与IL‑4和/或IL‑13结合的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及与IL‑4和/或IL‑13结合的抗体及其用途。具体而言，本发明专利技术涉及新颖的人源化抗IL‑4和IL‑13抗体及其片段，以及特异地结合到IL‑4和IL‑13的新颖双特异抗体及其片段。本发明专利技术还包括使用所述抗体来治疗或预防IL‑4和/或IL‑13介导的疾病或障碍，包括变应性哮喘和皮炎。

4 and IL and / or IL 13 binding antibodies and uses thereof

The present invention relates to IL 4 and / or IL 13 binding antibodies and uses thereof. Specifically, the present invention relates to a novel humanized anti IL 4 and IL 13 antibody and its fragments, and specifically binds to IL 4 and IL 13 novel bispecific antibody and its fragments. The invention also includes the use of the antibodies for the prevention or treatment of IL 4 and / or 13 IL mediated diseases or disorders, including asthma and allergic dermatitis.

【技术实现步骤摘要】
与IL-4和/或IL-13结合的抗体及其用途本申请是申请日为2008年10月14日、中国申请号为200880111668.6、专利技术名称为“与IL-4和/或IL-13结合的抗体及其用途”的专利技术申请的分案申请。专利
本专利技术涉及新颖的抗IL-4抗体、抗IL-13抗体以及双特异抗IL-4/抗IL-13抗体及其在因不当的IL-4和/或IL-13活性或代谢而造成的哺乳动物包括人的疾病或障碍的改善、治疗和预防方面的用途。感兴趣的抗体可能阻断配体如IL-4或IL-13与受体或受体复合物如IL-4Rα、IL-13Rα1和IL-13Rα2的结合和/或信号传导。本专利技术还披露了含有感兴趣抗体的预防、免疫治疗和诊断组合物以及它们在预防或治疗哺乳动物包括人的疾病的方法中的用途，这些疾病是由淋巴样细胞和非淋巴样细胞，包括单核细胞、成纤维细胞和内皮细胞的不适当代谢和/或活性而引起的。这些疾病包括自身免疫缺陷以及由炎症引起或以炎症为特征的疾病，如变应性哮喘和皮炎。专利技术背景白介素-4(IL-4)是一种对于淋巴B和T细胞以及许多非淋巴样细胞，包括单核细胞、内皮细胞和成纤维细胞具有广谱生物效应的多效性细胞因子。例如，IL-4刺激几个依赖于IL-2和IL-3的细胞系的增殖，诱导II类主要组织相容性复合体在静息B细胞上的表达，并增强人B细胞的IgG4和IgE分泌。IL-4与Th2-型的免疫响应有关，是由Th2细胞产生的，并促进Th2细胞的分化。多种障碍都牵涉到IL-4，如过敏和哮喘。IL-13是最近发现的由活化T淋巴细胞、B淋巴细胞以及活化后的肥大细胞分泌的112个氨基酸的细胞因子(Minty,A.等人,Nature,1993,362,248-250,和McKenzie,A.N.等人,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A,1993,90,3735-3739)。由于和IL-4具有许多共同的生物特性，IL-13被描述为一个IL-4样的细胞因子。在B细胞(Defrance,T.等人,J.Exp.Med.,1994,179,135-143,Punnonen,J.等人,Proc.Natl.Acad.Sci.(USA),1993,90,3730-3734,Fior,R.等人,Eur.CytokineNetwork,1994,5,593-600)、单核细胞(Muzio,M.R.F.等人,Blood,1994,83,1738-1743,DeWaalMalefyt,R.等人,J.Immunol,1993,151,6370-6381,Doyle,A.等人,Eur.J.Immunol.1994,24,1441-1445,Montaner,L.J.等人,J.Exp.Med.,1993,178,743-747,Sozzani,P.等人,J.Biol.Chem.,1995,270,5084-5088)以及其它非造血细胞(Herbert,J.M.等人,FebsLett.,1993,328,268-270,和Derocq,J.M.等人,FebsLett.1994,343,32-36)上，其活性确实类似于IL-4的活性。另一方面，与IL-4相反，它对静息或活化的T细胞并没有特异效应(Zurawuki,G.等人,Immunol.Today,1994,15,19-26)。A.J.Minty以及关于IL-13的评论文章详细地描述了IL-13在单核细胞/巨噬细胞、B淋巴细胞以及有些造血前体上的多种生物活性。此外，还有几份数据表明，这一细胞因子在其它细胞类型上具有多效效应。这些直接受到IL-13影响的非造血细胞为内皮细胞、小胶质细胞、角质形成细胞以及肾和结肠癌。细胞内生物分子所发射信号的分析阶段之一是识别其膜受体。针对IL-13受体的研究表明，IL-13和IL-4有共同的受体，或者至少具有共同受体复合物的一些组分，以及共同的信号转导元素(ZurawskiS.M.等人,EmboJournal,1993,12,2663-2670,Aversa,G.等人,J.Exp.Med.,1993,178,2213-2218,Vita,N.等人,Biol.Chem.,1995,270,3512-3517,Lefort,S.等人,FebsLett.,1995,366,122-126)。这一受体存在于多种类型细胞的表面，其数目随所考虑细胞类型不同而有变化。A.J.Minty指出了IL-13和IL-4受体的相当的分布(Interleukin-13forCytokinesinHealthandDisease(健康和疾病中的细胞因子白介素-13).编著D.G.Remick和J.S.Frie,MarcelDecker,N.Y.1996)。细胞表面受体和受体复合物以不同的亲和力与IL-4和/或IL-13结合。与IL-4和/或IL-13结合的受体和受体复合物的主要组分为IL-4Rα、IL-13Rα1和IL-13Rα2。这些链作为IL-4Rα/IL-13Rαl(II型IL-4R)或IL-4Rα/γc(I型IL-4R)的单体或异源二聚体表达在细胞表面上。IL-4Rα单体和IL-4Rα/γc异源二聚体与IL-4结合但不与IL-13结合。IL-13Rα1和IL-13Rα2单体与IL-13结合但不与IL-4结合。IL-4Rα/IL-13Rα1异源二聚体既与IL-4结合，也与IL-13结合(Murata等人,Int.J.Hematol.,1999,69,13-20)。Th2-型免疫响应促进抗体生成和体液免疫，并被精心设计用来抵御细胞外病原体。Th2细胞是产生Ig的中介体(体液免疫)并产生IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10和IL-13(Tanaka,等人,CytokineRegulationofHumoralImmunity，251-272,Snapper,编辑，JohnWiley和Sons,NewYork(1996))。Th2-型免疫响应的特征是产生某些类型的细胞因子(如IL-4,IL-13)以及特定类型的抗体(IgE,IgG4)，属于典型的变应性反应，可能造成含泪眼和哮喘症状，如气道炎症和肺中气道肌肉细胞的收缩。根据其生物学功能，IL-4和IL-13都是具有重要治疗意义的细胞因子，在许多疾病中，包括哮喘，起着关键的作用(CurrOpinAllergyClinImmunol2005,Vo.5,161-166)。IL-4已被证明能够抑制自身免疫疾病，IL-4和IL-13都证明具有增强抗肿瘤免疫响应的潜力。由于这两个细胞因子都涉及到变应性疾病的发病机制，因此，这些细胞因子的抑制剂应该能够提供治疗上的益处。相应地，需要能够抑制IL-4、IL-13的改进的活性剂(agent)，以及既能抑制IL-4也能抑制IL-13的单一活性剂。专利技术概述本专利技术提供可特异结合到IL-4和/或IL-13的人源化单克隆和双特异新颖抗体及其片段和衍生物。有些抗IL-4和/或IL-13单或双特异抗体及其片段可以改变，以防止形成链内二硫键，从而形成在制备和体内使用过程中均稳定的分子。本专利技术的抗体在此处所述的生物测定中中和IL-4和/或IL-13活性。本专利技术包括所述抗体的可变重链和轻链的氨基酸序列及其对应的核酸序列。本专利技术的另本文档来自技高网...

【技术保护点】
特异结合IL‑4的人源化抗体。

【技术特征摘要】
2007.10.15 EP 07291259.5;2008.03.17 US 61/037,1281.特异结合IL-4的人源化抗体。2.权利要求1的抗体，其包含由SEQIDNO:3组成的可变轻链结构域。3.权利要求1的抗体，其包含选自SEQIDNO:4和SEQIDNO:5的可变重链结构域。4.权利要求1-3中任一项的可选的抗体，其中所述抗体是抗体片段。5.权利要求1的抗体，其包含恒定区的CH1、CH2和CH3结构域。6.如权利要求5的多肽，其中的IgG抗体是IgG4抗体。7.编码如权利要求1的多肽的核酸。8.含有如权利要求7的核酸的载体。9.含有如权利要求8的载体的细胞。10.特异结合IL-13的人源化抗体。11.权利要求10的抗体，其包含由SEQIDNO:1组成的可变轻链结构域。12.权利要求11的抗体，其包含由SEQIDNO:2组成的可变重链结构域。13.的权利要求10–12中任一项的可选的抗体，其中所述抗体是抗体片段。14.权利要求10-12中的任一项的抗体，其包含恒定区的CH1、CH2和CH3结构域。15.如权利要求14的多肽，其中IgG抗体是IgG4抗体。16.编码如权利要求15的多肽的核酸。17.含有如权利要求16的核酸的载体。18.含有如权利要求17的载体的细胞。19.特异结合IL-13和IL-4的双特异抗体或双特异抗体片段。20.权利要求19的双特异抗体或抗体片段，其进一步包含可变的轻链和可变的重链。21.权利要求20的双特异抗体或抗体片段，其中所述可变轻链包含氨基酸序列SEQIDNO:1和SEQIDNO:3。22.权利要求20的双特异抗体或抗体片段，其中所述可变重链包含氨基酸序列SEQIDNO:2和SEQIDNO:5。23.权利要求20的双特异抗体或抗体片段，其中所述可变重链包含氨基酸序列SEQIDNO:2和SEQIDNO:4。24.权利要求20的双特异抗体或抗体片段，其中所述可变轻链包含氨基酸序列SEQIDNO:1和SEQIDNO:3，且所述可变重链包含氨基酸序列SEQIDNO:2和SEQIDNO:4。25.权利要求24的双特异抗体或抗体片段，其中所述SEQIDNO:1和SEQIDNO:3由肽连接体连接在一起，所述SEQIDNO:2和SEQIDNO:4由肽连接体连接在一起。26.权利要求25的双特异抗体或抗体片段，其中所述肽连接体由SEQIDNO:6组成。27.特异地结合IL-13和IL-13的双特异...

【专利技术属性】
技术研发人员：E·劳，V·米科尔，D·李，J·克鲁伊普，M·戴维森，
申请(专利权)人：塞诺菲安万特股份有限公司，
类型：发明
国别省市：法国,FR