用于增强的免疫应答和癌症治疗的组合物和方法技术

本发明专利技术提供抗体组合物，包括，例如，结合肿瘤坏死因子受体超家族成员(即，18)的抗体、工程化抗体和抗体片段。所提供的组合物可以用于增强CD4+和CD8+T细胞应答，以及用于治疗、改善和预防可以通过增强的免疫应答而对抗的疾病(例如，癌症)。本发明专利技术中还提供，编码所述分子的多核苷酸和载体以及带有所述多核苷酸或载体的宿主细胞；以及包含所述分子的药物组合物及其使用方法。

Compositions and methods for enhanced immune response and cancer therapy

The present invention provides antibody compositions comprising antibodies such as, for example, members of the tumor necrosis factor receptor superfamily (i.e., 18), engineered antibodies, and antibody fragments. The compositions provided may be used to enhance CD4+ and CD8+T cell responses and to treat, improve, and prevent diseases that can be overcome by an enhanced immune response (e.g., cancer). The present invention also provides polynucleotides and vectors encoding the molecules, and host cells having the polynucleotides or vectors, and pharmaceutical compositions containing the molecules and methods of use thereof.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于增强的免疫应答和癌症治疗的组合物和方法相关申请本申请要求2014年10月8日提交的美国临时申请No.62/061,644、2015年7月29日提交的美国临时申请No.62/198,673和2015年9月18日提交的美国临时申请No.62/220,764的优先权和权益，在此将每篇的全部内容按引用并入。专利
本专利技术涉及结合肿瘤坏死因子受体超家族成员18/糖皮质激素诱导的TNFR-相关蛋白(“GITR”)的抗体、抗体片段和抗原结合分子，并且更特别地，刺激通过该受体的信号传输和/或调节免疫应答的激动剂。专利技术背景糖皮质激素诱导的TNFR-相关蛋白(“GITR”)是肿瘤坏死因子超家族(TNFRSF)的成员，其包括超过20种的I型跨膜蛋白、几个剪接变体和几个病毒蛋白，所有都具有富含半胱氨酸的结构域作为共同的结构特征。GITR的胞外结构域(ECD)由3个富含半胱氨酸的结构域(CRD)组成，接着是跨膜结构域(TM)和胞内结构域(ICD)。在小鼠和人CD4+CD25+调节性T细胞上组成型地检测到GITR表达，其在激活时被进一步提高。相反，效应CD4+CD25-T细胞和CD8+CD25-T细胞表达低至不可检测水平的GITR，在T细胞受体激活后快速上调。在激活的NK细胞、树突细胞和巨噬细胞上也已经检测到GITR的表达。已经表明GITR下游的信号传导通路涉及MAPK和标准NFκB通路。多种TRAF家族成员已经被提示是GITR下游的信号传导中间分子(Nocentini等(2005)Eur.J.Immunol.，35:1016-1022)。据认为，取决于细胞类型和微环境，通过GITR的细胞激活可以起到几个作用，包括，但不限于，共同刺激以提高增殖和效应子功能、抑制调节性T细胞的遏制作用、和提供保护作用以对抗激活诱导的细胞死亡(Shevach和Stephens(2006)Nat.Rev.Immunol.,6:613-618)。Ko等((2005)J.Exp.Med.，202:885-891)首次证明了抗小鼠GITR的激动剂单克隆抗体在小鼠同基因肿瘤模型中有效地诱导了肿瘤特异性免疫并根除了已建立的肿瘤。另外地和/或备选地，在一些临床前模型中已经证实，具有功能性Fc效应子活性的抗-mGITR可以在选择的肿瘤环境中耗竭调节T细胞，以及增强T效应细胞增殖和细胞因子分泌。这些专利技术表明，mGITR的激动剂抗体可以破坏免疫耐受平衡，其转而允许T细胞对抗肿瘤和持续的病毒感染。然而，迄今为止的研究很大程度上聚焦于在啮齿动物系统中使用替代物抗体。由于小鼠和人GITR在结构上的差异，小鼠中使用替代物研究获得的发现是否可以翻译成人GITR功能的改变是未知的。专利技术概述我们已经鉴定特异性结合人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体超家族成员18(“GITR”)的抗体，其中所述抗体在体外交联时具有体外hGITR激动剂活性，并且其中所述抗体赋予体内hGITR活性并在肿瘤部位诱导升高的Teff:Treg比例，导致肿瘤进展的抑制。因此，本专利技术提供了特异性结合人GITR并通过靶向表达人GITR的细胞促进胞内信号传输和/或调节免疫应答的激动剂抗体、抗体片段和抗原结合分子。在一个方面中，本专利技术提供了特异性结合人GITR的分离抗体、抗体片段和抗原结合分子，其中所述抗体、抗体片段或抗原结合分子结合表位，所述表位包含富含半胱氨酸的结构域1(“CRD1”，SEQIDNO:4：CGPGRLLLGTGTDARCCRVHTTRCCRDYPGEECCSEWDC)和富含半胱氨酸的结构域2(“CRD2”，SEQIDNO:5：MCVQPEFHCGDPCCTTCRHHPCPPGQGVQSQGKFSFGFQC)，并且其中所述抗体、抗体片段或抗原结合分子是GITR的激动剂，并且其中所述抗体、抗体片段或抗原结合分子任选具有完整或提高的FcR效应子功能。在一些实施方案中，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子与人GITR的SEQIDNO:88中包含的表位结合。在一些实施方案中，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子与结合人GITR的SEQIDNO:88中的表位的抗体或抗体片段竞争。在一些实施方案中，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子结合人GITR的SEQIDNO:88中的至少一个氨基酸残基，例如，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子结合与人GITR的SEQIDNO:88重叠的表位。在一些实施方案中，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子结合人GITR的CRD1(残基34-72，SEQIDNO:4)和残基78中包含的表位。在一些实施方案中，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子与结合人GITR的CRD1(残基34-72，SEQIDNO:4)和残基78中的表位的抗体或抗体片段竞争。在一些实施方案中，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子结合人GITR的CRD1(残基34-72，SEQIDNO:4)和残基78内的至少一个氨基酸残基，例如，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子结合与人GITR的CRD1(残基34-72，SEQIDNO:4)和残基78重叠的表位。在一些实施方案中，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子结合SEQIDNO:1并包含：(a)包含重链可变区的人重链，其中：i)重链CDR1包含SEQIDNO:22，和ii)重链CDR2包含选自SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26和SEQIDNO:27任一个的序列，和iii)重链CDR3包含SEQIDNO:29或SEQIDNO:109；和(b)轻链可变区，其中i)轻链CDR1包含SEQIDNO:30或SEQIDNO:31，和ii)轻链CDR2包含SEQIDNO:33，和iii)轻链CDR3包含SEQIDNO:34。在一些实施方案中，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子结合SEQIDNO:88并包含：(a)包含重链可变区的人重链，其中：i)重链CDR1包含SEQIDNO:22，和ii)重链CDR2包含选自SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26和SEQIDNO:27任一个的序列，和iii)重链CDR3包含SEQIDNO:29或SEQIDNO:109；和(b)轻链可变区，其中i)轻链CDR1包含SEQIDNO:30或SEQIDNO:31，和ii)轻链CDR2包含SEQIDNO:33，和iii)轻链CDR3包含SEQIDNO:34。关于所述抗体、抗体片段或抗原结合分子的进一步实施方案，在一些实施方案中，所述重链可变区与SEQIDNO:16的可变区具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％氨基酸序列同一性，而轻链可变区与SEQIDNO:17具有至少95％、96％、97％、98％、99％或100％氨基酸序列同一性。在特定实施方案中，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子包括包含SEQIDNO:16的重链和包含SEQIDNO:17的轻链。在一些实施方案中，所述抗体、抗体片段或抗原结合分子与包括包含SEQIDNO:16的重链和包含SEQIDNO:17的轻链的抗体竞争。在一些实施方案中，重链FR4是人种系FR4。在特定实施方案中，重链FR4是SEQIDNO:42。在一些实施方案中，轻链FR4是人种系FR4。在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种结合SEQ ID NO:1的分离抗体或抗体片段、或其抗原结合分子，其中所述抗体、抗体片段或抗原结合分子包含(a)重链可变区，其中：i)重链CDR1包含SEQ ID NO:22，和ii)重链CDR2包含选自SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:26和SEQ ID NO:27任一个的序列，和iii)重链CDR3包含SEQ ID NO:29或SEQ ID NO:109；(b)轻链可变区，其中i)轻链CDR1包含SEQ ID NO:30或SEQ ID NO:31，和ii)轻链CDR2包含SEQ ID NO:33，和iii)轻链CDR3包含SEQ ID NO:34。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.10.08 US 62/061,644;2015.07.29 US 62/198,673;1.一种结合SEQIDNO:1的分离抗体或抗体片段、或其抗原结合分子，其中所述抗体、抗体片段或抗原结合分子包含(a)重链可变区，其中：i)重链CDR1包含SEQIDNO:22，和ii)重链CDR2包含选自SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26和SEQIDNO:27任一个的序列，和iii)重链CDR3包含SEQIDNO:29或SEQIDNO:109；(b)轻链可变区，其中i)轻链CDR1包含SEQIDNO:30或SEQIDNO:31，和ii)轻链CDR2包含SEQIDNO:33，和iii)轻链CDR3包含SEQIDNO:34。2.权利要求1的抗体、其抗体片段或抗原结合分子，其中重链可变区与SEQIDNO:16具有至少95％序列同一性，其中轻链可变区与SEQIDNO:17具有至少95％序列同一性。3.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中重链FR4是人种系FR4。4.权利要求3的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中重链FR4是SEQIDNO:42。5.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中轻链FR4是人种系FR4。6.权利要求5的抗体或抗体片段，其中轻链FR4是SEQIDNO:50。7.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中：i)重链CDR1包含SEQIDNO:22；ii)重链CDR2包含SEQIDNO:23；iii)重链CDR3包含SEQIDNO:29；iv)轻链CDR1包含SEQIDNO:30；v)轻链CDR2包含SEQIDNO:33，和vi)轻链CDR3包含SEQIDNO:34。8.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中：i)重链CDR1包含SEQIDNO:22；ii)重链CDR2包含SEQIDNO:24；iii)重链CDR3包含SEQIDNO:29；iv)轻链CDR1包含SEQIDNO:31；v)轻链CDR2包含SEQIDNO:33，和vi)轻链CDR3包含SEQIDNO:34。9.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中：i)重链CDR1包含SEQIDNO:22；ii)重链CDR2包含SEQIDNO:25；iii)重链CDR3包含SEQIDNO:29；iv)轻链CDR1包含SEQIDNO:30；v)轻链CDR2包含SEQIDNO:33，和vi)轻链CDR3包含SEQIDNO:34。10.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中：i)重链CDR1包含SEQIDNO:22；ii)重链CDR2包含SEQIDNO:26；iii)重链CDR3包含SEQIDNO:29；iv)轻链CDR1包含SEQIDNO:30；v)轻链CDR2包含SEQIDNO:33，和vi)轻链CDR3包含SEQIDNO:34。11.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中：i)重链CDR1包含SEQIDNO:22；ii)重链CDR2包含SEQIDNO:27；iii)重链CDR3包含SEQIDNO:29；iv)轻链CDR1包含SEQIDNO:30；v)轻链CDR2包含SEQIDNO:33，和vi)轻链CDR3包含SEQIDNO:34。12.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中：i)重链CDR1包含SEQIDNO:22；ii)重链CDR2包含SEQIDNO:25；iii)重链CDR3包含SEQIDNO:109；iv)轻链CDR1包含SEQIDNO:30；v)轻链CDR2包含SEQIDNO:33，和vi)轻链CDR3包含SEQIDNO:34。13.权利要求2的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中抗体或抗体片段包含重链和轻链，重链包含SEQIDNO:16，轻链包含SEQIDNO:17。14.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中抗体或抗体片段与包含重链和轻链的分离抗体或其抗原结合片段竞争，其中所述重链包含SEQIDNO:16，所述轻链包含SEQIDNO:17。15.权利要求1的分离抗体，其中分离的抗体、抗体片段或抗原结合分子包含重链可变结构域和轻链可变结构域，其中所述重链可变结构域包含选自SEQIDNO:6、SEQIDNO:8、SEQIDNO:10、SEQIDNO:12、SEQIDNO:14、SEQIDNO:99和SEQIDNO:105任一的序列；所述轻链可变结构域包含SEQIDNO:7或SEQIDNO:9。16.权利要求15的分离抗体，其中分离抗体、抗体片段或抗原结合分子包含以下之任一：i)包含SEQIDNO:6的重链可变结构域，和包含SEQIDNO:7的轻链可变结构域；ii)包含SEQIDNO:8的重链可变结构域，和包含SEQIDNO:9的轻链可变结构域；iii)包含SEQIDNO:10的重链可变结构域，和包含SEQIDNO:7的轻链可变结构域；iv)包含SEQIDNO:12的重链可变结构域，和包含SEQIDNO:7的轻链可变结构域；v)包含SEQIDNO:14的重链可变结构域，和包含SEQIDNO:7的轻链可变结构域；vi)包含SEQIDNO:99的重链可变结构域，和包含SEQIDNO:7的轻链可变结构域；和vii)包含SEQIDNO:105的重链可变结构域，和包含SEQIDNO:7的轻链可变结构域。17.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中所述抗体或抗体片段或抗原结合分子是人源化的。18.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，包含Fab’片段。19.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中抗体或抗体片段包含IgGFc。20.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，包含单链抗体(scFv)。21.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，包含人恒定区。22.权利要求21的分离抗体，其中分离抗体、抗体片段或抗原结合分子包含重链和轻链，其中所述重链包含选自SEQIDNO:65、SEQIDNO:69、SEQIDNO:73、SEQIDNO:75、SEQIDNO:77、SEQIDNO:100和SEQIDNO:106任一的序列；所述轻链包含SEQIDNO:66或SEQIDNO:70。23.权利要求1的抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中所述抗体或抗体片段与第二抗体或抗体片段交联，其中所述抗体、抗体片段或抗原结合分子是SEQIDNO:1、SEQIDNO:2或SEQIDNO:3的激动剂。24.结合SEQIDNO:1的分离抗体或抗体片段、或其抗原结合分子，选自以下之任一：A.抗体、抗体片段或抗原结合分子，其中：i)重链CDR...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·布罗格顿，D·西珀莱塔，G·德拉诺夫，D·A·尼，F·王，
申请(专利权)人：诺华股份有限公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH