一种拉帕替尼中3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯胺含量的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种拉帕替尼中3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯胺含量的测定分析方法，该方法直接用高效液相色谱-质谱联用仪测定拉帕替尼中3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯胺的含量。该分析方法与现有技术相比具有专一性好,重现性好，灵敏度极高，适合做痕量分析等特点。

【技术实现步骤摘要】
一种拉帕替尼中3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯胺含量的测定方法
本专利技术涉及用高效液相色谱-质谱联用仪直接测定出拉帕替尼中3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯胺(以下简称化合物I)的含量。此方法能较好的控制原料药及制剂中痕量化合物I含量，为患者的健康安全用药提供保障，属于医药
技术背景拉帕替尼，化学名Lapatinib。是一种口服的小分子表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂。主要用于联合卡培他滨治疗ErbB-2过度表达的,既往接受过包括蒽环类,紫杉醇,曲妥珠单抗(赫赛汀)治疗的晚期或转移性乳腺癌。拉帕替尼结构如下：拉帕替尼中含有反应残留的化合物I，结构如下：准确定量地测定拉帕替尼中痕量的化合物I含量极具挑战性。很难采用气相、液相色谱等对其进行痕量直接测定。目前，只有测定拉帕替尼中常量3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯胺含量的方法采用经典的色谱法,其专一性、灵敏度、方法精密度和重复性都存在很大的缺陷，不能提供可靠的痕量分析结果。为了克服原方法的缺陷，本专利技术采用高效液相色谱-质谱联用仪直接测定拉帕替尼中化合物I的含量。该分析方法具有操作简单、专一性好、灵敏极高、重现性好等特点。
技术实现思路
如上所述，直接准确定量测定痕量化合物I存在各种缺陷。然而,利用化合物I具有稳定性强和非常适合反相液相色谱分离的特征，以及在质谱检测器中很容易离子化并具有稳定的适合定量分析的分子结构的特点，可以采用高效液相色谱-质谱联用仪直接测定。除此之外,化合物I在质谱检测器有灵敏的吸收这一特征使本方法的灵敏度和专一性大大提高。通过试验发现拉帕替尼在乙腈中有非常好的溶解性。本专利技术将用乙腈作为稀释剂。本专利技术涉及一种拉帕替尼中化合物I含量的测定分析方法，该方法为直接用高效液相色谱-质谱联用仪测定拉帕替尼中化合物I的含量。上述样品配制中用乙腈作为稀释液。上述采用高效液相色谱-质谱联用仪，正离子选择离子模式。该方法包括以下几个步骤：(1)取拉帕替尼原料或制剂粉末，以乙腈溶液作为稀释液制备得到样品溶液；(2)采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相为0.05％-0.2％甲酸或乙酸或三氟乙酸，甲酸铵，乙酸铵水溶液和乙腈，进行梯度洗脱。(3)设置流动相流速为0.3-1.2mL/mL，柱温控制在25℃-40℃之间。(4)取步骤(1)的样品溶液5uL，进样，记录质谱总离子流图。(5)采用质谱检测器，离子模式选择正离子，取(1)的样品溶液进样，记录化合物I质谱离子流图。本专利技术采用的技术方案如下：样品前处理：稀释液：采用色谱级的乙腈：水＝1:1。化合物I标准溶液：用稀释液精密配制12ng/ml的化合物I溶液。样品溶液：精密称取100mg样品于10ml的容量瓶中，用稀释液溶解并定容至刻度，进样。本专利技术使用色谱柱为：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。流速0.3-1.2mL/mL。柱温25℃-40℃。流动相A：0.05％-0.2％甲酸或乙酸或三氟乙酸水溶液，流动相B：乙腈，梯度如下：AB0min90％10％8min10％90％质谱检测器：正离子模式，[M+H]+:252.1附图说明：附图1：根据本专利技术实施例1得到的化合物I质谱棒图；附图2：根据本专利技术实施例1得到的化合物I标准品质谱总离子流图；附图3：根据本专利技术实施例2得到的拉帕替尼样品质谱总离子流图；附图4：根据本专利技术实施例3得到的拉帕替尼样品加样回收率质谱总离子流图。具体实施方式为了更好的理解本专利技术的技术方案，下面结合本专利技术的具体实施例作进一步说明，但其不限制于本专利技术。实施例一仪器与条件：高效液相色谱质谱联用仪：Agilent1260infinity，MS检测器。色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱流动相：A：0.05％-0.2％甲酸或乙酸或三氟乙酸水溶液B:乙腈。等度如下：0～8.0min，有机相比例由10％变为90％。柱温：35℃。流速：1.0mL/min选择正离子：252.1进样体积：5ul。实验步骤：1)流动相A配制：精密量取1.0mL三氟乙酸溶于1000mL水中，混匀。2)稀释液B：乙腈3)标准溶液C：精密称取约30mg化合物I于25ml容量瓶中，加B溶解定容，摇匀，精密量取1.0ml置于另一100ml容量瓶中，加B定容，再精密量取1.0ml置于另一100ml容量瓶中得到储备溶液C,，再从储备溶液C中移取1mL到10ml容量瓶中，加B定容，即得标准溶液D，进样，记录质谱棒图，见典型图1。记录化合物I质谱总离子流图，见典型图2。实施例二仪器与条件：高效液相色谱仪：Agilent1260infinity，MS检测器。色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱流动相：A：0.05％-0.2％甲酸或乙酸或三氟乙酸水溶液B:乙腈。等度如下：0～8.0min，有机相比例由10％变为90％。柱温：35℃。流速：1.0mL/min选择正离子：252.1进样体积：5ul。实验步骤：1)流动相A配制：精密量取1.0mL三氟乙酸溶于1000mL水中，混匀。2)稀释液B：乙腈3)标准溶液C：精密称取约28.5mg化合物I于100ml容量瓶中，加B溶解定容，摇匀，精密量取2.0ml置于另一100ml容量瓶中，加B定容，即得标准溶液C。4)样品溶液D:精密称取约30mg拉帕替尼样品置于10ml容量瓶中，加B定容，即得样品溶液D，进样。记录化合物I质谱总离子流图，见典型图3。实施例三仪器与条件：高效液相色谱仪：Agilent1260infinity，MS检测器。色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱流动相：A：0.05％-0.2％甲酸或乙酸或三氟乙酸水溶液B:乙腈。等度如下：0～8.0min，有机相比例由10％变为90％。柱温：35℃。流速：1.0mL/min选择正离子：252.1进样体积：5ul。实验步骤：1)流动相A配制：精密量取1.0mL三氟乙酸溶于1000mL水中，混匀。2)稀释液B：乙腈3)标准溶液C：精密称取约28.5mg化合物I于100ml容量瓶中，加B溶解定容，摇匀，精密量取2.0ml置于另一100ml容量瓶中，加B定容，即得标准溶液C。4)样品溶液E:精密称取约30.0mg拉帕替尼样品，用标准溶液C溶解并滴定至刻度，混匀，进样。记录化合物I质谱总离子流图，见典型图4。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种拉帕替尼中疑似基因毒性杂质3‑氯‑4‑(3‑氟苄氧基)苯胺(以下简称化合物I)含量的测定分析方法，其特征在于直接用高效液相色谱‑质谱联用仪测定拉帕替尼中痕量的化合物I的含量。

【技术特征摘要】
1.一种拉帕替尼中疑似基因毒性杂质3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯胺(以下简称化合物I)含量的测定分析方法，其特征在于直接用高效液相色谱-质谱联用仪测定拉帕替尼中痕量的化合物I的含量。2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于采用高效液相色谱-质谱联用仪，离子模式选择正离子。3.根据权利要求1所述，其特征在于该方法包括以下几个步骤：(1)取拉帕替尼原料或制剂粉末，以乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：苟新春，顾虹，安建国，邱学艳，胡素招，
申请(专利权)人：上海奥博生物医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31