一种治疗腰膝酸痛、坐骨神经痛的中药组合物的检测方法技术

本发明专利技术提供一种治疗腰膝酸痛、坐骨神经痛的中药组合物的检测方法，所述中药组合物的原料包括狗脊、金樱子、鸡血藤、千斤拔、黑老虎、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香和没药；所述检测方法包括采用高效液相色谱法测定黑老虎中(2′S)-南五味子木质素J的含量；还可以包括高效液相色谱法测定女贞子中特女贞苷的含量，采用薄层色谱法检测黑老虎、狗脊和桑寄生。本发明专利技术还具体公开各个检测方法的条件和具体操作步骤。本发明专利技术提供的检测方法定性、定量检测的原料药总数达到5种，占原料药总数的三分之一，从而更有效地保证药品质量，满足医疗需求。

The detection method of a traditional Chinese medicine composition for treating waist and knee pain, sciatica.

The present invention provides a method for detecting a traditional Chinese medicine composition for treating waist and knee pain, sciatica, the traditional Chinese medicine composition of raw materials including Rhizoma cibotii, Caulis Spatholobi, Rosa, waras, black tiger, cattle vigorously, Ligustrum lucidum, Loranthaceae, dodder, Rhizoma Corydalis, Radix zanthoxyli, frankincense and myrrh; the detection method includes high performance HPLC method for the determination of the black tiger (2 'S) - content of Schisandra lignin J; content can also include the specnuezhenide high performance liquid chromatography in the determination of Ligustrum lucidum, black tiger, and was detected by TLC. The invention also discloses the conditions and the specific operation steps of each detecting method. The detection method provided by the invention has the total quantity of raw material medicine which is qualitatively and quantitatively detected to reach 5 kinds, accounting for 1/3 of the total amount of the raw material medicine, thereby effectively ensuring the quality of the medicine and satisfying the medical demand.

【技术实现步骤摘要】
一种治疗腰膝酸痛、坐骨神经痛的中药组合物的检测方法
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种治疗腰膝酸痛、坐骨神经痛的中药组合物的检测方法，所述的中药组合物是舒筋健腰丸。
技术介绍
舒筋健腰丸收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第十二册，标准号为WS3-B-2441-97。舒筋健腰丸由狗脊、金樱子、鸡血藤、千斤拔、黑老虎、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香、没药等十三味药制成，具有补益肝肾，强健筋骨，驱风除湿，活络止痛的作用，用于治疗腰膝酸痛、坐骨神经痛。在现行药品标准中，对本品进行了显微鉴别，理化鉴别以及狗脊和没药的薄层色谱鉴别。其中理化鉴别采用生物碱沉淀反应，只能说明制剂中含有生物碱这一类成分，没有专属性。狗脊的薄层鉴别色谱特征图谱分离不好，特征点不清晰。本品种现行标准没有指标成分的含量测定。因此，有必要制定出更有针对性、更能反映舒筋健腰丸质量的检测方法，从而提升其质量标准，更好地保障患者用药安全。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术的一个目的在于提供一种舒筋健腰丸的检测方法。该检测方法包括了对黑老虎中(2′S)-南五味子木质素J(C27H34O8)的含量测定和女贞子中特女贞苷(C31H42O17)的含量测定，还包括狗脊、黑老虎和桑寄生的薄层色谱鉴别。相较现行的质量标准，本专利技术提供的检测方法对药品特征成分的监测更全面：现有技术中的质量标准仅有没药和狗脊两味药的薄层鉴别，本专利技术的检测方法不仅优化了狗脊薄层色谱鉴别方法，而且增加了定量检测黑老虎和女贞子的特征成分，以及定性鉴别黑老虎、桑寄生的方法，从而对原料药的检测数量达到了5味。本专利技术的检测方法专属性强，重现性良好，有利于实现对舒筋健腰丸成品质量的有效控制。为了实现上述专利技术目的，本专利技术采用了如下的技术方案。一种治疗腰膝酸痛、坐骨神经痛的中药组合物的检测方法，所述中药组合物的原料包括狗脊、金樱子、鸡血藤、千斤拔、黑老虎、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香和没药；所述检测方法包括采用高效液相色谱法测定黑老虎中(2′S)-南五味子木质素J的含量。优选的，所述高效液相色谱法测定黑老虎中(2′S)-南五味子木质素J的含量的色谱条件如下：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；柱温：30℃；检测波长：214nm；流动相：体积比为60～80:20～40的乙腈-水，或体积比为60～90:10～40的甲醇-水；更优选为体积比为70:30的乙腈-水；流速：1ml/min；理论板数按(2′S)-南五味子木质素J峰计算应不低于2500。上述高效液相色谱法测定黑老虎中(2′S)-南五味子木质素J的含量的具体操作步骤为：1)对照品溶液的制备：取(2′S)-南五味子木质素J对照品，精密称定，加乙醇制成每1ml含(2′S)-南五味子木质素J6～30μg的溶液，即得；2)供试品溶液的制备：取所述中药组合物，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入95％乙醇50ml，称定重量，功率250W、频率40kHz超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用95％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。优选的，上述检测方法还可以包括高效液相色谱法测定女贞子中特女贞苷的含量。优选的，所述高效液相色谱法测定女贞子中特女贞苷的色谱条件如下：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；柱温：30℃；检测波长：224nm；流动相：体积比为10～30:90～70的乙腈-水，或体积比为20～45:80～55的甲醇-水；更优选为体积比为17:83的乙腈-水；理论板数按特女贞苷峰计算应不低于2500。上述高效液相色谱法测定女贞子中特女贞苷的含量的具体操作步骤为：1)对照品溶液的制备：取特女贞苷对照品，精密称定，加体积百分比浓度为80％的甲醇水溶液制成每1ml含20～80μg的溶液，即得；2)供试品溶液的制备：取所述中药组合物，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积百分比浓度为80％的甲醇水溶液50ml，称定重量，超声处理(功率250W、频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用体积百分比浓度为80％的甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过；取续滤液20ml，蒸干，残渣用体积百分比浓度为80％的甲醇水溶液5ml使溶解，加在中性氧化铝柱上，用80％甲醇50～100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加体积百分比浓度为80％的甲醇水溶液使溶解并定容至10ml，滤过，取续滤液，即得；其中所述中性氧化铝柱内径1.5cm，内装5g100～200目中性氧化铝；3)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。上述高效液相色谱法测定女贞子中特女贞苷的含量的操作步骤中，所述供试品溶液还可以通过如下方法制备：取所述中药组合物，研细，取2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积百分比浓度为70％的甲醇水溶液50ml，密塞，称定重量，功率250W、频率40kHz超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用体积百分比浓度为70％的甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液20ml，置蒸发皿中，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，与3g100～200目硅胶搅拌均匀，蒸干，干法上硅胶柱(柱层析用，100～200目,5g)，先用1,2-二氯乙烷50ml洗脱，弃去洗脱液，继用体积比为3:1的1，2-二氯乙烷-甲醇混合溶剂80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用体积百分比浓度为70％的甲醇水溶液溶解并定容至5ml，即得。优选的，上述检测方法还可以包括薄层色谱法检测黑老虎。优选的，所述薄层色谱法检测黑老虎的色谱条件如下：采用硅胶G薄层板，以体积比为5:1:0.2的甲苯-丙酮-甲酸混合溶剂为展开剂，预饱和10分钟；以10％硫酸乙醇溶液为显色剂，紫外光灯365nm下检视。优选的，上述薄层色谱法检测黑老虎的操作步骤为：1)供试品溶液制备：取所述中药组合物4g，研细，置具塞锥形瓶中，加水10ml润湿，再加醋酸乙酯50ml，超声处理30分钟，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，即得；2)对照药材溶液的制备：取黑老虎对照药材2g，粉碎，置具塞锥形瓶中，加水10ml润湿，再加醋酸乙酯50ml，超声处理30分钟，冷却，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，即得；3)检测：吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5:1:0.2的甲苯-丙酮-甲酸为展开剂，预饱和10分钟，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，是否在与黑老虎对照药材色谱相应的位置上，显相同的墨绿色斑点。优选的，上述检测方法还可以包括薄层色谱法检测狗脊。优选的，所述薄层色谱法检测狗脊的色谱条件如下：采用硅胶G薄层板，以体积比为5:1:0.2的甲苯-丙酮-甲酸混合溶剂为展开剂，紫外光灯365nm下检视。上述薄层色谱法检测狗脊的操作步骤为：1)供试品溶液制备：取所述中药组合物3.5g，研细，加入盐酸乙醇溶液50ml，超声30分钟，滤液蒸干，用5ml甲醇超声使溶解，过滤，取续滤液，即得；其中，所述盐酸乙醇溶液的配制方法为：取1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗腰膝酸痛、坐骨神经痛的中药组合物的检测方法，所述中药组合物的原料包括狗脊、金樱子、鸡血藤、千斤拔、黑老虎、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香和没药；所述检测方法包括采用高效液相色谱法测定黑老虎中(2′S)‑南五味子木质素J的含量；优选的，所述高效液相色谱法测定黑老虎中(2′S)‑南五味子木质素J的含量的色谱条件如下：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；柱温：30℃；检测波长：214nm；流动相：体积比为60～80:20～40的乙腈‑水，或体积比为60～90:10～40的甲醇‑水；流速：1ml/min；理论板数按(2′S)‑南五味子木质素J峰计算应不低于2500。

【技术特征摘要】
1.一种治疗腰膝酸痛、坐骨神经痛的中药组合物的检测方法，所述中药组合物的原料包括狗脊、金樱子、鸡血藤、千斤拔、黑老虎、牛大力、女贞子、桑寄生、菟丝子、延胡索、两面针、乳香和没药；所述检测方法包括采用高效液相色谱法测定黑老虎中(2′S)-南五味子木质素J的含量；优选的，所述高效液相色谱法测定黑老虎中(2′S)-南五味子木质素J的含量的色谱条件如下：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；柱温：30℃；检测波长：214nm；流动相：体积比为60～80:20～40的乙腈-水，或体积比为60～90:10～40的甲醇-水；流速：1ml/min；理论板数按(2′S)-南五味子木质素J峰计算应不低于2500。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述流动相为体积比为70:30的乙腈-水。3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于：所述高效液相色谱法测定黑老虎中(2′S)-南五味子木质素J的含量的具体操作步骤为：1)对照品溶液的制备：取(2′S)-南五味子木质素J对照品，精密称定，加乙醇制成每1ml含(2′S)-南五味子木质素J6～30μg的溶液，即得；2)供试品溶液的制备：取所述中药组合物，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入95％乙醇50ml，称定重量，功率250W、频率40kHz超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用95％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；3)测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。4.根据权利要求1至3中任一项所述的检测方法，其特征在于：所述检测方法还包括高效液相色谱法测定女贞子中特女贞苷的含量；优选的，所述高效液相色谱法测定女贞子中特女贞苷的含量的色谱条件如下：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；柱温：30℃；检测波长：224nm；流动相：体积比为10～30:90～70的乙腈-水，或体积比为20～45:80～55的甲醇-水；理论板数按特女贞苷峰计算应不低于2500。5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：所述流动相为体积比为17:83的乙腈-水。6.根据权利要求4或5所述的检测方法，其特征在于：所述高效液相色谱法测定女贞子中特女贞苷的含量的具体操作步骤为：1)对照品溶液的制备：取特女贞苷对照品，精密称定，加体积百分比浓度为80％的甲醇水溶液制成每1ml含20～80μg的溶液，即得；2)供试品溶液的制备：取所述中药组合物，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积百分比浓度为80％的甲醇水溶液50ml，称定重量，功率250W、频率40kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用体积百分比浓度为80％的甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过；取续滤液20ml，蒸干，残渣用体积百分比浓度为80％的甲醇水溶液5ml使溶解，加在中性氧化铝柱上，用80％甲醇50～100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加体积百分比浓度为80％的甲醇水溶液使溶解并定容至10ml，滤过，取续滤液，即得；其中所述中性氧化铝柱内径1.5cm，内装5g100～200目中性氧化铝；3)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于：所述供试品溶液的制备方法为：取所述中药组合物，研细，取2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积百分比浓度为70％的甲醇水溶液50ml，密塞，称定重量，功率250W、频率40kHz超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用体积百分比浓度为70％的甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液20ml，置蒸发皿中，水浴蒸干，残渣用甲醇溶解，与3g100～200目硅胶搅拌均匀，蒸干，干法上硅胶柱(柱层析用，100～200目,5g)，先用1,2-...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨能英，何风雷，彭富全，陈明权，
申请(专利权)人：广州白云山陈李济药厂有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44