一种蛹虫草菌株液态发酵的方法技术

本发明专利技术提供了一种蛹虫草菌株液态发酵的方法，包括如下步骤：将蛹虫草菌株接种于液体发酵培养基中，摇床培养，温度控制在19‑21℃之间，摇床转速控制在200‑220rad/min，暗培养8‑14d；液体发酵培养基由五加科植物的果实或根为原料制备得到。本发明专利技术的蛹虫草菌株液态发酵的方法，发酵基质主要采用的为五加科植物的果实或根为原料，这种原料比较容易获得不需要添加其他成分，制备过程简单方便、经济环保，采用这种特定的培养基发酵后的产物不仅虫草素含量有所提升，还使得产物中含有大量稀有皂苷成分，且为蛹虫草菌株液态发酵提供了一种更为新颖的操作路线，值得大力推广应用，也填补了相关技术空白。

Method for liquid fermentation of Cordyceps militaris strain

The present invention provides a method of Cordyceps militaris fermentation liquid, which comprises the following steps: Cordyceps militaris strains were inoculated in the liquid culture medium, shaking culture, temperature control between 19 21 DEG C, shaking speed control in 200 220rad/min, 8 14d dark culture; liquid fermentation medium from Araliaceae plant fruit or root as raw materials for preparing. Method of liquid fermentation of Cordyceps militaris strains of the invention, the fermentation medium mainly used for Araliaceae fruit or root as raw material, the raw material is easy to get and do not need to add other ingredients, the preparation process is simple and convenient, economical and environmental protection, the specific culture medium after fermentation products not only improved the content of cordycepin. The product also contains a large number of rare ginsenosides, and liquid fermentation of Cordyceps militaris provides a more novel operating route, it is worth popularizing application, but also to fill the blank of related technology.

【技术实现步骤摘要】
一种蛹虫草菌株液态发酵的方法
本专利技术涉及蛹虫草菌株发酵领域，具体而言，涉及一种蛹虫草菌株液态发酵的方法。
技术介绍
蛹虫草为子囊亚门，麦角菌目，麦角菌科，虫草属，由地下的子座与地上子实体部分两部分组成的复合体，蛹虫草孢子于秋季散播，感染虫体，菌丝生长早虫体中，吸取营养，幼虫体内充满菌丝而死。到了第二年夏秋之际，自幼虫体之上长出草体，9月中旬左右可采集野生蛹虫草。蛹虫草中含有的虫草素具有多种生理学活性，比如抗肿瘤、抗病毒、增强免疫力的作用。现有技术中，为了获得虫草素一般采用化学合成以及生物合成两种方式。化学合成的方式生产成本比较高，合成工艺又比较复杂、收率低，产物纯化比较困难。生物合成法制备虫草素有两种途径：固体发酵获得虫草子实体，再从中提取；二是通过蛹虫草液体发酵，从发酵产物中直接提取。由于液体发酵比固体发酵在发酵规模、菌体生长速率、生长密度以及可控性上的优势，蛹虫草液体发酵提取虫草素是现如今制备虫草素的主要应用方法，而且发酵方法也比较成熟，但是现如今的发酵方法所提取的虫草素含量维持在一个稳定的水平，在现有工艺条件限制下很难再有新的突破，所用的发酵培养基配制方法比较繁琐，操作比较困难，无形之中也增加了提取虫草素的工作量，耗费人力物力，不经济环保。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种蛹虫草菌株液态发酵的方法，发酵基质主要采用的为五加科植物的果实或根为原料，这种原料比较容易获得不需要添加其他成分，制备过程简单方便、经济环保，采用这种特定的培养基发酵后的产物不仅虫草素含量有所提升，还使得产物中含有大量稀有皂苷成分，增加了后续开发的价值，且为蛹虫草菌株液态发酵提供了一种更为新颖的操作路线，值得大力推广应用，也填补了相关技术空白。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：本专利技术实施例提供了一种蛹虫草菌株液态发酵的方法，包括如下步骤：将蛹虫草菌株接种于液体发酵培养基中，摇床培养，温度控制在19-21℃之间，摇床转速控制在200-220rad/min，暗培养8-14d；所述液体发酵培养基由五加科植物的果实或根为原料制备得到。现有技术中，虽然有采用蛹虫草菌株进行液态发酵的方法，但是传统的培养方法一般是应用葡萄糖、蛋白胨和酵母膏为主要成分的发酵培养基，这些成分其实仅能满足蛹虫草基本的生长和发育需要，虫草素含量相对比较低，但是本专利技术通过采用五加科植物的果实或根为原料来代替葡萄糖、蛋白胨和酵母膏制备培养基，不仅成分简单制备起来更为方便，并且由于五加科植物中富含多种营养成分，更加适宜蛹虫草的生长和发育需要，增加菌丝生长代谢产物，从而进一步提高了虫草素的含量，并且产物中除了常规虫草素还含有稀有的皂苷，相当于通过本专利技术特殊的发酵基质得到了更为有利用价值的有效成分，增加了后续开发价值。当然更为优选的五加科植物最好选择为人参果、人参根、西洋参果、西洋参根、三七、绞股兰，更优的为人参果、人参根、西洋参果、西洋参根，因为专利技术人经过大量的创造性试验后，发现这几种原料不仅本身容易获得，原料来源广泛比较便宜，而且发酵培养得到的虫草素、皂苷的含量高。因此在实际操作过程中最好选择这几种为原料来制备培养基。在培养过程中，为了配合本专利技术特定的培养基种类，具体培养过程中培养的温度以及培养的时间均有特定的要求，培养温度需要控制在19-21℃之间，暗培养的时间为8-14d，摇床转速控制在200-220rad/min之间，更优的，培养温度控制在20-21℃之间，摇床转速控制在205-215rad/min。对于不同的发酵培养基暗培养的时间可能会稍微有所差异。将蛹虫草菌株接种于采用人参果、西洋参果制备的液体发酵培养基中，培养的时间优选为8-10d，将蛹虫草菌株接种于采用人参根、西洋参根制备的液体发酵培养基中，培养的时间优选为12-14d。上述操作条件对于本专利技术的液态发酵方法是特定的，并只能配合本专利技术的特定的液体发酵培养基，因为专利技术人是先选择出最为适宜的液体发酵培养基，然后再对蛹虫草菌株进行发酵培养并摸索出了培养条件，如果采用传统的培养方法具体的培养条件可能会有所差异，培养操作步骤上也会有差异性。在本专利技术中，如果发酵培养基是采用人参果、西洋参果制备得到的，那么液体发酵培养基的制备方法包括如下步骤：采摘新鲜的人参果或西洋参果，榨汁过滤得到果汁，120-125℃之间灭菌10-20min，即得。优选地，灭菌的温度控制在121-124℃之间，灭菌的时间为15-18min。整个制备方法简单易行，通过采用新鲜的人参果或者西洋参果，直接榨汁后灭菌即可得到，并不需要添加任何其他成分，易于操作。灭菌的温度与灭菌的时间最好控制适宜，以达到理想的灭菌效果。如果液体发酵培养基是采用人参根、西洋参根制备得到的，那么液体发酵培养基的制备方法包括如下步骤：将人参根或西洋参根切割、粉碎过筛，加水提取得水提液，添加葡萄糖后灭菌，即得。人参根或西洋参根先进行预处理切割成小块，优选的切割成颗粒大小1-2cm的块状，更优选的切割成1.5-1.8cm的块状。优选地，粉碎过筛的目粒度控制在80目以上，更优选为100目以上，粉状的根须更有利于后续提取时有效成分的充分浸出，因此最好形成均一的粉状更有利于后续操作。优选地，加水提取过程中，添加水量为每克西洋参根或人参根配30-40ml水，水量不宜过大也不宜过小，达到提取的效果即可，加量太大反而会造成浪费也不会进一步提高提取率。优选地，提取时间控制在3-4h，更优选为3.5-3.8h之间，控制在3h左右基本可以将有效成分充分浸提出来。优选地，提取后离心分离15-20min以纯化，离心分离的速率控制在8000-10000rad/min，经过离心分离之后能够将其中的杂质分离开来，以达到纯化的效果。另外，最好在120-125℃之间灭菌10-20min，更优选的灭菌的温度控制在121-124℃之间，灭菌的时间为15-18min。除此之外，其他五加科的植物比如三七、绞股兰可按照人参根或西洋参根(包括人参主根、西洋参主根)的液体发酵培养基的制备方法进行操作，制备液体发酵培养基的方法比较类似，可以互相来借鉴。总之，专利技术人在进行蛹虫草菌株液态发酵的过程中，创造性的选择了特殊的液体发酵培养基，摒弃了以往传统类型的培养基，具有开拓性的意义，并摸索了一条适宜蛹虫草发酵培养的操作过程，其中包括具体培养的时间、摇床的速率、各种液体发酵培养基的具体制备过程这些条件均进行了优化，为后续的实施操作提供了可参考的数据，具有一定的指导意义。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：(1)本专利技术采用蛹虫草菌株进行液态发酵，发酵基质为五加科植物的果实或根，通过本专利技术的发酵基质发酵后的产物中含有稀有皂苷和虫草素双重有效成分，虫草素较以往的发酵方法含量上有所提升；(2)蛹虫草菌株液态发酵多以获得虫草素为目的，本专利技术通过特殊发酵基质可得到其他中药的有效成分，为蛹虫草菌株与其他中药结合开发提供了新思路，发酵产物中含有稀有皂苷和虫草素双重有效成分，能过分离纯化得到稀有皂苷单体及虫草素，后续开发价值大；(3)通过本专利技术的发酵方法很好的利用了人参果果汁、西洋参果汁，因为一般人参果和西洋参果主要用途是获得种子即参籽，其果汁是附加产物没有其他用途，本专利技术的方法实现了资源的合理化配置，提高本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛹虫草菌株液态发酵的方法，其特征在于，包括如下步骤：将蛹虫草菌株接种于液体发酵培养基中，摇床培养，温度控制在19‑21℃之间，摇床转速控制在200‑220rad/min，暗培养8‑14d；所述液体发酵培养基由五加科植物的果实或根为原料制备得到。

【技术特征摘要】
1.一种蛹虫草菌株液态发酵的方法，其特征在于，包括如下步骤：将蛹虫草菌株接种于液体发酵培养基中，摇床培养，温度控制在19-21℃之间，摇床转速控制在200-220rad/min，暗培养8-14d；所述液体发酵培养基由五加科植物的果实或根为原料制备得到。2.根据权利要求1所述的蛹虫草菌株液态发酵的方法，其特征在于，所述液体发酵培养基由人参果、人参根、西洋参果、西洋参根、三七、绞股兰的其中一种为原料制备得到；优选地，所述液体发酵培养基由人参果、人参根、西洋参果、西洋参根的其中一种为原料制备得到。3.根据权利要求2所述的蛹虫草菌株液态发酵的方法，其特征在于，所述人参果、西洋参果的液体发酵培养基的制备方法包括如下步骤：采摘新鲜的人参果或西洋参果，榨汁过滤得到果汁，120-125℃之间灭菌10-20min，即得。4.根据权利要求3所述的蛹虫草菌株液态发酵的方法，其特征在于，灭菌的温度控制在121-124℃之间，灭菌的时间为15-18min。5.根据权利要求2所述的蛹虫草菌株液态发酵的方法，其特征在于，所述人参根、西洋参根的液体发酵培养基的制备方法包括如下步骤：将人参根或西洋参根切割、粉碎过筛，加水提取得水提液...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫梅霞，张宝香，王英平，张瑞，郭靖，许世泉，
申请(专利权)人：中国农业科学院特产研究所，
类型：发明
国别省市：吉林,22