一种抗CTLA‑4单克隆抗体制剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抗CTLA‑4单克隆抗体制剂及其应用。本发明专利技术公开一种抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的组合物，该组合物由溶质和溶剂组成，所述溶质含有抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体、缓冲剂、渗透压调节剂和螯合剂，所述溶剂为水。与现有的抗CTLA‑4单克隆抗体制剂相比，本发明专利技术所提供的抗CTLA‑4单克隆抗体制剂的稳定性高，可以增加其临床应用的安全性。

A anti CTLA 4 monoclonal antibody preparation and its application

The invention discloses a anti CTLA 4 monoclonal antibody preparation and its application. Compositions of the present invention discloses an anti cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4, the composition consists of solute and solvent, the solute containing anti cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4 monoclonal antibody, buffer, osmotic pressure regulator and a chelating agent, the solvent is water. Compared with the existing anti CTLA 4 monoclonal antibody preparation, the stability provided by the invention of anti CTLA 4 monoclonal antibody preparation high, can increase the safety of its clinical application.

【技术实现步骤摘要】
一种抗CTLA-4单克隆抗体制剂及其应用
本专利技术属于生物制药领域，涉及一种抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)单克隆抗体制剂及其应用。
技术介绍
CTLA-4与CD28分子在基因结构、染色体定位、序列的同源性及基因表达上具有十分相近的关系，都是共刺激分子B7的受体，主要表达于被激活的T细胞表面。但是作为淋巴细胞激活的共刺激信号，CTLA-4与CD28分子的功能是相反的，在正常情况下，T细胞的激活依赖于第一信号(抗原抗体复合物的形成)和第二信号(B7介导的活化信号)双活化。而CTLA-4与B7结合将产生抑制性信号并抑制T细胞活化。作为CTLA-4阻断剂的单克隆抗体(CTLA-4mAb)，可以特异地解除CTLA-4对机体的免疫抑制，激活T细胞，在抗肿瘤及寄生虫等疾病的基因治疗中有广泛的应用前景。IBI310(伊匹单抗仿制药)就是根据以上机理设计研发的大分子单抗药物。它是一种重组全人源抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体，是上市药物YERVOY(ipilimumab)的仿制药，其给药途径设计为静脉滴注，剂量预计为3mg/kg。伊匹单抗(ipilimumab)的制剂组分包括：DTPA(二乙基三胺五乙酸)、甘露醇、氯化钠、Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷盐酸盐)、PS80(聚山梨酯80)，pH值为7.0。该制剂化学稳定性不高，产品容易发生化学降解反应。这些变化可能会对最终产品的安全性和有效性产生影响。因此，建立一个合适的制剂处方以保障产品的稳定性和安全性非常重要。IBI310作为伊匹单抗的仿制药，由于其结构的复杂性，在非优化制剂中蛋白容易发生聚集且电荷变异体易于从碱性组分转化为酸性组分。单克隆抗体由于具有特异性强、半衰期长的优点,在药物蛋白开发中逐渐受到重视。目前,单克隆抗体药物是通过发酵生产的,主要在CHO细胞表达,在细胞培养、纯化、制剂工艺及储存过程中会发生糖基化、氧化、脱氨基以及聚集、降解、异构化,这些过程几乎都会造成单克隆抗体的表面电荷的不均一性。单克隆抗体表面电荷的不均一性的变化会影响单克隆抗体的空间构象甚至造成生物活性的变化以及容易发生自我聚集。这些不利因素在将这类药物制成稳定、安全、有效的制剂方面提出了巨大挑战。提高抗CTLA-4单克隆抗体制剂的物理化学稳定性，使电荷异构体的生成速率减慢，提高产品的质量均一性和一致性，延长产品的货架期，提高其临床使用稳定性是亟待解决的问题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提高抗CTLA-4单克隆抗体制剂的稳定性。为了解决以上技术问题，本专利技术提供一种抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的组合物，该组合物由溶质和溶剂组成，所述溶质含有抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体、缓冲剂、渗透压调节剂和螯合剂，所述溶剂为水，所述组合物的pH为6.0～6.5；所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体在所述组合物中的浓度为2.5～7.5mg/ml，优选为5.0mg/ml；所述缓冲剂在所述组合物中的浓度为4.84～9.68mg/ml，优选为5.88mg/ml；所述渗透压调节剂在所述组合物中的浓度为2.93～8.78mg/ml，优选为5.85mg/ml；所述螯合剂在所述组合物中的浓度为0.02～0.06mg/ml，优选为0.04mg/ml。上述组合物中，所述缓冲剂为枸橼酸钠或三羟甲基氨基甲烷；所述渗透压调节剂为氯化钠；所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠。上述任一所述的组合物中，所述组合物还包含蛋白保护剂；所述蛋白保护剂在所述组合物中的浓度为5～15mg/ml。上述组合物中，所述蛋白保护剂为甘露醇和/或精氨酸；优选地，所述蛋白保护剂为甘露醇和精氨酸，甘露醇在所述组合物中的浓度为10.02mg/ml，精氨酸在所述组合物中的浓度为4.36mg/ml。上述任一所述的组合物中，所述组合物还包含非离子型表面活性剂；所述非离子型表面活性剂在所述组合物中的浓度为0.5-0.9mg/ml，优选为0.7mg/ml。上述组合物中，所述非离子型表面活性剂为聚山梨酯80和/或聚山梨酯20。上述组合物中，所述溶质由所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体、所述缓冲剂、所述渗透压调节剂、所述螯合剂，所述蛋白保护剂和所述非离子型表面活性剂组成；所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体在所述组合物中的浓度为2.5～7.5mg/ml，优选为5.0mg/ml；所述缓冲剂在所述组合物中的浓度为4.84～9.68mg/ml，优选为5.88mg/ml；所述渗透压调节剂在所述组合物中的浓度为2.93～8.78mg/ml，优选为5.85mg/ml；所述螯合剂在所述组合物中的浓度为0.02～0.06mg/ml，优选为0.04mg/ml；所述蛋白保护剂在所述组合物中的浓度为5～15mg/ml；所述非离子型表面活性剂在所述组合物中的浓度为0.5-0.9mg/ml，优选为0.7mg/ml；优选地，所述溶质由所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体、所述缓冲剂、所述渗透压调节剂、所述螯合剂、所述蛋白保护剂和所述非离子型表面活性剂组成；其中所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体在所述组合物中的浓度为5.0mg/ml，所述缓冲剂在所述组合物中的浓度为5.88mg/ml，所述渗透压调节剂在所述组合物中的浓度为5.85mg/ml，所述螯合剂在所述组合物中的浓度为0.04mg/ml，所述非离子型表面活性剂在所述组合物中的浓度为0.7mg/ml；所述缓冲剂优选为枸橼酸钠或三羟甲基氨基甲烷；所述渗透压调节剂优选为氯化钠；所述螯合剂优选为乙二胺四乙酸二钠；所述蛋白保护剂优选为甘露醇和/或精氨酸，更优选地，所述蛋白保护剂为甘露醇和精氨酸，甘露醇在所述组合物中的浓度为10.02mg/ml，精氨酸在所述组合物中的浓度为4.36mg/ml；所述非离子型表面活性剂优选为聚山梨酯80和/或聚山梨酯20。上述任一所述的组合物中，所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体由2条轻链和2条重链组成，一条轻链和一条重链之间均通过二硫键连接，重链和重链之间通过二硫键连接；轻链可变区的CDR1、CDR2、CDR3序列分别如SEQIDNo.1的第46位至第57位、第73位至第79位、第112位至第120位所示，重链可变区的CDR1、CDR2、CDR3分别如SEQIDNo.2的第45位至第51位、第70位至第76位、第118位至第126位所示；所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列优选如SEQIDNo.1的第23位至第130位所示，重链可变区的氨基酸序列优选如SEQIDNo.2的第20位至第137位所示；所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体(IBI310)轻链的氨基酸序列如SEQIDNo.1所示，重链的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。为解决以上技术问题，本专利技术还提供一种制备如上任一项所述的组合物的方法，在配制所述组合物时，在所述溶剂中加入其余溶质后再加入所述非离子型表面活性剂，最后再进行定容。为解决以上技术问题，本专利技术还提供上述任一项所述的组合物在制备如下(1)-(6)任一所示的产品中的应用：(1)抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的产品；(2)解除细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的组合物，该组合物由溶质和溶剂组成，所述溶质含有抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体、缓冲剂、渗透压调节剂和螯合剂，所述溶剂为水；所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体在所述组合物中的浓度为2.5～7.5mg/ml，优选为5.0mg/ml；所述缓冲剂在所述组合物中的浓度为4.84～9.68mg/ml，优选为5.88mg/ml；所述渗透压调节剂在所述组合物中的浓度为2.93～8.78mg/ml，优选为5.85mg/ml；所述螯合剂在所述组合物中的浓度为0.02～0.06mg/ml，优选为0.04mg/ml。

【技术特征摘要】
1.一种抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的组合物，该组合物由溶质和溶剂组成，所述溶质含有抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体、缓冲剂、渗透压调节剂和螯合剂，所述溶剂为水；所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体在所述组合物中的浓度为2.5～7.5mg/ml，优选为5.0mg/ml；所述缓冲剂在所述组合物中的浓度为4.84～9.68mg/ml，优选为5.88mg/ml；所述渗透压调节剂在所述组合物中的浓度为2.93～8.78mg/ml，优选为5.85mg/ml；所述螯合剂在所述组合物中的浓度为0.02～0.06mg/ml，优选为0.04mg/ml。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述缓冲剂为枸橼酸钠或三羟甲基氨基甲烷；所述渗透压调节剂为氯化钠；所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于：所述组合物还包含蛋白保护剂；所述蛋白保护剂在所述组合物中的浓度为5～15mg/ml。4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于：所述蛋白保护剂为甘露醇和/或精氨酸；优选地，所述蛋白保护剂为甘露醇和精氨酸，甘露醇在所述组合物中的浓度为10.02mg/ml，精氨酸在所述组合物中的浓度为4.36mg/ml。5.根据权利要求1-4任一项所述的组合物，其特征在于：所述组合物还包含非离子型表面活性剂；所述非离子型表面活性剂在所述组合物中的浓度为0.5-0.9mg/ml，优选为0.7mg/ml。6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于：所述非离子型表面活性剂为聚山梨酯80和/或聚山梨酯20。7.根据权利要求5或6所述的组合物，其特征在于：所述溶质由所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体、所述缓冲剂、所述渗透压调节剂、所述螯合剂、所述蛋白保护剂和所述非离子型表面活性剂组成；所述抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的单克隆抗体在所述组合物中的浓度为2.5～7.5mg/ml，优选为5.0mg/ml；所述缓冲剂在所述组合物中的浓度为4.84～9.68mg/ml，优选为5.88mg/ml；所述渗透压调节剂在所述组合物中的浓度为2.93～8.78mg/ml，优选为5.85mg/ml；所述螯合剂在所述组合物中的浓度为0.0...

【专利技术属性】
技术研发人员：李俊峰，刘晓林，曹魏，
申请(专利权)人：信达生物制药苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32