青口贝水提物在具有抗氧化和神经保护作用的保健食品中的应用制造技术

本发明专利技术属于海洋生物技术领域，具体涉及一种青口贝提取物及其制备方法与应用。本发明专利技术所述青口贝提取物的制备方法为青口贝去壳取肉加水进行组织匀浆，匀浆液离心取上清，过滤收集滤液。本发明专利技术提供的制备方法，能够充分利用青口贝丰富资源得到具有抗衰老和神经保护作用的青口贝提取物。实验结果表明本发明专利技术所述制备方法制得的青口贝提取物均具有很好的抗衰老和神经保护作用，可以用于制备成抗衰老和神经保护作用的药物或者抗衰老和神经保护作用的保健品，应用范围广泛，具有良好的经济和社会效应。

Application of Qingkou shellfish water extract in antioxidant and neuroprotective foods

The invention belongs to the field of marine biotechnology, in particular to a Qingkou shellfish extract, a preparation method and an application thereof. The preparation method of the Qingkou shellfish extract of the invention is that the shell of Qingkou shellfish is removed, the meat is taken, the water is added, the tissue homogenate is taken, the supernatant is centrifuged in a homogenized liquid, and the filtrate is collected by filtration. The preparation method of the invention can fully utilize the abundant resources of Qingkou shellfish and obtain the Qingkou shellfish extract with anti-aging and neuroprotective effect. The experimental results show that the system of Qingkou Bay extract prepared prepared has good anti-aging and neuroprotective effect, can be used for preparing drugs and health products anti-aging and neuroprotection or anti-aging and neuroprotective effect, wide application range and has good economic and social effect.

【技术实现步骤摘要】
青口贝水提物在具有抗氧化和神经保护作用的保健食品中的应用
本专利技术属于海洋生物
，具体涉及一种青口贝提取物及其制备方法与应用。
技术介绍
随着全球人口老龄化趋势的加剧，以特定神经细胞和组织逐渐衰退乃至死亡为主要特征的神经退行性疾病已经成为严重危害人类生命健康和生活质量的重大疾病，并引起国际生物医药领域的关注。由于神经退行性疾病具有复杂的病理过程，受氧化应激和蛋白质异常聚集等多种因素的影响，因此当机体处于氧化胁迫环境时，其内源性活性氧聚集增加，使得胞内抗氧化代谢失衡，抗氧化酶的活性降低，同时损伤脂质、蛋白质和DNA等生物大分子物质，造成细胞内酶活性变化、代谢紊乱、DNA损伤和细胞凋亡。此外，蛋白质异常聚集形成的产物也会诱发氧化、炎症等多种胁迫反应，由此导致慢性、持续性神经元的损伤、坏死并导致神经退行性病变。因此，通过抑制活性氧的产生和疾病蛋白质的异常聚集是研究神经保护作用的重要策略。传统医学对延年益寿和神经保护有悠久的研究历史，而丰富的海洋生物资源种类则为之提供了庞大的资源库。自20世纪70年代以来，人们已经从海洋生物中分离出数万种新型化合物，包括肽类、蛋白质类、多糖类、生物碱类、萜类、大环聚酯类等类型。其中，肽类是海洋生物活性物质中数量最庞大的一类化合物，达数万种之多，包括海洋肽类毒素与海洋生物活性肽等。多肽类药物具有分子量小、无免疫原性、结构简单、副作用小、活性高等优点。此外，由于海洋生物生存的特定环境，海洋生物多肽的结构与陆生动植物肽(糖肽)有很大不同，多为小分子环肽，含有丰富的D型氨基酸、羟基酸、噻酚、恶唑环，有的还含有烯键与炔键，这大大提高了肽的生物稳定性及生物利用度。研究证实生物活性肽具有多种药理活性，可用于预防和延缓衰老及衰老相关的多种疾病。因此，发掘海洋生物资源中具有抗氧化、延缓衰老、神经保护作用的活性成分有助于促进我国海洋资源的综合开发与利用。青口贝，属双壳类软体动物，中国北方俗称为海虹，南方俗称为青口。青口贝肉的干制品称作淡菜，是驰名中外的海产食品之一，具有较高的经济和药食价值，其蛋白质含量高达59％，含8种人体必需的氨基酸，营养价值高于一般贝、鱼、虾、肉类等，具有补肝益肾、调经活血的功效。明代医家倪朱谟对其功效赞叹“淡菜，补虚养肾之药也”，是一味补肾填精的药食两用之物；《本草拾遗》记载道：“主虚羸劳损，因产瘦瘠，血气结积，腹冷、肠鸣、下痢，腰疼、带下、疝瘕”。现代医学研究表明，贻贝多肽具有降血压、增强免疫、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等方面的功效。公开号为CN102952838A、专利技术名称为“一种免疫增强贻贝酶解多肽的制备方法及其相应片剂的制备方法”的中国专利公开了利用碱性蛋白酶和中性蛋白酶分别水解贻贝蛋白后，经脱盐、浓缩和喷雾干燥得免疫增强贻贝酶解多肽，制得的片剂用作老年人和体弱多病者的日常保健产品。公开号为CN103710414A、专利技术名称为“贻贝寡肽的制备方法及其应用”的中国专利公开了利用碱性冷提法提取贻贝蛋白，经复合酶解和超滤后的贻贝寡肽，并以小鼠和果蝇模型验证其抗氧化和延衰的功效，应用于制备抗氧化活性和延缓衰老作用的食品。然而碱性冷提法条件不够温和，会破坏蛋白的风味和色泽，同时可能造成环境污染。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种具有抗氧化和神经保护作用的青口贝提取物及其制备方法与应用。为实现本专利技术的目的，本专利技术采用如下技术方案。一种青口贝提取物的制备方法，青口贝去壳取肉加水进行组织匀浆，匀浆液离心取上清，过滤收集滤液。其中，所述水的加入量为青口贝肉的3倍～10倍。在一些实施方案中，本专利技术所述青口贝提取物的制备方法中所述离心为5000g～15000g。在一些实施方案中，本专利技术所述青口贝提取物的制备方法中所述离心时间为10min～50min。在一些实施方案中，本专利技术所述青口贝提取物的制备方法中所述过滤为0.45μm孔径的滤膜过滤。在一些优选实施方案中，所述滤膜为硝酸纤维素膜或尼龙膜。进一步的，在一些实施方案中，本专利技术所述青口贝提取物的制备方法还包括对滤液进行浓缩、干燥的步骤。优选的，所述干燥为冷冻干燥。本专利技术还提供了上述制备方法制得的青口贝提取物。自由基是机体氧化反应中产生的有害化合物，具有强氧化性，可损害机体的组织和细胞，进而引起慢性疾病及衰老效应。因此，通过测定对自由基的清除率，可以反映以清除活性氧自由基为主的抗氧化能力。本专利技术所述青口贝提取物加入DPPH溶液，于520nm波长下测定吸光度，以加入等体积水开始计时，于520nm波长下测定空白吸光度，计算DPPH自由基清除率。结果显示本专利技术所述青口贝提取物，能够显著地清除体外DPPH自由基，且呈现出剂量依赖性的作用效果。百草枯是一类电子受体，作用于细胞的氧化还原反应，在细胞内活化为氧自由基是毒作用的基础，所形成的过量超氧化阴离子自由基及过氧化氢(H2O2)等可引起多组织器官细胞膜脂质过氧化，从而造成多系统组织器官的损害。因此，抑制其对细胞的氧化损伤能够有效缓解神经毒性。本专利技术所述青口贝提取物分别加入到成虫初期的野生型秀丽线虫中培养，加入百草枯对秀丽线虫进行氧化胁迫造模，定时统计秀丽线虫存活的比率，检测所述文蛤多肽对百草枯诱导的氧化胁迫的影响，结果显示本专利技术所述青口贝提取物可以显著延长秀丽线虫的氧化胁迫存活率，提高秀丽线虫耐氧化胁迫条件的能力，缓解机体因氧化胁迫而产生早衰的问题。在秀丽线虫体内，几乎所有与长寿相关的基因表达都与抵抗环境胁迫有关，例如氧化、缺氧、热激、UV辐射和重金属等胁迫条件。除抗氧化胁迫以外，对机体抗热激胁迫的能力也指示着延缓衰老的作用。本专利技术将所述青口贝提取物加入到L1期的野生型秀丽线虫幼虫中培养后进行反复热激培养直到所有秀丽线虫死亡，检测所述青口贝提取物对热激胁迫的影响。结果显示，本专利技术所述青口贝提取物能够延长秀丽线虫在热激胁迫条件下的生存时间，提高存活率，具有抗热激胁迫活性，缓解由热激胁迫造成的细胞损伤。本专利技术将所述青口贝提取物加入到成虫初期的野生型秀丽线虫中培养后定时统计秀丽线虫的存活情况，检测所述青口贝提取物对秀丽线虫寿命的影响。结果显示，本专利技术所述青口贝提取物能够延长秀丽线虫在自然条件下的存活时间，具有延缓衰老进程的作用。转基因秀丽线虫HA759可以在ASH神经元中表达polyQ蛋白。由于polyQ蛋白是亨廷顿疾病中的关键致病蛋白，抑制其聚集可有效缓解神经毒性。本专利技术将所述青口贝提取物加入L1期的转基因秀丽线虫HA759幼虫中，置于16℃培养36h后，于23℃再次培养36h后收集线虫备用。将趋化板中间用30μL8M甘油划一条直线，将平板分为A和B区。A区距边缘0.5cm处点上2μL1M的NaN3，同侧距边缘1cm处点上2μL0.5％的苯甲醛乙醇溶液。在B区距甘油1cm处的平行线上均匀标记4个虫液位点，板子放入23℃培养箱90min后取出，计算A区和B区线虫条数，计算回避指数(AvoidanceIndex，AI)。结果显示本专利技术所述青口贝提取物能够提高秀丽线虫HA759的避化率，有效的抑制蛋白质的异常聚集，从而降低疾病蛋白的神经毒性，起到神经保护的作用。因此，本专利技术提供了所述青口贝提取物在制备抗氧化或神经保护作用的药物中的应用。本领域技术人员可将本专利技术所述青口贝提取物直接或间接本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种青口贝提取物的制备方法，其特征在于，青口贝去壳取肉加水进行组织匀浆，匀浆液离心取上清，过滤收集滤液。

【技术特征摘要】
1.一种青口贝提取物的制备方法，其特征在于，青口贝去壳取肉加水进行组织匀浆，匀浆液离心取上清，过滤收集滤液。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述水的加入量为青口贝肉的3倍～10倍。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述离心为5000g～15000g。4.根据权利要求1-3任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述离心时间为10～50min。5.根据权利要求1-4任意一项所述的制备方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：马忠华，梁明，黄泽波，郭晓蕾，贾伟章，余雪松，
申请(专利权)人：无限极中国有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44