(2)配制工作液：以尿液为溶剂，加入所述有机酸标准溶液，得所述工作液，所述工作液中有机酸的含量为：100‑150mg/L的甲基丙二酸，100‑150mg/L的苯丙酮酸，100‑150mg/L的戊二酸，100‑150mg/L的异戊酰甘氨酸，80‑120mg/L的4‑羟基苯乳酸以及100‑150mg/L的乳清酸；(3)将所述工作液滴加于滤纸片，晾干，即得所述尿液有机酸滤纸片质控品。

【技术特征摘要】
1.一种尿液有机酸滤纸片质控品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)配制有机酸标准溶液：分别配制甲基丙二酸、戊二酸、异戊酰甘氨酸、苯丙酮酸、乳清酸以及4-羟基苯乳酸的标准溶液；(2)配制工作液：以尿液为溶剂，加入所述有机酸标准溶液，得所述工作液，所述工作液中有机酸的含量为：100-150mg/L的甲基丙二酸，100-150mg/L的苯丙酮酸，100-150mg/L的戊二酸，100-150mg/L的异戊酰甘氨酸，80-120mg/L的4-羟基苯乳酸以及100-150mg/L的乳清酸；(3)将所述工作液滴加于滤纸片，晾干，即得所述尿液有机酸滤纸片质控品。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述有机酸标准溶液的浓度为20-30mg/mL。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述工作液中有机酸的含量为：120-130mg/L的甲基丙二酸，120-130mg/L的苯丙酮酸，120-130mg/L的戊二酸，120-130mg/L的异戊酰甘氨酸，90-110mg/L的4-羟基苯乳酸以及120-130mg/L的乳...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴婉琼，佘旭辉，李维，李卓阳，倪周，陈秀如，赵蓓蓓，程雅婷，陈静宜，吴华顺，
申请(专利权)人：广州金域医学检验中心有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44