远程装载略微水溶性药物至脂质膜泡制造技术

本发明专利技术提供了脂质体组合物，其包含用于治疗威胁生命的疾病的微溶性药物。将药物封装在脂质体内的优选的方法是通过远程或主动装载。通过共混合脂质体悬液与药物的溶液启动远程装载药物至包含跨膜电化学梯度的脂质体，由此中性形式的化合物自由进入脂质体并且成为带静电的，从而防止逆转移出脂质体。在脂质体内部持续积累化合物，直到电化学梯度消失或所有的药物封装在脂质体中。但是，如文献中描述的该方法限于在水溶液中自由可溶的或溶解为水溶性复合物的药物。本发明专利技术描述了用于远程装载具有低水溶解度(<2mg/mL)的药物的组合物和方法。在优选的实施方式中，增溶剂中的药物与水悬液中的脂质体混合，从而增溶剂的浓度下降至低于其完全溶解药物的能力。这使得药物沉淀但是保持了远程装载能力。该过程是可扩大规模的，并且所得装载药物的脂质体特征在于当脂质体封装药物被在患者中施用时高的药物与脂质比和可预测的药物驻留。

Remote loading slightly water-soluble drug onto lipid film vesicles

The present invention provides liposome compositions comprising soluble drugs for the treatment of life-threatening diseases. The preferred method of encapsulating a drug in liposomes is through remote or active loading. By solution mixed liposome suspension and drug loading to start the remote drug liposome containing transmembrane electrochemical gradient, the neutral form compounds in free liposomes and become electrostatically charged, thereby preventing the inverse transfer of liposome. Accumulation of compounds continues within the liposomes until the electrochemical gradient disappears or all the drugs are encapsulated in liposomes. However, as described in the literature, the method is limited to drugs that are freely soluble or dissolved into water-soluble compounds in aqueous solutions. Compositions and methods for remotely loading a medicament having low water solubility (< 2mg/mL) are described. In preferred embodiments, the drug in the solvent is mixed with liposomes in the water suspension so as to reduce the concentration of the solvent to less than the capacity of the fully dissolved drug. This allows the drug to settle, but maintains remote loading capacity. The process is scalable and the resulting liposomes carrying the drug are characterized by high drug to lipid ratios and predictable drug residence when liposome encapsulated drugs are administered in the patient.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】远程装载略微水溶性药物至脂质膜泡相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2014年8月4日提交的美国临时申请号62/033,073的利益，为了所有的目的通过引用以其整体并入本文。专利技术背景本专利技术涉及药物组合物、制备它们的方法和所得组合物在药物治疗中的用途的领域。药物组合物包括装载在脂质体膜泡的水性内部内的活性治疗剂。相关技术描述制药工业，在其寻找改善的药物时，已经产生了许多有力的化合物，其略微可溶于使得可能有生命的无处不在的溶剂水中。这些新药物的低水溶解度已经使得其难以在包括人的动物中递送它们。这已经需要可溶解略微水溶性药物以确保能够在身体中递送它们的药物递送系统。脂质体是膜泡结构，通常由捕获水性核心的双层膜的两性分子比如磷脂组成。各种类型的脂质体的直径和形态图解在图1中。药物封装在水性核心中或交错在双层膜中。当在身体中稀释时，膜中交错的药物转移离开脂质体。重要地，封装在水性核心或在水性核心中以复合物保持的药物明显比双层中的药物保持更长。充分阐释了药物封装在水性核心中的脂质体用于药物递送的应用(D.Drummond等，J.Pharm.Sci.，(2008)97(11)：4696-4740，PMID10581328)。可使用用于在脂质体中封装功能化合物，尤其药物的各种装载方法。例如，亲水化合物可通过水化功能化合物和形成膜泡的脂质的混合物封装在脂质体中。该技术称为被动装载。随着纳米颗粒形成，功能化合物封装在脂质体中。可用的脂质膜泡(脂质体)产生方法满足了封装水溶性药物的大部分应用(G.Gregoriadis，Ed.，LiposomeTechnology，(2006)LiposomePreparationandRelatedTechniques，3rdEd.)。但是，在脂质体的水性内部腔室中制造封装略微水溶性的药物(例如，水溶解度小于2mg/mL)的脂质膜泡非常困难(D.Zucker等JournalofControlledRelease(2009)139：73-80，PMID19508880)。被动装载亲脂和在较小程度上两性分子功能化合物比亲水功能化合物些许更有效，因为它们在脂质双层和脂质体内(内部)水性介质中分开。但是，使用被动装载，最终功能化合物与脂质比例以及封装效率通常是低的。脂质体中药物的浓度等于周围流体的并且不捕获在内部水性介质的药物在封装之后被冲洗掉。某些亲水或两性分子化合物可使用跨膜pH-或离子-梯度装载至实施的脂质体(D.Zucker等，JournalofControlledRelease(2009)139：73-80)。该技术称为主动或远程装载。容易主动装载的化合物应能够从可横跨脂质体膜扩散的不带电形式改变为不能这样的带电形式。典型地，通过将其添加至制备的脂质体悬液，以具有更低的外侧/更高的内侧pH-或离子-梯度，装载功能化合物。经主动装载，可实现高的功能化合物与脂质质量比和高的装载效率(多达100％)。例子是抗癌药物多柔比星、柔红霉素和长春新碱的主动装载(P.R.Cullis等，BiochimicaetBiophysicaActa，(1997)1331：187-211，和其中的参考文献)。仅仅认为疏水药物能够通过膜插入经一些被动装载/装配机制装载至脂质体。Wasan等在使用胶束将微溶性试剂转移至脂质体双层的说明(US2009/0028931)中声称“具有疏水性质的试剂可插入脂质双层并且这可通过将试剂添加至实施的脂质体实现”。在药物高于其溶解度界限并且为沉淀形式的条件下将微溶性药物远程装载至脂质体是出人意料的事件。D.Zucker等，JournalofControlledRelease(2009)139：73-80声称“疏水的分子可聚集，并且这些聚集横跨脂质体膜具有低的通透性。因此，当非极性/极性表面积比>2.31时(图4)，药物必须具有合理的溶解度，>1.9mM，以便实现高装载，因为仅仅可溶性不带电的分子可进入脂质体。”(D.Zucker等，JournalofControlledRelease(2009)139：73-80)。迄今为止，还未开发从沉淀用略微水溶性试剂主动装载脂质体的水性核心的方法。附图说明图1图解了各种类型的脂质体的直径和形态。图2.由包含硫酸钠(浅阴影)或硫酸铵(深阴影)的HSPC/Chol/Peg-DSPE组成的脂质体制剂用卡非佐米以2的输入药物与脂质比使用下述条件温育。从未封装的药物纯化脂质体并且显示脂质体中封装的卡非佐米的量，表达为μg卡非佐米/μmol脂质。图3是显示捕获试剂对卡非佐米的脂质体装载的作用的条形图。图4是条形图，显示药物引入对卡非佐米的脂质体装载的作用的方法。图5是线图，显示由在600nm下的光散射降低表明的卡非佐米从沉淀装载。图6是卡非佐米的HPLC色谱图，为从沉淀装载至脂质体之前(上)，以及装载至脂质体之后并且使用脂质体外溶液中回到沉淀的反向硫酸铵梯度从脂质体释放(下)。图7是显示作为[DMSO]函数的脂质体封装效率的线图。输入药物与脂质比例是200μg/μmol。图8是显示卡非佐米溶液的光散射作为DMSO浓度的函数的线图。卡非佐米的浓度是0.2mg/mL。图9是显示形成药物沉淀和沉淀的脂质体装载之间延迟时间作用的条形图。图10是显示硫酸铵捕获试剂浓度对从沉淀装载的卡非佐米脂质体药物载荷的作用的线图。图11是显示硫酸铵捕获试剂浓度对从沉淀的卡非佐米脂质体装载效率作用的线图。图12是使用三乙基硫酸铵梯度将不溶解的卡非佐米沉淀装载至脂质体的线图。图13是显示通过远程装载将不溶解的卡非佐米沉淀转移至脂质体的线图。图14是显示当与作为SBCD复合物(Abilify)的脂质体混合或当从原料DMSO溶液直接稀释至脂质体产生药物悬液时比较阿立哌唑的脂质体装载的条形图。图15是显示药物溶液(深色条)和脂质体药物混合物(灰色条)在600nm的吸光度(散射)的条形图。矩形指示其中当与脂质体温育时测量到散射明显下降的样品，指示药物装载。图16是显示DFX在乙酸钙脂质体中装载效率的条形图。图17是显示包含乙酸钙作为捕获试剂的脂质体中DFX装载容量的图。图18是显示包含不同乙酸盐捕获试剂的脂质体中DFX装载容量的图。图19A-图19B是紫杉醇、多西他赛和卡巴他赛的结构以及对它们的修饰的示例，所述修饰能够使得装载的紫杉烷从沉淀进入包含离子梯度的脂质体。专利技术概述在使用脂质体用于递送功能化合物时，一般期望将脂质体装载至高浓度，产生高的功能化合物与脂质质量比，因为这减少每次治疗待施用的脂质体的量，以获得需要的疗效，所有的都因为脂质体中使用的数个脂质本身具有剂量限制性的毒性。装载百分数也对成本效率具有重要性，因为差的装载导致活性化合物的大量损失。在示例性实施方式中，本专利技术提供了脂质体，其包含封装内部水性介质的脂质体脂质膜。内部水性介质包含捕获试剂和略微水溶性治疗剂之间的复合物的水溶液。在进一步示例性实施方式中，本专利技术提供了药物制剂，其包含本专利技术的脂质体。制剂包括脂质体和药学上可接受的稀释剂或赋形剂。在各种实施方式中，药物制剂为单位剂量形式，提供单位剂量的封装在脂质体中的治疗剂。在另一示例性实施方式中，本专利技术提供了制备本专利技术的脂质体的本文档来自技高网...

【技术保护点】
药物制剂，其包含封装在脂质体中的略微水溶性试剂，所述制剂通过包括下述的方法制造：在适于将所述略微水溶性试剂封装在所述脂质体的条件下，使所述脂质体的水悬液接触所述试剂的所述水悬液，其中所述脂质体具有脂质膜封装的内部水性环境并且所述脂质体的所述水悬液包括横跨所述膜的选自质子梯度、离子梯度和其组合的梯度，并且其中所述条件适于所述略微水溶性试剂穿过所述膜并且在所述内部水性环境中浓缩，从而形成所述药物制剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.08.04 US 62/033,0731.药物制剂，其包含封装在脂质体中的略微水溶性试剂，所述制剂通过包括下述的方法制造：在适于将所述略微水溶性试剂封装在所述脂质体的条件下，使所述脂质体的水悬液接触所述试剂的所述水悬液，其中所述脂质体具有脂质膜封装的内部水性环境并且所述脂质体的所述水悬液包括横跨所述膜的选自质子梯度、离子梯度和其组合的梯度，并且其中所述条件适于所述略微水溶性试剂穿过所述膜并且在所述内部水性环境中浓缩，从而形成所述药物制剂。2.根据权利要求1所述的药物制剂，其中所述略微水溶性试剂的所述水悬液通过包括下述的方法制备：将所述试剂基本上完全溶解在非质子溶剂中，形成试剂溶液和随后用超过药物溶解度点的水性介质稀释所述试剂溶液。3.前述权利要求任一项所述的药物制剂，其中所述脂质体选自多层膜泡(MLV)、大单层膜泡(LUV)和小单层膜泡(SUV)、寡层状膜泡(OLV)、疏层膜泡(PLV)或反相蒸发膜泡(REV)。4.前述权利要求任一项所述的药物制剂，其中所述试剂是低分子量治疗剂，其水溶解度小于或等于约2mg/mL。5.前述权利要求任一项所述的药物制剂，其中，所述试剂选自蒽环类化合物、喜树碱化合物、长春花生物碱、玫瑰树碱化合物、紫杉烷化合物、曼青霉素化合物、格尔德霉素化合物、多烯抗生素、吡唑并嘧啶化合物、甾族化合物、基于肽的化合物、紫衫烷、任何前述的衍生物、任何前述的前药和任何前述的类似物。6.根据前述权利要求任一项所述的药物制剂，其中所述试剂选自卡非佐米、伏立康唑、胺碘酮、齐拉西酮、阿立哌唑、伊马替尼、拉帕替尼、oprozomib、环杷明、CUR-61414、PF-05212384、PF-4691502、托西尼布、PF-477736、PF-337210、舒尼替尼、SU14813、阿西替尼、AG014699、维利帕尼、MK-4827、ABT-263、SU11274、PHA665752、克里唑蒂尼、XL880、PF-04217903、XR5000、AG14361、维利帕尼、bosutunib、PD-0332991、PF-01367338、AG14361、NVP-ADW742、NVP-AUY922、NVP-LAQ824、NVP-TAE684、NVP-LBH589、艾日布林、多柔比星、柔红霉素、丝裂霉素C、表柔比星、吡柔比星、红比霉素、癌霉素、N-乙酰基阿缀米辛、柔红霉素苯腙、5-酰亚胺道诺霉素、N-乙酰基道诺霉素、daunoryline、米托蒽醌、喜树碱、9-氨基喜树碱、7-乙基喜树碱、7-乙基-10-羟基-喜树碱、10-羟基喜树碱、9-硝基喜树碱、10,11-亚甲基二氧喜树碱、9-氨基-10,11-亚甲基二氧喜树碱、9-氯-10,11-亚甲基二氧喜树碱、伊立替康、勒托替康、silatecan、(7-(4-甲基哌嗪亚甲基)-10,11-亚乙基二氧-20(S)-喜树碱、7-(4-甲基哌嗪亚甲基)-10,11-亚甲二氧基-20(S)-喜树碱、7-(2-N-异丙基氨基)乙基)-(20S)-喜树碱、CKD-602、长春新碱、长春花碱、长春瑞宾、长春氟宁、长春西汀、长春地辛、2'琥珀酰紫杉醇、2'琥珀酰多西他赛、2'琥珀酰卡巴他赛、2'戊二酰紫杉醇、2'戊二酰多西他赛、2'戊二酰卡巴他赛、紫杉醇的2'琥珀酰二甲基氨基丙基酰胺、多西他赛的2'琥珀酰二甲基氨基丙基酰胺、卡巴他赛的2'琥珀酰二甲基氨基丙基酰胺、琥珀酰卡巴他赛的2'吗啉-4-基乙基酰胺、琥珀酰紫杉醇的2'吗啉-4-基乙基酰胺、琥珀酰多西他赛的2'吗啉-4-基乙基酰胺、2'吗啉代丙基酰胺紫杉醇、2'吗啉代丙基酰胺多西他赛、2'吗啉代丙基卡巴他赛、玫瑰树碱、6-3-氨丙基-玫瑰树碱、2-二乙氨乙基-玫瑰树碱铵、达替铵、瑞替利汀、紫杉醇、多西他赛、卡巴他赛、双氯芬酸、丁哌卡因、17-烯丙氨基-格尔德霉素、17-二甲基氨基乙基氨基-17-脱甲氧格尔德霉素、西替利嗪、非索非那定、Onx0912、Onx0914、PD0332991、阿西替尼、乐伐替尼、PHA665752、SU11274、PF-02341066、foretinib、XL880、PX-478、GDC-0349、PD0332991、AZD4547、戈洛莫德、SCH900776、TG02、UNC0638、ARRY-520、盐酸依拉克达、golvatinib、MK-1775、PF-03758309、AT13387、BAY80-6946、可比西他、GDC-0068、INNO-206、MLN0905、瑞米司他、他立喹达、扑痫酮和其他儿茶酚胺、肾上腺素、这...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·E·哈耶斯，C·O·诺布尔，F·C·小斯佐卡，
申请(专利权)人：佐尼奥尼制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US