一种测定帕瑞昔布中间体和帕瑞昔布有关物质的分析方法技术

一种测定帕瑞昔布中间体和帕瑞昔布有关物质的分析方法，其特征是采用高效液相色谱法，用乙腈‑水混合溶液溶解样品，以乙腈和醋酸盐缓冲液为流动相，在α‑酸性糖蛋白键合硅胶的色谱柱上进行梯度洗脱。本方法能够有效测定帕瑞昔布中间体和帕瑞昔布中的有关物质，尤其实现了在同一色谱条件下帕瑞昔布中间体、帕瑞昔布与其异构体、副反应产物、降解产物等的分离，在较短时间内更高效的分离并鉴别出帕瑞昔布中间体和帕瑞昔布的相关杂质，为帕瑞昔布的质量控制提供更可靠的依据。

A method for determination of related substances of parecoxib intermediates and parecoxib analysis method

A method for determination of related substances of parecoxib intermediates and parecoxib analysis method, which is characterized by high performance liquid chromatography with acetonitrile water mixed solution of dissolving the sample with acetonitrile and acetate buffer solution as mobile phase, the column in the alpha acid glycoprotein bonded silica gel on the gradient elution. This method is effective in determination of related substances of parecoxib intermediates and parecoxib in particular, realize the separation in the same chromatographic conditions of parecoxib intermediates, parecoxib and its isomers, side reaction products, degradation products, in a relatively short period of time more efficient separation and identification of related impurities parecoxib intermediates and parecoxib, provide a more reliable basis for the quality control of parecoxib.

【技术实现步骤摘要】
一种测定帕瑞昔布中间体和帕瑞昔布有关物质的分析方法
本专利技术属于药物分析
，涉及一种测定帕瑞昔布中间体和帕瑞昔布的有关物质的分析方法，特别是用一种高效液相色谱法同时对帕瑞昔布中间体和帕瑞昔布的异构体、副反应产物和降解产物进行测定的方法。
技术介绍
帕瑞昔布中间体4-(5-甲基-3-苯基-4-异噁唑基)苯磺酰胺(FD)和帕瑞昔布均为特异性COX-2抑制剂，帕瑞昔布为FD的前体药物，两者皆属于抗关节炎药中的昔布类镇痛药。目前临床上帕瑞昔布作为术后疼痛的短期治疗药在欧洲市场销售，中间体FD因上市后利益/风险比不尽人意而从美国市场撤出。两者合成路线相似，考虑到FD的风险，建立专属性强、灵敏可靠的分析方法对FD和帕瑞昔布的有关物质(见表1)进行控制，对帕瑞昔布的质量控制有十分重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种测定帕瑞昔布中间体4-(5-甲基-3-苯基-4-异噁唑基)苯磺酰胺和帕瑞昔布合成工艺路线中产生的异构体、副反应产物和降解产物的高效液相色谱分析方法，可用于帕瑞昔布的合成研究和生产过程质量控制。为实现上述目的，本专利技术的技术方案是：一种测定帕瑞昔布中间体(FD)和帕瑞昔布有关物质的分析方法，采用高效液相色谱法，用乙腈-水混合溶液溶解样品，选用α-酸性糖蛋白键合硅胶的手性色谱柱，以乙腈-醋酸盐缓冲液为流动相进行梯度洗脱。所述帕瑞昔布中间体(FD)是4-(5-甲基-3-苯基-4-异噁唑基)苯磺酰胺，所述帕瑞昔布是N-[[4-(5-甲基-3-苯基-4-异噁唑基)苯基]磺酰基]丙酰胺，有关物质是杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F和杂质G(见表1)。表1帕瑞昔布、FD及其有关物质结构式所述流动相梯度洗脱程序见表2。表2流动相梯度洗脱程序所述方法中，用体积比为40:60的乙腈-水混合溶液溶解样品，制成分析溶液。所述的色谱柱为CHIRALPAKAGP，4mm×100mm，5μm。所述流动相组成为乙腈-醋酸铵缓冲液，其中醋酸铵缓冲液浓度为0.01mol/L，pH4.0。色谱条件包括：检测波长为215nm；流动相洗脱速率为0.7mL/min；色谱柱温度为25℃；样品进样量为10μL。本专利技术的有益效果是：可在较短时间内有效测定帕瑞昔布合成工艺路线中产生的异构体、副反应产物和降解杂质，节约了时间，降低了检测成本，可用于帕瑞昔布合成研究和生产过程的质量控制，使相关产品的质量得到保证。附图说明图1实施例1的扣除空白运行后对照品液相色谱图。图2实施例2的扣除空白运行后对照品液相色谱图。图3实施例2的扣除空白运行后供试品液相色谱图。图中：1-帕瑞昔布；2-FD；3-杂质A；4-杂质B；5-杂质C；6-杂质D；7-杂质E；8-杂质F；9-杂质G。具体实施方式以下结合具体实施例进一步描述本专利技术的技术方案，给出的实施例仅为了阐明本专利技术，而不是为了限制本专利技术的范围。本试验根据色谱柱使用说明书推荐，优先选择异丙醇系统、乙腈系统进行考察试验。在考虑色谱柱使用的耐用性、测定成分的检测波长的基础上，决定采用乙腈系统。在乙腈系统中试验后发现进样后各色谱峰峰形较差，分离度不好，因此考虑加入缓冲盐，试验后优选为0.01mol/L醋酸铵溶液。实施例1(1)仪器与色谱条件高效液相色谱仪：Agilent1260高效液相色谱系统及工作站。色谱柱：α-酸性糖蛋白色谱柱(CHIRALPAKAGP，4mm×100mm，5μm)。配制0.01mol/L的醋酸铵溶液，用醋酸调节pH值至6.0为水相，流动相中乙腈-水相比例按表3进行梯度洗脱，设置流速为0.6mL/min，检测波长为215nm，柱温为25℃。表3(2)实验步骤分别取帕瑞昔布、FD、杂质A、B、C、D、E、F、G对照品适量，用乙腈-水(40:60)溶解并稀释制成每1mL中含帕瑞昔布、FD、各杂质约2μg的混合溶液，作为对照品溶液。分别取帕瑞昔布样品、FD样品、杂质A、B、C、D、E、F、G适量，同法配制每1mL中约含帕瑞昔布、FD0.5mg及其他各杂质2μg的混合溶液，作为供试品溶液。(3)测定方法及结果取上述溶液10μL按(1)色谱条件进样，运行46min，记录色谱图，考察帕瑞昔布、FD与各杂质、各杂质之间的分离度。结果表明，对照品溶液中各杂质分离度良好(见图1)，但供试品溶液中帕瑞昔布色谱峰发生裂分，在帕瑞昔布中测定有关物质时影响杂质与主峰分离度。进一步优化色谱条件如实施例2。实施例2(1)仪器与色谱条件高效液相色谱仪：Agilent1260高效液相色谱系统及工作站。色谱柱：α-酸性糖蛋白色谱柱(CHIRALPAKAGP，4mm×100mm，5μm)。配制0.01mol/L的醋酸铵溶液，用醋酸调节pH值至4.0为水相，流动相中乙腈-水相比例按表4进行梯度洗脱，设置流速为0.7mL/min，检测波长为215nm，柱温为25℃。表4(2)实验步骤分别取帕瑞昔布、FD、杂质A、B、C、D、E、F、G对照品适量，用乙腈-水(40:60)溶解并稀释制成每1mL中含帕瑞昔布、FD、各杂质约2μg的混合溶液，作为对照品溶液。分别取帕瑞昔布样品、FD样品、杂质A、B、C、D、E、F、G适量，同法配制每1mL中约含帕瑞昔布、FD0.5mg及其他各杂质2μg的混合溶液，作为供试品溶液。(3)测定方法及结果取上述溶液10μL按(1)色谱条件进样，运行42min，记录色谱图，考察帕瑞昔布、中间体、各杂质之间的分离度。结果表明，对照品溶液各杂质分离度良好(见图2)，供试品溶液中各杂质与主成分之间分离度良好，各成分色谱峰峰形良好(见图3)。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定帕瑞昔布中间体(FD)和帕瑞昔布有关物质的分析方法，其特征是，采用高效液相色谱法，用乙腈‑水混合溶液溶解样品，选用α‑酸性糖蛋白键合硅胶的手性色谱柱，以乙腈‑醋酸盐缓冲液为流动相进行梯度洗脱；所述帕瑞昔布中间体(FD)是4‑(5‑甲基‑3‑苯基‑4‑异噁唑基)苯磺酰胺，所述帕瑞昔布是N‑[[4‑(5‑甲基‑3‑苯基‑4‑异噁唑基)苯基]磺酰基]丙酰胺，有关物质是杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F和杂质G：

【技术特征摘要】
1.一种测定帕瑞昔布中间体(FD)和帕瑞昔布有关物质的分析方法，其特征是，采用高效液相色谱法，用乙腈-水混合溶液溶解样品，选用α-酸性糖蛋白键合硅胶的手性色谱柱，以乙腈-醋酸盐缓冲液为流动相进行梯度洗脱；所述帕瑞昔布中间体(FD)是4-(5-甲基-3-苯基-4-异噁唑基)苯磺酰胺，所述帕瑞昔布是N-[[4-(5-甲基-3-苯基-4-异噁唑基)苯基]磺酰基]丙酰胺，有关物质是杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F和杂质G：所述流动相梯度洗脱程序是：2.如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：于梦，孙玲，王金虎，段崇刚，赵思太，
申请(专利权)人：山东省药学科学院，山东福瑞达医药集团公司，
类型：发明
国别省市：山东,37