一种植物光调控型启动子及应用制造技术

本发明专利技术涉及一种植物光调控型启动子及应用。该植物光调控型启动子，含有选自如下1)或2)或3)中任意一项并具有启动子功能的核苷酸序列：1)其核苷酸序列是序列表中序列1；2)在严格条件下与序列1限定的DNA片段杂交且与启动植物蛋白表达相关的DNA分子；3)与1)或2)的基因具有90％以上的同源性，且与启动植物蛋白表达相关的DNA分子。本发明专利技术利用诱导型启动子代替组成型启动子，可以获得光调控的特异表达的启动子；利用遗传转化技术将其导入到植物基因组中，可以实现对目的基因的特异性表达。

Plant light regulation type promoter and application thereof

The invention relates to a light regulated promoter of plants and uses thereof. The plant light regulated promoter, containing selected from 1) or 2) or 3) in any one, and has the function of promoter sequence: 1) the nucleotide sequence is sequence 1 in a sequence table; 2) under strict conditions and sequence 1 qualified DNA fragment and associated with initiation of egg plant expression of the DNA molecule; 3) and 1) or 2) gene had more than 90% homology, DNA molecules and related protein expression in plants start. The invention uses the inducible promoter instead of constitutive promoter specific expression, can obtain the light control promoter; technique of genetic transformation into the plant genome, can realize the specificity of gene expression.

【技术实现步骤摘要】
一种植物光调控型启动子及应用
本专利技术涉及植物基因工程领域，更具体的说，涉及一种来源于玉米的受光调控的特异启动子的克隆、表达及其在植物中的应用。
技术介绍
启动子是位于基因5’端上游区的一段DNA序列，它包含有增强、启动或阻遏基因表达的序列和响应外界环境中激素或胁迫应答作用的顺式作用元件，转录因子通过与这些元件相互作用来实现对某种基因的转录调控。植物启动子按其转录方式可以分为组成型启动子、组织特异型启动子和诱导型启动子。组成型启动子广泛应用于植物转基因，常用的如CaMV35S启动子，ubiquitin启动子和actin启动子等，它们能高效、持续和非特异的启动外源基因表达，但外源蛋白在转基因植物中组成型表达也增加植物的代谢负担，直接影响了植株的生长发育；同时，组成型启动子可能诱发基因沉默，影响转基因技术应用；与组成型启动子相比，诱导型启动子只在某些物理或化学信号的刺激下或者植物发育到特定的阶段，才启动外源基因的转录。它不仅能使目的基因的表达产物在一定时空积累，增加区域表达量，提高植株的抗逆性，同时可避免由组成型启动子启动外源基因过量表达引起的对植株发育的负面影响，也可以在一定程度上解决转基因应用中的基因沉默问题，是应用植物转基因技术进行基因工程育种的重要启动子。光是影响植物生长发育最重要的因素之一，因为它不仅作为植物感知环境的信号来源，还作为光合作用的能量来源。因此，对光诱导型启动子的研究有助于了解植物基因在光下的转录调控表达模式及其调控机制，可应用于基因工程中使外源基因伴随光照和植物生理状态进行表达，维持转基因植株的健康生长。
技术实现思路
本专利技术从玉米中克隆一种受光调控的启动子，其核苷酸序列全长2058bp，名称为PZm169o，来源于玉米B73，核苷酸序列全长如下：GAGAGGGAGAGGGAAGTTGCTGCGCGGGAAAAGAAAATGAGATAGGGGAGGGGGCGCATGGGGGAAGGGGCGCCAGGGGCCGGGTTGGGCCACGGGCCGGGCCGGACCACGAGCTGGGCCGAAAACCCACTGCACGCACGACCACTAATCGAAAACAAATCATGATTCGAAGACCAAAACGAGACGGACGCGCGATTAGACACAACATTAGACAAAAGAAATATGCTTCAGCATGAAGCAAAACCTATGTCAACTTAGGTTTTTGTTTACACGCGATACGGACACCAGTCACTATACTGCTTTGAAAATTAGAAGAAGGAGCAAAACGGGAAGAGAAAAGAGAGTAACGCCTGAATTTGCTGAGTATCGGAGAAGAAAAATTATACTCCCAAATTCAGGGCGTTACAACATCTCTTGGTCAAGGTGTGACATGCTGGCTATAGAGGATGGTACTCTGCTTCCCAATTATGGAACATAGAGTGAGGGAGATACTAGATGCGACGAGGGTGAGGAAGACCGGTGGTGGCGATGGCAACCTCGGGGAGAGGCAGGAGAAACTGCAGTAGTGGGCCAAGCGTGTAGATGCGAAGGGGTATAGGGGTATTCTCACGGGAACCGCTCGTTTCGTCCCAAAGAGGCCTGTAAACCGATTTGGCATTCACCTTGAAAACCAAGCTACCGGAAAAATCAGTTCAGGGAAAAACTGACCCAAAATCAGAGCGTTTTGCACTCAGATCAGCTTTTGGCGGTCACAATCTAAAAAAGGGGTTCCAAACGGGGCATGCACTACAACTCTCTATAGCTCTTGGAAGAGGTTCAAATAATATTCTAGCAATCAGGGCTATGCCTAAGATTTTAGGGGCCCTGGGCGAAAGCTTATATGGATGCCCTTTTGGCCGATGTATATACAATAACTATATACATAGACACATTTTGATGGGCCAAATAGTAAATGCAATTAGCTAGCTCCTACATATGGTATACATGTATGTGCGAAGGTTGATCGTCGATGGCATGTCTTGGCGTTTGCAACCGTGTCTAGACTGTCCAGTTCTTTGGCAACATGGTGGTGGCACCACGACATGAATTAGGTTTTCTAGATGTATTCTATTATGAGTCCTGACTTGGGATCTGGCTTACATGAACATGCTAGCATTTGCTTCCGATTTACGTTACATGAGCAAGATAGTAGAGGCTGAGCTACCCGCTTATGTGAGCATGATAGCAGTTCATAGTAAGGATGACAATAAGTACCCGAAACCCGAACACCCAACAGATTTTACCTAATTAGAAGGTAGGTATGAGATAATTTCTTTAACCGTGAGTATGTTAATAGGTAATACCCATACTCGTCTAACCGCGGGTAAAATATACCGACATCATATCACTATTACCATCTAATAACTCATCTTAGCTAAAAGAAAATCCGTATTCGACTATTGTTTGTTTAAATACCATATTATGTAATCATATGAGATGTTATATTTGAAGTTAAACTTATTTTTATATGTTTGTTTGATATTTTGAGTGATTGATATATTACAATTTAAGATTTTCTTAATGGGTGCCTTAATGGGTAAAATTACACCCGCGGATATGGGTACGGATGGGATTCTATACCCGCGAGTGTGCATGGTAACCTAATGGATATAATTTTTTTACGAATAACGGCATAAAATGGTACTAGATATATTCCATTTCGTAGCAGTGGACGGTTGAACCAACCAAGTGAACACTATTTAAACTGATGAAATGATTAAATATTATACTTAGATATATACTTAAGGGGACTTCAACATTTTGAGACGCTTTAGCCTGCTAGTTCAATCCTTGAAACTGAAGAACAAGATATGGCAGAAGCTGCTCACCCAAAATACCTGACCCCTCTCCTTGTCCACACCATAAATACCAGGCGTATGCAACCAGTGCTGCCACACACACACACACAGACACCAAACGCCACAGAACTTGCAGGCATGGCTGAAGGTTAAGAAGAAAAAGAGGAGGGCGGCCTCACATGGAGATGGAGAGCCCCTTTTG上述序列中加黑部分“”、“”、“”为光响应元件。本专利技术还提供了上述光调控型基因启动子的构建方法，具体步骤为:以玉米B73系基因组DNA为模板，根据Zm-miR169o基因序列设计特异性引物，进行PCR扩增，获得上述光诱导型基因启动子。本专利技术还提供了含上述光调控型启动子的植物表达载体，命名为pPZm169o::GUS。本专利技术还提供上述启动子在植物基因工程中获得光调控表达目的基因的转基因玉米植株中的应用。本专利技术利用诱导型启动子代替组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种植物光调控型启动子，其特征在于：所述启动子含有选自如下1)或2)或3)中任意一项并具有启动子功能的核苷酸序列：1)其核苷酸序列是序列表中序列1；2)在严格条件下与序列1限定的DNA片段杂交且与启动植物蛋白表达相关的DNA分子；3)与1)或2)的基因具有90％以上的同源性，且与启动植物蛋白表达相关的DNA分子。

【技术特征摘要】
1.一种植物光调控型启动子，其特征在于：所述启动子含有选自如下1)或2)或3)中任意一项并具有启动子功能的核苷酸序列：1)其核苷酸序列是序列表中序列1；2)在严格条件下与序列1限定的DNA片段杂交且与启动植物蛋白表达相关的DNA分...

【专利技术属性】
技术研发人员：王维部，徐秒云，赵贵林，王磊，林玉群，朱佳旭，陈肖英，范云六，
申请(专利权)人：深圳市农科集团有限公司，中国农业科学院生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：广东,44