一种凝胶悬浮缓冲液、由其处理得到的凝胶、检测卡及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种凝胶悬浮缓冲液、由其处理得到的凝胶、检测卡及其应用。所述凝胶悬浮缓冲液包括如下成分：0.7‑0.99g/L咪唑、0.6‑0.9g/LNaCl、0.05‑0.2％Tween 20、0.05‑0.2％Proclin 300和1‑3％葡聚糖。本发明专利技术的凝胶悬浮缓冲液的缓冲作用强，提高了悬浮能力，减缓凝胶的沉降速度，克服灌装难度大的问题，并且本发明专利技术的凝胶悬浮缓冲液具有广谱抗菌活性，且不会影响与酶或抗体的相关反应，成分简单，易于配制，制备血型检测卡时利用该凝胶悬浮缓冲液使凝胶更易悬浮，延长沉降时间，同时真空抽滤排除凝胶中的气泡，易于凝胶灌装，得到凝胶颗粒之间无气泡和异物，提高检测准确度。

Gel suspension buffer, gel obtained by treating the same, detection card and use thereof

The invention provides a gel suspension buffer, a gel obtained by processing the gel suspension, a detection card and an application thereof. The gel suspension buffer comprises the following components: 0.7 0.99g/L, 0.6 0.9g/LNaCl, 0.05 imidazole 0.2%Tween 20, 0.05 0.2%Proclin and 1 300 dextran 3%. Buffer gel suspension buffer of the invention is strong, improve the ability of suspension, the settling velocity of slow gel, overcome the problem of filling difficulty, and gel suspension buffer of the invention have broad-spectrum antibacterial activity, and the related reaction, and will not affect the enzyme or antibody composition is simple, easy preparation, preparation of blood detection when using the gel suspension buffer gel more easily suspended, prolonging settling time and vacuum filtration to exclude bubbles in the gel, easy gel filling, no bubble and foreign body between gel particles to improve the detection accuracy.

【技术实现步骤摘要】
一种凝胶悬浮缓冲液、由其处理得到的凝胶、检测卡及其应用
本专利技术属于医用材料
，涉及一种凝胶悬浮缓冲液、由其处理得到的凝胶、检测卡及其应用。
技术介绍
在临床治疗中，输血是抢救伤病员生命的重要手段和措施。为保证输血的安全，选用可靠的实验方法，采用特异性、灵敏度高的实验技术是非常重要的。血型是人类血液的主要特征之一，表达了血液各种成份抗原的遗传性状，其中ABO血型及RhD血型成为输血和器官移植中重要的血型系统。早在1907年，Hoktoen就首先提出了血型检定对输血治疗的重要性，Ottenberg等在1908年进一步提出了供受体血液交叉配合试验的概念，更强调血型检定对临床输血的深远意义。ABO血型不相容输血，几乎毫无例外要发生溶血性输血反应症状：弥漫性血管内凝血、肾衰以致死亡。因此，ABO血型的准确定型至关重要。2000年卫生部颁发的《临床输血技术规范》(卫医发[2000]184号)第四章第十五条明确规定：“输血科(血库)要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样，复查受血者和供血者ABO血型(正反定型)，并常规检查患者的Rh(D)血型，正确无误时可进行交叉配血。”英国药典中特别强调“检测ABO血型要检测红细胞抗原和血清或血浆中抗体两方面。”1990年，Lapierre发表了微柱凝胶免疫实验技术，这是人类红细胞血型学发展的里程碑。美国输血学会《输血技术手册》第12版(1996年)起就已经将该技术列入红细胞血型检测的常规技术中。如今，在世界先进国家，该新技术正在取代应用多年的血凝试验，应用在红细胞血型血清学临床常规检验工作中。抗人球蛋白试验，又称Coombs’试验，是诊断自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的重要依据。直接试验是检查被检红细胞上有无不完全抗体，间接试验是检查血清中游离的不完全抗体。直接Coombs’试验较间接试验对AIHA更有诊断价值。用特异性单价抗血清可将AIHA分为三型：IgG/C3阳性，占67％；单独IgG性，占20％；单独C3性，占13％；抗人球蛋白检测卡，主要用于血型交叉配血、不规则抗体筛查和不规则抗体鉴定等方面的应用，具体指采用微柱凝胶技术进行直接或间接的抗人球蛋白试验，即Coombs’试验。微柱凝胶技术，是1984年Yveslapierre专利技术的，1988年瑞士达亚美将专利产品推向市场。其原理是基于游离红细胞和聚集红细胞是否通过具有分子筛作用的凝胶颗粒构成的胶体介质，从而使不同状态的红细胞得以分离，是一种在微柱管中用凝胶介质进行的凝集反应。微柱凝胶广谱抗人球蛋白试剂检测卡是微柱凝胶技术和抗人球蛋白试验方法相结合的新型产品，近年得到广泛应用。微柱凝胶技术相对于传统试管法的抗人球蛋白试验，省略了繁琐的洗涤程序和在阴性反应试管中加入IgG类型抗体致敏的红细胞，用于确认阴性反应是否准确可靠的步骤，且微柱凝胶技术使用标本量小，操作简便、人为因素干扰小，易于标准化操作和自动化操作，结果易于判断，便于存放及复查等优点，适于大规模标本的检测。目前国内外已有一些厂家生产各种不同功能的微柱凝胶卡，但存在一些不足：一是凝胶悬浮缓冲液的悬浮性差，在灌装时，凝胶沉降速度快，造成凝胶灌装时难度大，二是凝胶在灌装前，未进行排气泡操作，导致灌卡后成品合格率低。因此，在本领域期望开发一种可以有效解决凝胶灌装时的悬浮性问题以及灌装后出现气泡问题的微柱凝胶检测卡。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种凝胶悬浮缓冲液、由其处理得到的凝胶、检测卡及其应用。为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：一方面，本专利技术提供一种凝胶悬浮缓冲液，所述凝胶悬浮缓冲液包括如下成分：在本专利技术中，通过使用含有如上所述成分的凝胶悬浮缓冲液不仅缓冲作用强，而且更接近人体红细胞的存在环境，且咪唑溶液很稳定，而葡聚糖溶于水后，可提高其悬浮能力，减缓凝胶在其中的沉降速度，钠盐则保证了凝胶悬浮缓冲液的离子强度。采用Proclin300作为防腐剂，具有广谱抗菌活性，能在比较长的时间内抑制细菌、真菌和酵母菌等微生物的生长，同时，它又具有良好的与酶的相容性，不会影响与酶或抗体的相关反应，使用剂量少即可达到抑菌的目的，其使用剂量较低对人畜无害。采用吐温20作为润滑剂，它是非离子表面活性剂，具有乳化、扩散、增溶、稳定等作用，最主要使得红细胞通过凝胶间隙时获得合适的润滑能力，使无凝集的红细胞能完全通过凝胶颗粒间隙，而凝集的红细胞则被凝胶阻隔留在凝胶胶面以上或凝胶胶柱内。在本专利技术中，所述凝胶悬浮缓冲液中咪唑的含量为0.7-0.99g/L，例如0.7g/L、0.73g/L、0.75g/L、0.78g/L、0.8g/L、0.83g/L、0.85g/L、0.88g/L、0.9g/L、0.93g/L、0.95g/L或0.99g/L。在本专利技术中，所述凝胶悬浮缓冲液中NaCl的含量为0.6-0.9g/L，例如0.6g/L、0.63g/L、0.65g/L、0.68g/L、0.7g/L、0.74g/L、0.78g/L、0.8g/L、0.83g/L、0.85g/L、0.88g/L或0.9g/L。在本专利技术中，所述凝胶悬浮缓冲液中Tween20的质量百分含量为0.05-0.2％，例如0.05％、0.08％、0.1％、0.12％、0.14％、0.16％、0.18％或0.2％。在本专利技术中，所述凝胶悬浮缓冲液中Proclin300的质量百分含量为0.05-0.2％，例如0.05％、0.08％、0.1％、0.12％、0.14％、0.16％、0.18％或0.2％。在本专利技术中，所述凝胶悬浮缓冲液中葡聚糖的质量百分含量为1％、1.2％、1.4％、1.6％、1.8％、2％、2.3％、2.5％、2.7％、2.9％或3％。在本专利技术中将如上所述成分溶解在纯化水中得到所述凝胶悬浮缓冲液。优选地，所述凝胶悬浮缓冲液包括如下成分：优选地，所述凝胶悬浮缓冲液的pH为7.2～7.4，例如7.2、7.25、7.3、7.35或7.4。另一方面，本专利技术提供一种由如上所述的凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶。优选地，所述处理的方法为：将聚丙烯酰胺凝胶离心，弃去上清后，使用等体积的纯化水清洗3-5次，除去凝胶破损碎片和聚集的凝胶颗粒以及凝胶中过多的盐离子，然后再使用等量的生理盐水清洗凝胶3次，再使用凝胶悬浮缓冲液清洗至少两次后，弃去上清，得到所述凝胶。本专利技术处理得到的凝胶颗粒大小均匀且完整呈球形，利用所述凝胶悬浮缓冲液清洗后可以减缓凝胶的沉降速度，减少凝胶灌装时的难度，易于灌装。另一方面，本专利技术提供一种检测卡，所述检测卡中包括如上所述的凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶。优选地，所述检测卡为血型检测卡，所述血型检测卡包含六个微管，第一个微管中含有如上所述的凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶和抗A单克隆抗体的工作液，第二个微管中含有如上所述的凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶和抗B单克隆抗体的工作液，第三个微管中含有如上所述的凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶和抗D单克隆抗体的工作液，第四至第六个微管中均为不含任何抗体的中性凝胶。优选地，所述第一个微管中抗A单克隆抗体的工作液与凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶的体积比为2:(2-5)，例如2:2、2:2.3、2:2.5、2:2.8、2:3、2:3.3、2:3.5、2:3.8、2:4本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种凝胶悬浮缓冲液，其特征在于，所述凝胶悬浮缓冲液包括如下成分：

【技术特征摘要】
1.一种凝胶悬浮缓冲液，其特征在于，所述凝胶悬浮缓冲液包括如下成分：2.根据权利要求1所述的凝胶悬浮缓冲液，其特征在于，所述凝胶悬浮缓冲液包括如下成分：3.根据权利要求1或2所述的凝胶悬浮缓冲液，其特征在于，所述凝胶悬浮缓冲液的pH为7.2～7.4。4.根据权利要求1-3中任一项所述的凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶。5.根据权利要求4所述的凝胶，其特征在于，所述处理的方法为：将聚丙烯酰胺凝胶离心，弃去上清后，使用等体积的纯化水清洗3-5次，除去凝胶破损碎片和聚集的凝胶颗粒以及凝胶中过多的盐离子，然后再使用等量的生理盐水清洗凝胶3次，再使用凝胶悬浮缓冲液清洗至少两次后，弃去上清，得到所述凝胶。6.一种检测卡，其特征在于，所述检测卡中包括如权利要求1-3中任一项所述的凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶。7.根据权利要求6所述的检测卡，其特征在于，所述检测卡为血型检测卡，所述血型检测卡包含六个微管，第一个微管中含有所述凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶和抗A单克隆抗体的工作液，第二个微管中含有所述凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶和抗B单克隆抗体的工作液，第三个微管中含有所述凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶和抗D单克隆抗体的工作液，第四至第六个微管中均为不含任何抗体的中性凝胶；优选地，所述第一个微管中抗A单克隆抗体的工作液与凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶的体积比为2:(2-5)，优选2:3；优选地，所述第二个微管中抗B单克隆抗体的工作液与凝胶悬浮缓冲液处理得到的凝胶的体积比为2:(2-5)，优选2:3；优选地，所述第三个微管中抗D单克...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈江莎，魏明明，王占伟，邱笑违，
申请(专利权)人：北京乐普医疗科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：北京,11