The invention discloses a DNA fragment with the promoter function of Bacillus subtilis and its application. The DNA fragment is any one of the following sequence: (a) nucleotide sequence of SEQ ID NO.1 shown or its complementary sequence; (b) a nucleotide sequence shown in SEQ ID NO.1 of one or more nucleotides substitution, deletion or addition of the nucleotide sequence with the nucleotide sequence shown SEQ ID and NO.1 the same as the function of promoter or its complementary sequence; (c) a nucleotide sequence shown in SEQ ID NO.1 add one or more ribosome binding site sequence. The invention of the DNA fragment with promoter function, also has the activity of strong expression, without the addition of inducer to conditions that can achieve high expression of exogenous genes can be used in heat beta galactosidase and expression of transglutaminase, especially provides effective components for the dead Bacillus subtilis expression system.
【技术实现步骤摘要】
一种枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段及其应用
本专利技术涉及一种DNA片段,特别涉及一种枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段及其应用。
技术介绍
通过基因重组技术生产有价值的外源蛋白质是当今生物技术研究与开发的热点之一。细菌具有生长快、易培养、表达量高以及分子操作简单的特点,这使得它们已广泛地开发应用于异源蛋白质的表达。其中,枯草芽抱杆菌由于其安全无毒、遗传背景清晰、分泌表达水平高等诸多优点,而成为工业用理想的宿主细胞。枯草芽抱杆菌中表达异源蛋白需要各种元件,其中启动子对于表达水平的影响至关重要。通常有两种思路进行启动子的遗传改造:一种方式是对目的基因本身的启动子进行突变改造,从而提高启动子的活性;另一种方式是将原有的启动子替换成其他的天然或人工构建的启动子,从而彻底改变下游基因的表达谱,实现对基因转录水平的人为控制。目前成功用于枯草芽抱杆菌表达系统的启动子主要有P43、PamyQ、Pspac、PxylA等,这些启动子在实验室的富集培养基中表现良好,但鲜见它们被用于酶蛋白的工业放大生产。因此,有必要找到更高效的、适合于工业培养基生产表达的启动子,以适应发酵对表达水平越来越高的要求。
技术实现思路
本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足,提供一种枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段。本专利技术的另一目的在于提供所述枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段的应用。本专利技术的目的通过下述技术方案实现:一种枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段,所述DNA片段为如下任一序列:(a)如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列或者其互补序列;(b)对如SEQ ...
【技术保护点】
一种枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段,其特征在于,所述DNA片段为如下任一序列:(a)如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者其互补序列;(b)对如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的,具有与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列相同的作为启动子功能的核苷酸序列或者其互补序列;(c)对如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列添加一个或多个核糖体结合位点的序列。
【技术特征摘要】
1.一种枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段,其特征在于,所述DNA片段为如下任一序列:(a)如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列或者其互补序列;(b)对如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的,具有与SEQIDNO.1所示的核苷酸序列相同的作为启动子功能的核苷酸序列或者其互补序列;(c)对如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列添加一个或多个核糖体结合位点的序列。2.根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段,其特征在于:所述核糖体结合位点的序列为如SEQIDNO.2所示的核苷酸序列。3.权利要求1或2所述的枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段在蛋白表达中的应用。4.一种载体,其特征在于:包含如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列和如SEQIDNO.2所示的核糖体结合位点的序列。5.根据权利要求4所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:潘力,刘欣,叶燕锐,王斌,
申请(专利权)人:华南理工大学,
类型:发明
国别省市:广东,44
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。