一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌PE‑28株及利用该菌株制备人参肽的方法技术

一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌PE‑28株及利用该菌株制备人参肽的方法，涉及微生物技术领域。本发明专利技术的目的在于提供一种利用乳杆菌发酵酶解技术制备功能性生物活性肽的新方法。本发明专利技术的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)PE‑28株，已于2017年3月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO:M2017087。本发明专利技术提供的植物乳杆菌PE‑28株及其发酵酶解制备的人参肽产品都可以作为功能性益生菌和功能性原料应用于食品、保健品和药品等领域，所获得的小分子生物活性人参肽具有显著的提高免疫力和抗疲劳作用。

Methods high proteolytic activity of Lactobacillus plantarum PE 28 strain and the strain of a strain of ginseng peptide preparation

Methods high proteolytic activity of Lactobacillus plantarum PE 28 strains and the strain preparation of a peptide, which relates to the technical field of microorganisms. The present invention aims at providing a new method for preparing functional biologically active peptides by using lactobacillus fermentation enzymolysis technology. The invention of a high proteolytic activity of Lactobacillus plantarum (Lactobacillus plantarum PE) in March 6, 2017 28 strains preserved in China type culture collection center, the preservation number is: CCTCC NO:M2017087. Ginseng peptide product prepared by the invention provides 28 strains of Lactobacillus plantarum PE and fermentation enzyme can be used as functional probiotics and functional materials should be used in food, health care products and medicine and other fields, small molecular biological activity of ginseng peptides obtained significantly improve immunity and anti fatigue effect.

【技术实现步骤摘要】
一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌PE-28株及利用该菌株制备人参肽的方法
本专利技术涉及微生物
，具体涉及一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌PE-28株及利用该菌株制备人参肽的方法。
技术介绍
生物活性肽(Bioacti)根据肽链长度，分为二肽、小分子肽和多肽，肽除具有营养功能以外，还有广泛的生理调节功能，如降血压、阿片样活性、抗血栓、促进免疫以及促进营养物质的消化吸收等。生物活性肽不仅具有广泛的活性和多样性，而且具有来源丰富、成本低、安全性好、易于工业化生产的优点。近年来，随着对生物活性肽的作用机制、生理效果以及制备方法的深入研究，人们已经从各种乳蛋白、大豆蛋白、玉米蛋白、鱼贝类蛋白、胶原蛋白等食物蛋白的酶解产物或发酵制品中分离得到了多种生物活性肽。一些生物活性肽已经作为健康食品、功能食品和药物实现了工业化生产，并取得巨大的经济效益，生物活性肽应用开发前景广阔。目前，对活性肽的研究日益活跃，市场上活性肽的种类和数量不断增加。活性肽的制备主要包括蛋白酶酶解、基因工程、化学合成和微生物发酵等方法。使用食品级微生物发酵酶解活性肽制备技术，例如乳酸菌发酵乳蛋白制备降压肽、抗氧化肽等。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种利用乳杆菌发酵酶解技术制备功能性生物活性肽的新方法，基于此，本专利技术提供一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌PE-28株及利用该菌株制备人参肽的方法。本专利技术为解决技术问题所采用的技术方案如下：本专利技术的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株，已于2017年3月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCCNO:M2017087。本专利技术还提供了采用上述的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株制备人参肽的方法，该方法包括以下步骤：步骤一、将干人参根粉碎，用60％乙醇溶液回流提取两次，过滤后滤渣用80～100℃热水提取两次，每次提取0.5～1.5h，过滤后合并滤液，经浓缩、离心后上清液加入固体(NH4)2SO4进行沉淀，4℃静置过夜，再经离心、透析、冻干工艺获得人参总蛋白冻干粉；步骤二、将人参总蛋白冻干粉制成人参蛋白培养基，将植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株接种于人参蛋白培养基中，所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株的接种量是人参蛋白培养基体积的3％，37℃静置培养15～25h，经离心、浓缩、冻干工艺获得人参肽。作为优选的实施例，步骤一，将干人参根粉碎至30目。作为优选的实施例，步骤一，所述干人参根选取5年以下通过栽培获得的干人参的根。作为优选的实施例，步骤一，所述热水温度为80℃。作为优选的实施例，步骤一，所述(NH4)2SO4浓度为70％。作为优选的实施例，步骤二中，所述人参蛋白培养基的制备过程如下：称取人参总蛋白冻干粉25g，葡萄糖20g，加水配制成1000mL溶液，115℃灭菌20min，获得人参蛋白培养基。作为优选的实施例，步骤二中，离心的条件为：6000rpm，10min，4℃。利用上述的制备方法获得的人参肽。本专利技术的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株在制备食品、保健品、药品中的应用。本专利技术的有益效果是：本专利技术的创新点在于提供一株具有高蛋白酶解活力的乳酸菌新菌株-植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株，以及利用该植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株发酵酶解人参蛋白制备功能性人参肽的方法，为微生物发酵酶解制备生物活性肽提供了一条新途径。本专利技术提供的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株及其发酵酶解制备的人参肽产品都可以作为功能性益生菌和功能性原料应用于食品、保健品和药品等领域，所获得的小分子生物活性人参肽具有显著的提高免疫力和抗疲劳作用。附图说明图1为硫酸铵分级沉淀人参总蛋白的SDS-PAGE电泳图谱。图2为利用本专利技术的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株制备的人参总蛋白HPLC分析图谱。图3为利用本专利技术的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株制备的人参肽HPLC分析图谱。具体实施方式本专利技术是经广泛筛选获得的一株具有高蛋白酶解活力的乳酸菌新菌株-植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株，并以人参蛋白为底物，利用植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株发酵酶解制备小分子生物活性人参肽，该小分子生物活性人参肽具有显著的提高免疫力和抗疲劳作用，是开发健康食品和保健食品重要的功能因子。本专利技术的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株，已于2017年3月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内(武汉大学保藏中心)，保藏编号为：CCTCCNO:M2017087。本专利技术的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株，是采用东北发酵酸菜经反复培养纯化得到的，20％甘油、-80℃保存备用。本专利技术的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株经多种试验鉴定，革兰氏染色阳性、过氧化氢酶试验阴性、吲哚试验阴性、产硫化氢试验阴性、明胶液化试验阴性、水解淀粉试验阴性和硝酸盐还原试验阴性。本专利技术的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株的生理生化特性如下：革兰氏阳性，过氧化氢酶阴性，联苯胺试验阴性，吲哚试验阴性，乙酰甲基甲醇试验阳性；不运动的杆菌；最适生长温度为37～42℃，适宜pH为5.0～7.0；在15℃和45℃能够生长；耐受6.5％NaCl；不水解淀粉，不液化明胶，不产生硫化氢；发酵葡萄糖产酸不产气；在液体MRS培养基中呈均匀浑浊生长，久置菌体呈白色沉淀。本专利技术的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株的API50CH(法国梅里埃公司)鉴定结果如下：能利用核糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、木糖、甘露糖、甘露醇、山梨醇、苦杏仁苷、熊果苷、N-乙酰-葡萄糖胺、七叶醇、柳醇、纤维二糖、菊糖、乳糖、蜜二糖、蔗糖、海藻糖、山梨糖、松三糖、棉籽糖、牻牛儿糖、葡萄糖酸盐；不能利用阿东醇、阿拉伯糖、糖原、卫矛醇、麦芽糖、肌醇、α-甲基-D-葡萄糖苷、α-甲基-D-甘露糖苷、淀粉、鼠李糖、木糖醇、D-松二糖、D-塔格糖、D-米苏糖、葡萄糖酸盐、D-阿拉伯糖醇、岩糖、L-阿拉伯糖醇、2-酮基-葡萄糖酸盐、5-酮基-葡萄糖酸盐。本专利技术的菌株PE-28经16SrDNA序列同源性分析可以确定为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)。本专利技术的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株可以作为一种活性成分在制备产品中的应用。所说的产品可以为利用植本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE‑28株，其特征在于，该菌株已于2017年3月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO:M2017087。

【技术特征摘要】
1.一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株，其特征在于，该菌株已于2017年3月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCCNO:M2017087。2.利用权利要求1所述的一株高蛋白酶解活力植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株制备人参肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将干人参根粉碎，用60％乙醇溶液回流提取两次，过滤后滤渣用80～100℃热水提取两次，每次提取0.5～1.5h，过滤后合并滤液，经浓缩、离心后上清液加入固体(NH4)2SO4进行沉淀，4℃静置过夜，再经离心、透析、冻干工艺获得人参总蛋白冻干粉；步骤二、将人参总蛋白冻干粉制成人参蛋白培养基，将植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株接种于人参蛋白培养基中，所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)PE-28株的接种量是人参蛋白培养基体积的3％，37℃静置培养15～25h...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁铁，延向前，张洁茹，
申请(专利权)人：吉林省命之元生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22