一种前列腺癌标志物PLXNA1及其应用制造技术

本发明专利技术公开了PLXNA1在作为预测前列腺癌的发生发展、预后以及区分进展性恶性程度较高的前列腺癌的标志物中的应用，通过检测PLXNA1 DNA拷贝数的变化、mRNA和由其编码的蛋白的表达量，对前列腺癌进行诊断以及预后判断，具有高准确度，高特异性和高灵敏度的特点。本发明专利技术还公开了PLXNA1在作为前列腺癌的治疗靶点中的应用。本发明专利技术还公开了一种诊断和预测前列腺癌的试剂盒，所述试剂盒使用方便，能够用于诊断和预测前列腺癌。

Prostate cancer marker PLXNA1 and its application

The present invention discloses the application of PLXNA1 markers distinguish progressive malignancy as a predictor of prostate cancer progression, and prognosis of prostate cancer in the number of changes, copy by detection of PLXNA1 mRNA and DNA by expression of the encoding protein, diagnosis and prognosis of prostate cancer, with high accuracy, high specificity and high sensitivity characteristics. The present invention also discloses the use of PLXNA1 as a therapeutic target for prostate cancer. The invention also discloses a kit for diagnosing and predicting prostate cancer, which is easy to use and can be used for diagnosing and predicting prostate cancer.

【技术实现步骤摘要】
一种前列腺癌标志物PLXNA1及其应用
本专利技术属于癌症诊断领域，具体涉及PLXNA1作为区分进展性恶性程度较高的前列腺癌标志物及其应用，还涉及相应的诊断试剂盒。
技术介绍
前列腺癌(ProstaticCancer,PCa)是一种严重威胁男性健康的恶性肿瘤，其发病及死亡率高峰在70岁左右,占全球肿瘤发病率第二位、死亡率第六位。2016年，美国约有180890例新发病例，26120例死亡病例。然而，前列腺癌却具有明显的种族差异性。仅在美国，非裔美国人前列腺癌的发病率是白种人的2倍；此外，其在亚洲的发病率也明显低于西方国家。因此，针对前列腺癌，亟待开展不同种族内的基因组学分析。前列腺癌具有强烈的个体差异性，不同病人对相同治疗方案的反应相差甚远。一些病人可在诊断后生存10多年，但也有些病人仅仅生存2‐3年。因此，用于探索前列腺癌基因、基因表型异质性以及前列腺癌进展中信号通路变化的研究便起着举足轻重的作用。近年来，随着靶向测序、拷贝数变异以及全基因组测序技术的发展，前列腺癌基因景观研究也取得了重大突破。已有大量研究揭示了一些前列腺癌相关的基因组学改变，如：最常见的TMPRSS2‐ERG基因融合、8q拷贝数增多和原癌基因DNA重组(Chromoplexy)等等。然而，这些基因组学改变所引起的结果却尚不明确。外显子测序技术已经揭示了部分在编码区域的特异性基因改变，发现了一些高频突变基因，如：SPOP、FOXA1、TP53、PTEN以及其他在PIK3CA/B、ZBTB16/PLZF和AR的基因组学改变。近期，美国癌症基因组图谱(TCGA)也对333例前列腺癌患者(绝大多数为白种人)进行了较为全面的基因组分析。可见，大量针对西方人口的前列腺癌基因组学研究已经开展，并取得了一定进展。然而，近年来，尽管在北京、上海、香港等医学、经济发达城市，前列腺癌发病率显著升高，亚洲人群前列腺癌基因组研究却仍在起步之中。因此，亟需开展相应的基因组学研究，进而更为全面的掌握前列腺癌的分子病理学，以便更好地指导临床工作。前列腺癌作为种族差异最大的恶性肿瘤，尤其表现在中国患者当中，确诊前列腺癌时的PSA值较欧美人群高，确诊时Gleason评分也相对更高，并且与西方国家不同的是，我国PCa发现时多为晚期，肿瘤已经局部或远处转移，中国前列腺癌患者确诊时晚期患者比例高，有百分之六十左右的患者在确诊时就已经是局部进展或者转移性前列腺癌患者。众所周知，上皮间质转化是肿瘤恶性进展，尤其是肿瘤转移当中的重要一步，目前也有很多的机制研究针对EMT的这一过程；肿瘤细胞的干性也是促进肿瘤恶性进展的重要机制之一，因此肿瘤相关EMT过程以及一些肿瘤干细胞相关分子也是我们判断肿瘤病人预后和提供可能的治疗靶点的重要途径因此，可以看到，寻找到促进前列腺癌恶性进展的机制，尤其是东西方人差异的机制，以及寻找临床上针对前列腺癌患者预后判断的分子，使患者的预后判断更为精确就显得尤为重要。目前在国际上相关用于判断前列腺癌患者预后的检测试剂盒较多，如在目前商品化的Prolaris(46genes)，Decipher(22genes)，OncotypeDX(17genes)，总共涵盖85个基因，而仅Prolaris和Decipher中有一个共同基因，并且都没有在中国人群样本中进行过验证，因为可见前列腺癌目前还缺乏理想的分子分型标志物。因此，寻找适合中国人群，并且在中国人群或中国以及国内外多个人群中验证过的，有助于判断患者预后的分子分型标志物，就显得尤为重要。本专利技术通过高通量测序结合细胞生物学实验发现，AxonGuidance信号通路的一个分子PLXNA1在前列腺癌，特别是高Gleason评分前列腺癌组织中表达量增高，并且进一步探索了其在前列腺癌恶性进展中的生物学功能，并且通过多个已发表文章数据库验证，国内外多个人群队列的生存预后分析验证，发现其可以作为前列腺癌预后判断的重要分子。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供PLXNA1在作为预测前列腺癌发生发展以及预后的标志物中的应用。其中，所述PLXNA1(PlexinA1)是单次跨膜的脑信号蛋白(semaphorin)的受体，属于Axonguidance信号通路，主要在神经元的轴突方面发挥重要功能，通过一系列细胞内的信号通路，引起内皮细胞的聚集和排斥，调控免疫细胞和破骨细胞的功能。目前，PLXNA1在肿瘤中的研究较少，仅有少数在胃癌、恶性胸膜间皮瘤、横纹肌肉瘤当中的报道。其中，所述PLXNA1的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述PLXNA1的蛋白序列如SEQIDNO.2所示。本专利技术中，所述PLXNA1的DNA、mRNA和蛋白能够作为预测前列腺癌发生发展以及预后的标志物；通过PLXNA1的DNA拷贝数变化、mRNA和蛋白的表达水平对前列腺癌进行预测。本专利技术中，与所述PLXNA1DNA的同源性为80％、85％、90％、95％及99％的序列，也可作为前列腺癌的标志物。本专利技术中，与所述PLXNA1mRNA的同源性为80％、85％、90％、95％及99％的序列，也可作为前列腺癌的标志物。本专利技术中，与所述PLXNA1蛋白质的同源性为80％、85％、90％、95％及99％的序列，也可作为前列腺癌的标志物。本专利技术还提供了PLXNA1的检测试剂在制备预测前列腺癌发生发展以及预后的产品、区分进展期恶性程度前列腺癌的产品中的应用。本专利技术还提供了一种前列腺癌体外诊断产品，所述体外诊断试剂包括特异性检测PLXNA1DNA的试剂、和/或特异性检测PLXNA1mRNA的试剂，和/或特异性检测PLXNA1蛋白质的试剂。其中，所述前列腺癌体外诊断产品包括试剂盒、基因芯片、固体支持体；所述固体支持体包括阵列、微阵列或蛋白质阵列。本专利技术还提供了所述PLXNA1检测前列腺癌的基因芯片，所述基因芯片包括PLXNA1的检测试剂。本专利技术还提供了所述PLXNA1检测前列腺癌的试剂盒，所述试剂盒包括PLXNA1的检测试剂；该试剂盒具有特异性高，使用方便等优点。本专利技术还提供了PLXNA1在制备抑制前列腺癌细胞增殖、转移、侵袭的药物中的应用。本专利技术还提供了PLXNA1在制备抑制前列腺癌肿瘤生长、转移的药物中的应用。本专利技术还提供了PLXNA1在制备抑制间质细胞标志物波形蛋白表达的药物中的应用。本专利技术还提供了PLXNA1在制备抑制N-钙黏素表达的药物中的应用。本专利技术还提供了PLXNA1在制备抑制纤连蛋白表达的药物中的应用。本专利技术还提供了PLXNA1在制备抑制干细胞标志物CD44，CD133，CD49f，OCT4，NANOG，SOX2和LIN28B以及神经内分泌细胞标志物CgA，SYP和FOXA2的表达的药物中的应用。本专利技术还提供了PLXNA1在制备促进上皮细胞标志物E-钙黏素表达的药物中的应用。本专利技术还提供了PLXNA1在作为前列腺癌的治疗靶点中的应用。本专利技术还提供了PLXNA1的抑制剂在制备治疗前列腺癌的药物中的应用；其中，所述抑制剂是指能够抑制PLXNA1DNA的拷贝数增加，或能够抑制PLXNA1的DNA、mRNA或由其编码的蛋白的转录或表达，或抑制PLXNA1蛋白活性的任何的无机物、有机物、核酸分子、受体、拮抗剂、阻断剂等。本专利技术还提供了PLXNA1的含量变化在预测前列腺本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种前列腺癌的标志物PLXNA1，其特征在于，所述PLXNA1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种前列腺癌的标志物PLXNA1，其特征在于，所述PLXNA1的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种前列腺癌的标志物PLXNA1，其特征在于，所述PLXNA1的蛋白序列如SEQIDNO.2所示。3.如权利要求1所述的标志物PLXNA1的检测试剂在制备预测前列腺癌的发生发展以及预后的产品中的应用。4.如权利要求1所述的标志物PLXNA1的检测试剂在制备区分进展性恶性程度较高的前列腺癌的产品中的应用。5.一种前列腺癌体外诊断产品，其特征在于，所述体外诊断试剂包括特异性检测PLXNA1DNA的试剂、和/或特异性检测PLXNA1mRNA的试剂，和/或特异性检测PLXNA1蛋白质的试剂。6.如权利要求5所述的前列腺癌体外诊断产品，其特征在于，所述前列腺癌体外诊断产品包括试剂盒、基因芯片、固体支持体；所述固体支持体包括阵列、微阵列或蛋白质阵列。7.如权利要求1所述的PLXNA1在制备抑制前列腺癌细胞增殖、转移、侵袭，以及抑制前列腺癌肿瘤生...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙颖浩，任善成，朱亚生，施晓磊，
申请(专利权)人：上海长海医院，
类型：发明
国别省市：上海,31