诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的医用生物培养基,是在现有培养基的基础上，加入壳寡糖。本发明专利技术的培养基能明显提高红豆杉细胞中紫杉醇的前体物质，同时提高红豆杉细胞代谢紫杉醇相关酶的活性，更利于有效合成紫杉醇。培养基中通过加入诱导因子壳寡糖，强化红豆杉细胞的生理生化状态和代谢能力，促进红豆杉细胞合成紫杉醇，提高目标次生代谢产物紫杉醇的产量。

Biological medium for producing taxol by Taxus chinensis plant cells

The invention discloses a medical biological medium for producing taxol by induction of Taxus chinensis plant cells, which is based on the existing medium. The culture medium of the invention can obviously enhance the precursor substance of taxol in Taxus cells, and increase the metabolism of taxol related enzymes in Taxus chinensis cells, and is more favorable for the effective synthesis of taxol. The addition of inducible factor chitosan oligosaccharide in the medium enhanced the physiological and biochemical status and metabolic capacity of Taxus chinensis cells, and promoted taxol production in Taxus chinensis cells, and increased the production of target secondary metabolite taxol.

【技术实现步骤摘要】
诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基
本专利技术涉及一种诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基，属于生物

技术介绍
红豆杉又称紫杉，也称赤柏松，是中国国家一级珍稀保护树种，也是世界上公认的濒临灭绝的天然珍稀抗癌植物。紫杉醇及其类似物迄今为止仅存在于裸子植物红豆杉科的红豆杉属和澳洲红豆杉属，红豆杉属植物全世界共有11种，广泛分布于欧亚大陆和北美的寒带、温带及亚热带地区，但分布零散且生长缓慢。澳洲红豆杉属仅分布于南半球，数量稀少，紫杉醇在红豆杉植物中含量普遍很低，即使当前公认含量最高的短叶红豆杉树皮中也不到0.1％，但其需求量很大。为了解决紫杉醇供需之间的尖锐矛盾，多年来相关研究者在寻找及扩大紫杉醇药源途径方面进行了大量研究。紫杉醇的化学全合成虽已取得成功，但因路线长、收率低等原因目前无法实现工业化。近年来，利用红豆杉细胞离体培养以制备紫杉醇得到了越来越多的关注，由于离体条件下细胞的培养方式可以得到更加多样的控制，因此其生产效率相对较高。然而，以制备紫杉醇为目的的细胞培养并不容易，首先需要筛选生产性能强的细胞株，同时还要匹配适宜的培养条件，此外在营养供给等方面需要针对细胞株特点及代谢特性进行设计，从而保证较高的培养密度和紫杉醇产率。现有技术的培养基在促进红豆杉细胞分泌紫杉醇方面仍不够理想。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题上，提供一种诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基。本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种含有壳寡糖的生物培养基。壳寡糖又叫壳聚寡糖、低聚壳聚糖，是将壳聚糖经特殊的生物酶技术(也有使用化学降解、微波降解技术的报道)降解得到的一种聚合度在2～20之间寡糖产品，分子量≤3200Da，是水溶性较好、功能作用大、生物活性高的低分子量产品。它具有壳聚糖所没有的较高溶解度，全溶于水，容易被生物体吸收利用等诸多独特的功能。本专利技术提供一种诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基，其特征在于，在现有培养基的基础上，加入壳寡糖。优选的，加入壳寡糖的重量是2-4g/L。进一步的，加入的壳寡糖的聚合度是6-8。不同聚合度的壳寡糖对诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的影响较大，聚合度太高的壳寡糖诱导效果不好。本专利技术提供一种诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基，包括下列组分：壳寡糖2-4g/L，蛋白胨35-50g/L，蔗糖15-30g/L，KNO3500-800mg/L、CaCl2·2H2O90-150mg/L、(NH4)2SO450-90mg/L、NaH2PO4·H2O60-100mg/L、MgSO4·7H2O300-400mg/L、肌醇60-200mg/L、盐酸硫铵3-20mg/L、苯丙氨酸3-20mg/L、L-精氨酸300-400mg/L、L-门冬酰胺30-90mg/L。申请人研究发现，在培养基中加入一定量的壳寡糖，可以极大的刺激红豆杉植物细胞生产紫杉醇，提高生产率。本专利技术的有益效果：本专利技术的培养基能明显提高红豆杉细胞中紫杉醇的前体物质，同时提高红豆杉细胞代谢紫杉醇相关酶的活性，更利于有效合成紫杉醇。培养基中通过加入诱导因子壳寡糖，强化红豆杉细胞的生理生化状态和代谢能力，促进红豆杉细胞合成紫杉醇，提高目标次生代谢产物紫杉醇的产量。具体实施方式实施例1本实施例提供一种诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基，包括下列组分：壳寡糖2g/L，蛋白胨35g/L，蔗糖15g/L，KNO3500mg/L、CaCl2·2H2O90mg/L、(NH4)2SO450mg/L、NaH2PO4·H2O60mg/L、MgSO4·7H2O300mg/L、肌醇60mg/L、盐酸硫铵3mg/L、苯丙氨酸3mg/L、L-精氨酸300mg/L、L-门冬酰胺30mg/L。加入的壳寡糖的聚合度是8。实施例2本实施例提供一种诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基，包括下列组分：壳寡糖4g/L，蛋白胨50g/L，蔗糖30g/L，KNO3800mg/L、CaCl2·2H2O150mg/L、(NH4)2SO490mg/L、NaH2PO4·H2O100mg/L、MgSO4·7H2O400mg/L、肌醇200mg/L、盐酸硫铵20mg/L、苯丙氨酸20mg/L、L-精氨酸400mg/L、L-门冬酰胺90mg/L。加入的壳寡糖的聚合度是6。实施例3本专利技术的实施例1提供的培养基和B5培养基、现有技术CN200910193549.6公开的培养基进行对比试验。具体培养方法按照CN200910193549.6公开的方法进行。具体实验结果如下：当然，上述说明并非是对本专利技术的限制，本专利技术也并不限于上述举例，本
的普通技术人员，在本专利技术的实质范围内，作出的变化、改型、添加或替换，都应属于本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
壳寡糖在制备诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基上的应用。

【技术特征摘要】
1.壳寡糖在制备诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基上的应用。2.诱导红豆杉植物细胞生产紫杉醇的生物培养基，其特征在于，在现有培养基的基础上，加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟怡杉，
申请(专利权)人：孟怡杉，
类型：发明
国别省市：山东,37