The invention discloses a conductive composite film obtained by extracellular matrix cell sheet and its preparation method, the method is as follows: mainly in light induced cell detachment cell culture surface (such as TiO2 nanodot films) were cultured on cells in the culture process of adding nano conductive material, such as graphene nanosheets and graphene nano dots, these nano conductive particles may be endocytosis, conductive material dispersed within and between cells, when cell layers after fusion by light induced cell detachment, obtain cell sheet layer complete, it after washing and then get off cell extracellular matrix conductive composite film. The conductive cell outer matrix composite film prepared by the method can be applied to the fields of tissue engineering and the like. In addition, the preparation method of the invention has simple process and easy realization, and is favorable for popularization and application.
【技术实现步骤摘要】
一种经由细胞片层获得的导电细胞外基质复合薄膜及其制备方法
本专利技术涉及组织工程领域,具体涉及一种经由细胞片层获得导电细胞外基质复合薄膜及其制备方法。
技术介绍
细胞外基质是组织的基本组成部分之一,由一些糖蛋白、结构蛋白及粘着蛋白组成,可对细胞的基本生命活动进行全方位的生物学调控,如对细胞的形状、生长、迁移和分化,胚胎的发育以及受损组织或器官的修复等有至关重要的作用。有研究报道胶原蛋白及透明质酸等模拟的细胞外基质环境和电刺激的协同作用能有效的促进人骨髓间充质干细胞向成骨方向分化[HessR,JaeschkeA,NeubertH,etal.SynergisticeffectofdefinedartificialextracellularmatricesandpulsedelectricfieldsonosteogenicdifferentiationofhumanMSCs.Biomaterials,2012,33(35):8975-8985]。虽然天然的生物材料(胶原及透明质酸等)具有一定的生物相容性,但是来源有限,价格相对昂贵,同时具有生物排异性。而支架自身的导电性是决定可否进行电刺激的关键。因此,如何获得细胞分泌的细胞外基质与导电物质的复合材料在组织工程具有很强的实际应用意义和研究价值。细胞在体外培养过程中就可在与基板连接处分泌出一层细胞外基质。如果进行胰酶处理,在细胞脱离培养表面之前细胞外基质就会被消化掉,无法获得所需的细胞外基质层。而单纯的机械剥离,则会使细胞外基质超微结构发生一定改变,影响其后续的功能性。本专利技术在近年来报道的光致细胞薄层获取技术 ...
【技术保护点】
一种经由细胞片层获得导电细胞外基质复合薄膜的方法,其特征在于,制备方法包括如下步骤:(a).对可见光致细胞脱附的细胞培养表面以紫外光照或蒸气消毒方式消毒;(b).将上述经处理后的表面作为体外细胞培养表面,在其表面以5×10
【技术特征摘要】
1.一种经由细胞片层获得导电细胞外基质复合薄膜的方法,其特征在于,制备方法包括如下步骤:(a).对可见光致细胞脱附的细胞培养表面以紫外光照或蒸气消毒方式消毒;(b).将上述经处理后的表面作为体外细胞培养表面,在其表面以5×104~2×106个/cm2的密度种植细胞,加入细胞培养基,并放入37℃恒温及5%二氧化碳的细胞培养箱中培养7~15天;1~3天换液一次,在细胞脱附前1~5天加入1~100μg/mL纳米导电物质,最终在细胞培养表面上形成完整的细胞片层;(c).将经上述培养后的培养表面移入PBS中,通过波长为365nm的紫外光光照5~30min,使培养后的细胞或细胞薄层脱附,用PBS缓冲液以及去离子水对脱附后的细胞片层反复清洗;(d).将细胞片层浸泡于去离子水中,置于-80℃冷冻30~60min,取出后在25~37℃解冻20~45min,冷冻-解冻循环重复3~10次,之后用去离子水清洗,获得导电细胞外基质复合薄膜。2.根据权利要求1所述的经由细胞片层获...
【专利技术属性】
技术研发人员:程逵,王小召,陈樽,翁文剑,
申请(专利权)人:浙江大学,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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