穿心莲内酯衍生物及其3,19酯化物在制备抗肝纤维化药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，公开了穿心莲内酯衍生物在制备预防和治疗肝纤维化药物中的应用，涉及15‑苄亚基‑14‑脱氧‑11,12‑脱氢穿心莲内酯衍生物及其3,19酯化物。经实验证明，该类化合物显著抑制人肝星状细胞LX‑2迁移、活化。显著降低肝纤维化大鼠肝组织纤维化水平，降低细胞外基质蛋白（ECM）相关组分含量；显著降低肝纤维化大鼠免疫炎症相关因子的水平，并有效抑制免疫炎症反应；抑制肝组织中肝星状细胞活化，促进胶原降解。将该类化合物作为活性成份用于制备抗肝纤维化药物，高效低毒，为肝纤维化的治疗和预防提供了新的药物途径，从而扩大了临床用药的可选择范围，具有良好的应用开发前景。

Andrographolide derivative and its 3,19 esterified substance and its application in preparing medicine for resisting liver fibrosis

The invention belongs to the technical field of medicine, discloses andrographolidume derivatives for prevention and treatment of drug application in liver fibrosis in the system, involving 15 subunit 14 benzyl deoxy 11,12 dehydrogenation of andrographolide derivatives and 3,19 esters. The experiment proved that the compounds inhibit hepatic stellate cell migration and activation of LX 2. Reduce the level of fibrosis in liver fibrosis rats, decrease of extracellular matrix protein (ECM) related content decreased significantly; related factors of immune inflammation in rats with liver fibrosis, and effectively inhibit the immune inflammatory reaction; hepatic stellate cell activation inhibition in liver tissue, promote collagen degradation. This class of compounds as the active ingredient for the preparation of anti fibrosis drugs, high efficiency and low toxicity, and provides a new way for drug treatment and prevention of hepatic fibrosis, thereby expanding the clinical medication choice, has a good application prospect.

【技术实现步骤摘要】
穿心莲内酯衍生物及其3,19酯化物在制备抗肝纤维化药物中的应用
本专利技术涉及穿心莲内酯衍生物作为抗肝纤维化药物的应用，具体涉及15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物，属医药

技术介绍
全球范围内，肝纤维化(Hepaticfibrosis，HF)的发病率约为100/10万人，多见于35-50岁的成年人，其中男性多于女性，农村高于城市。HF是指肝细胞受到损害后，细胞外基质(Extracellularmatrix，ECM)与结缔组织异常增生的现象。HF会导致肝组织结构和功能发生改变，当细胞外基质发生长时间的持续性累积，纤维增生形成网状间隔阻碍了肝细胞与血液之间正常的物质与能量交换，大量肝细胞出现坏死，形成肝硬化(Livercirrhosis，LC)。据世界卫生组织的定义，LC指弥漫性肝脏纤维化并伴有异常结节增生，最终引发肝衰竭和肝癌(Hepatocellularcarcinoma，HCC)。临床研究认为HF是一种可逆性的病变，而LC和HCC则是不可逆的高死亡率病变。因此，控制肝纤维化的发生、发展，可有效控制肝硬化、乃至肝癌的发生，对于延长慢性肝炎患者寿命，提高生活质量具有重大的意义。临床上酒精肝、脂肪肝、病毒性肝炎、自身免疫性疾病和代谢紊乱等都可引发肝纤维化。正常肝脏的ECM处于动态平衡状态。慢性肝损伤发生时，ECM的合成速度远远高于降解速度，大量胶原蛋白交联成网形成纤维膈膜，进一步引发炎症反应，导致恶性循环，刺激纤维组织生成。当有病毒侵入、有毒物质进入和发生代谢紊乱时，受损肝细胞周围聚集大量炎症细胞，部分肝细胞由于受到损伤导致膜的通透性增大，释放出的代谢产物、活性氧和细胞因子能够激活枯否细胞，进一步分泌大量细胞因子，多种细胞因子共同作用并激活HSC转化成为肌成纤维细胞(Myofibroblasts，MFs)，在快速增殖的同时分泌炎症介质、粘附分子和大量的胶原物质，同时会抑制基质金属蛋白酶(Matrixmetalloproteinase，MMP)的表达，促进金属蛋白酶抑制剂(Tissueinhibitorofmetalloproteinase，TIMP)的分泌，迫使大量的EMC堆积在肝脏中。MFs主要来自活化的HSC，当发生炎症反应或受到机械损伤时，HSC受旁分泌影响迅速发生活化，细胞体积变大，分裂能力和收缩能力增强，释放大量的促炎因子、促纤维化因子和细胞分裂因子，并上调α-SMA的表达，使ECM的分泌量增加。目前，临床上尚无针对肝纤维化的特效药物，大多仅起到辅助治疗作用，长期使用甚至会加重肝脏负担。研究显示，干扰素通过阻止肝细胞变性和程序性死亡来控制肝纤维化，抑制胶原形成，促进胶原降解来阻碍肝纤维化的进展。核苷类似物如拉米夫定、阿德福韦酯等可以通过抑制病毒DNA的复制来降低血清中病毒的载量，从而起到控制致病因素、降低炎症反应和恢复肝脏功能的疗效。但干扰素的治愈率不高，治疗期间副作用较多，长期使用耐药率高且在纤维化后期治疗效果不显著。核苷类似物并不能对肝纤维化有直接的治疗作用。免疫异常是肝病中普遍存在的问题，常使用环孢菌素A、泼尼松、硫唑嘌呤等强免疫抑制剂来缓解过度的炎症反应，但是在用药过程中免疫抑制剂会对肝脏带来沉重的负担，故肝功能不全的患者禁忌使用。绝大多数肝硬化患者的肝功能已经受到严重的损害，加之单独使用免疫抑制剂后治疗效果一般，所以并未广泛使用。临床上常使用抗炎、抗氧化的细胞保护类药物，通过减轻肝脏组织炎症反应，清除肝脏内的活性氧自由基，对抗脂质过氧化、维持肝细胞膜的流动性来保护肝细胞，使其避免受到损伤，如水飞蓟素、马洛替酯等。然而，由于HF发生发展机制涉及多种细胞因子及细胞内信号分子网络，所以抗肝纤维化药物需针对多靶点、多环节、多途径发挥作用，所以基于中草药有效成分开发抗肝纤维化药物具有显著优势。穿心莲内酯是穿心莲Andrographispaniculata(Burm.f.)Nees中提取的二萜内酯类化合物，是中药穿心莲的主要有效成份之一。临床上主要用于治疗上呼吸道感染、细菌性痢疾等。近年来，穿心莲内酯在抗肿瘤、保肝利胆、抗病毒等方面的应用研究不断深入。穿心莲内酯对多种动物实验性肝损伤具有良好的保护作用。姚青等发现穿心莲内酯对可卡因引起的急性肝脏损害有一定的保护作用，其保肝机制可能与抑制脂质过氧化反应，降低组织中氧自由基的生成有关。VisenPK[JEthnopharmacol,1993,40(2),131-136]与HandaS[IndianJMedRes,1990,92:284-292]皆证明穿心莲内酯对扑热息痛诱导的肝损伤具有保护作用，其中HandaS的研究还显示穿心莲内酯对半乳糖胺引起的肝中毒具有保护作用。KapilA[BiochemPharmacol,1993,46(1):182-185]等证明了穿心莲内酯、穿心莲内酯甙和新穿心莲内酯对四氯化碳和叔丁基过氧化氢引起的肝中毒具有保护作用。SinghaP[JEthnopharmacol,2007,111(1):13-21]等的研究显示穿心莲内酯对乙醇引起的小鼠肝肾损伤具有一定的保护作用。RoyDN[ToxicolApplPharmacol,2011；250(1):54-68]等的研究证明穿心莲内酯与D-青霉胺联合治疗铜中毒比单一D-青霉胺在抗纤维化及细胞坏死方面效果更佳。宁光等在其申请的专利(CN201010266185.2)中公开了穿心莲内酯作为制备治疗急性肝损伤药物的应用，穿心莲内酯可以显著抑制刀豆素A诱发的肝损伤，抑制刀豆素A引起的肝细胞的凋亡，抑制肝脏的炎症反应。因此，可以用来治疗刀豆素A诱发的肝损伤。本专利技术人在前期研究中(CN1978437；CN100999520；CN100999535；CN101003527)获得了大量结构新颖的化合物。本专利技术人已对该类化合物在抗肿瘤、抗炎、抗HBV、HCV及急性肝损伤保护作用等应用申请了专利保护，进一步通过对15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物及其3,19酯化物在抗肝纤维化方面进行活性试验研究。目前未见相关文献报道。
技术实现思路
本专利技术人在前期研究成果的基础上，通过对合成的化合物进行抗肝纤维化活性筛选，发现通式1结构的穿心莲内酯衍生物具有显著的预防和治疗肝纤维化作用，高效低毒，具有开发为抗肝纤维化药物的潜力。本专利技术目的在于提供15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物及其3,19酯化物在制备抗肝纤维化药物中的应用。所述穿心莲内酯衍生物及其3,19酯化物具有通式1所示结构。其中：R1、R2分别为氢、甲基或者苯基、吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基等芳香环、杂芳香环和它们的单取代、多取代物中的一种；R1、R2分别为环己基、环戊基等环状取代基团中的一种；R1、R2可以是相同的取代基团或者不同的取代基团。R3、R4分别为氢、3-吡啶基或CH2CH2COOH、CH2CH2CH2CH2COOH、CH2CHCHCH2COOH、CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2COOH等中的一种或COR5，R5为取代或者未取代的苯基，吡啶基、吡咯基、呋喃基等芳香杂环或环己基、环戊基、环丙基、吗啉基、哌啶基等碳环或者杂环结构以及饱和或者不饱和的C1本文档来自技高网...

【技术保护点】
结构如通式1所示的15‑苄亚基‑14‑脱氧‑11,12‑脱氢穿心莲内酯衍生物在制备药物中的应用，其特征在于，将其作为活性成份用于制备抗肝纤维化药物；

【技术特征摘要】
1.结构如通式1所示的15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在制备药物中的应用，其特征在于，将其作为活性成份用于制备抗肝纤维化药物；通式1其中：R1，R2各自为氢或苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，3，5-三甲氧基苯基、2-羟基苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2-溴苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、2-氟-3-甲氧基苯基、3-甲氧基-4-氯苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二溴苯基、2-氟-4-氯苯基、2-溴-4-氯苯基、3-氟-4-氯苯基、3-溴-4-氯苯基、3，4-二氟苯基、3，4-二氯苯基、3，4二溴苯基、2-氯-4-氟苯基、2-溴-4-氟苯基、3-氯-4-氟苯基、3-溴-4-氟苯基、2-氟-4-溴苯基、2-氯-4-溴苯基、3-氟-4-溴苯基、3-氯-4-溴苯基、2，3，4-三氯苯基、2-甲氧基-4-氯苯基、2-羟基-4-氯苯基、2-羟基-4-甲氧基苯基、3-氨基-4-氯苯基、2-氨基-4-氯苯基，2-硝基-4-氟苯基，2-硝基-4-氯苯基，R1，R2相同或不同但不同时为氢；R3、R4各自为氢；或R3、R4分别为3-吡啶基或CH2CH2COOH、CH2CH2CH2CH2COOH、CH2CHCHCH2COOH、CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2COOH中的一种，或者R3、R4各自为COR5，R5为3-吡啶基或CH2CH2COOH、CH2CH2CH2CH2COOH、CH2CHCHCH2COOH、CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2COOH中的一种，R3、R4选相同或不同的取代基团。2.如权利要求1所述的15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在制备药物中的应用，其特征在于，R1，R2各自为氢或苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，3，5-三甲氧基苯基、2-羟基苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2-溴苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、2-氟-3-甲氧基苯基、3-甲氧基-4-氯苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二溴苯基、2-氟-4-氯苯基、2-溴-4-氯苯基、3-氟-4-氯苯基、3-溴-4-氯苯基、3，4-二氟苯基、3，4-二氯苯基、3，4二溴苯基、2-氯-4-氟苯基、2-溴-4-氟苯基、3-氯-4-氟苯基、3-溴-4-氟苯基、2-氟-4-溴苯基、2-氯-4-溴苯基、3-氟-4-溴苯基、3-氯-4-溴苯基、2，3，4-三氯苯基、2-甲氧基-4-氯苯基、2-羟基-4-氯苯基、2-羟基-4-甲氧基苯基、3-氨基-4-氯苯基、2-氨基-4-氯苯基，2-硝基-4-氟苯基，2-硝基-4-氯苯基，但R1，R2不同；R3、R4各自为氢；或R3、R4分别为CH2CH2COOH、CH2CH2CH2CH2COOH、CH2CHCHCH2COOH、CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2COOH中的一种，或者R3、R4各自为COR5，R5为3-吡啶基或CH2CH2COOH，R3、R4选相同取代基团。3.如权利要求1所述的15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在制备药物中的应用，其特征在于，当R1，R2其中之一为氢时，R1，R2其中之一选如下基团：苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2-溴苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、2-氟-3-甲氧基苯基、3-甲氧基-...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴桂馥，杨卫，马翠云，徐海伟，赵进，巫凤娟，王亚可，高小雪，胡洋洋，沈鹏鹏，蒋坤坤，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：河南,41