一种褐藻铁钉菜多糖提取方法技术

本发明专利技术涉及一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，该方法包括以下步骤：采集烘干、粉碎、预处理、混合提取、离心、浓缩沉淀等步骤，本发明专利技术将高压灭菌锅提取和超声波水提法相结合，大大地提高了铁钉菜多糖的提取率；本发明专利技术的预处理步骤使提取得到的多糖含量更高，采用水作溶剂来提取多糖时对海藻细胞的穿透力强，提取效率高，水在生产上使用安全、经济；本发明专利技术制备得到的多糖为黄白色，无臭，具有一定的凝胶特性。

Method for extracting polysaccharide from brown algae and iron nail

The present invention relates to an alga Ishige okamurae polysaccharide extraction method, the method comprises the following steps: collecting, drying and grinding pretreatment, mixed extraction, centrifugation and concentration precipitation and other steps, the autoclave extraction and ultrasonic extraction combined with greatly improved Ishige okamurae extraction rate of polysaccharides; pre processing steps of the invention enables the extraction of the polysaccharide content was higher, using water as solvent to extract the polysaccharides of seaweed cells and strong penetrating power, high extraction efficiency, water use and economic safety in production; polysaccharide prepared by the invention is white, odorless, has certain gel properties.

【技术实现步骤摘要】
一种褐藻铁钉菜多糖提取方法
本专利技术涉及多糖提取领域，具体涉及一种褐藻铁钉菜多糖提取方法。
技术介绍
海藻多糖是一种天然活性物质，它具有调节机体免疫功能的作用，如可以通过促进淋巴细胞增殖与分化、刺激巨噬细胞的吞噬功能、促进细胞因子和抗体的产生等途径来实现对机体免疫系统功能的调节。目前，全球使用最广泛的海藻提取功能食品配料就是从海带、巨藻等褐藻中提取的海藻酸盐等天然海藻多糖产品。但从铁钉菜中提取多糖研究的很少，铁钉菜(IshigeokamuraiYendo)为藻类褐藻门铁钉菜科铁钉菜属植物，广泛分布于我国东海、南海礁岩石上，民间用于喉咙炎、淋巴结炎、甲状腺肿的治疗，具有清热解毒，软坚散结的作用。国内对铁钉菜的研究较少，汤海峰等从浙江产的铁钉菜中分离出39个化合物；杨尚军等报导分离出岩藻甾醇、甘露醇、十六烷酸；郑怡等从福建产的铁钉菜中提取凝集素对枯草杆菌、啤酒酵母细胞有较好凝集作用；龚丽芬等以超声波协同热水提取水溶性多糖,考察了液固比、超声波强度、提取时间、提取温度和pH对铁钉菜多糖提取率的影响,其最高提取率为1.03％，考虑到褐藻铁钉菜为我国沿海优势种，为了充分了利用自然资源，有必要对铁钉菜进行相关活性成分的研究，对于现有技术铁钉菜多糖提取方法，提取率较低，需要加大相关研究，以提高多糖的提取率。
技术实现思路
为了解决现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，该方法操作简单，使用安全，提取效率高，可用于大规模生产。一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，包括以下步骤：1)采集烘干：采集铁钉菜流水清洗，用超声波清洗器低频率清洗，放入恒温培养箱烘干；2)粉碎：用粉碎机将铁钉菜样品进行粉碎，用筛网过滤后即得到铁钉菜干粉；3)预处理：取步骤2)中的铁钉菜干粉于容器中，加入95％的乙醇，浸泡，用双层纱布过滤，重复3次，将过滤后的铁钉菜风干即得预处理铁钉菜干粉；4)混合提取：在预处理的铁钉菜干粉中加入蒸馏水，于高压灭菌锅中115℃条件下提取0.5h，然后放入超声波发生器中将频率调到130KHZ，温度75℃，超声萃取30min；5)离心：离心，收集上清夜；6)浓缩沉淀：真空旋转蒸发仪浓缩至有固体开始析出，得浓缩液，向浓缩液中加入95％乙醇，静置，离心，最后加入75％的乙醇反复洗涤，得到的沉淀烘干即得到铁钉菜多糖。作为优选，所述步骤1)超声波低频率为25KHZ；超声波清洗器清洗的时间为8～12min，更优选为10min。作为优选，所述步骤1)中的烘干程序为先用120℃烘干15min，然后调至80℃，烘干8小时至恒重。作为优选，所述步骤2)中筛网的目数为80～100目。作为优选，所述步骤3)的铁钉菜干粉与95％的乙醇重量比为1:5，所述浸泡时间为11～13h。作为优选，所述步骤4)中的预处理铁钉菜干粉与蒸馏水的重量比为1:5～1:6。作为优选，所述步骤5)及步骤6)中的离心转速为4000r/min，离心时间为10min。作为优选，所述步骤6)中95％的乙醇体积是浓缩液的3～5倍。作为优选，所述步骤6)中静置时间为8～10小时。作为一种优选的技术方案，一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，包括以下步骤：1)采集烘干：采集铁钉菜流水清洗，用超声波清洗器低频率清洗10min，放入恒温培养箱中120℃，15min；调至80℃，烘干8小时至恒重。2)粉碎：用粉碎机将铁钉菜样品进行粉碎，过80目筛网过滤后即得到铁钉菜干粉。3)预处理：取步骤2)中的铁钉菜干粉于容器中，加入95％的乙醇，铁钉菜干粉与95％的乙醇重量比为1:5，浸泡12h，用双层纱布过滤，重复3次，将过滤后的铁钉菜风干即得预处理铁钉菜干粉；4)混合提取：在预处理铁钉菜干粉中加入蒸馏水，预处理藻粉与蒸馏水的重量比为1:5，于高压灭菌锅中115℃条件下提取0.5h，然后放入超声波发生器中将频率调到130KHZ，温度75℃，超声萃取30min；5)离心：离心转速为4000r/min，离心时间为10min，收集上清夜；6)浓缩沉淀：真空旋转蒸发仪浓缩至有固体开始析出，得浓缩液，向浓缩液中加入3倍体积的95％乙醇，静置8小时，离心，离心转速为4000r/min，离心时间为10min，最后加入75％的乙醇反复洗涤，得到的沉淀烘干即得到铁钉菜多糖。作为一种优选的技术方案，一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，包括以下步骤：1)采集烘干：采集铁钉菜流水清洗，用超声波清洗器低频率清洗12min，放入恒温培养箱中120℃，15min；调至80℃，烘干8小时至恒重。2)粉碎：用粉碎机将铁钉菜样品进行粉碎，过100目筛网过滤后即得到铁钉菜干粉。3)预处理：取步骤2)中的铁钉菜干粉于容器中，加入95％的乙醇，铁钉菜干粉与95％的乙醇重量比为1:5，浸泡13h，用双层纱布过滤，重复3次，将过滤后的铁钉菜风干即得预处理铁钉菜干粉；4)混合提取：在预处理铁钉菜干粉中加入蒸馏水，预处理铁钉菜干粉与蒸馏水的重量比为1:5，在高压灭菌锅中115℃条件下提取0.5h，然后放入超声波发生器中将频率调到130KHZ，温度75℃，超声萃取30min；5)离心：离心转速为4000r/min，离心时间为10min，收集上清夜；6)浓缩沉淀：真空旋转蒸发仪浓缩至有固体开始析出，得浓缩液，向浓缩液中加入4倍体积的95％乙醇，静置8小时，离心，离心转速为4000r/min，离心时间为10min，最后加入75％的乙醇反复洗涤，得到的沉淀烘干即得到铁钉菜多糖。作为一种优选的技术方案，一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，包括以下步骤：1)采集烘干：采集铁钉菜流水清洗，用超声波清洗器低频率清洗8min，放入恒温培养箱中120℃，15min；调至80℃，烘干8小时至恒重。2)粉碎：用粉碎机将铁钉菜样品进行粉碎，过100目筛网过滤后即得到铁钉菜干粉。3)预处理：取步骤2)中的铁钉菜干粉于容器中，加入95％的乙醇，铁钉菜干粉与95％的乙醇重量比为1:5，浸泡11h，用双层纱布过滤，重复3次，将过滤后的铁钉菜风干即得预处理铁钉菜干粉；4)混合提取：在预处理铁钉菜干粉中加入蒸馏水，预处理铁钉菜干粉与蒸馏水的重量比为1:5，于高压灭菌锅中115℃条件下提取0.5h，然后放入超声波发生器中将频率调到130KHZ，温度75℃，超声萃取30min；5)离心：离心转速为4000r/min，离心时间为10min，收集上清夜；6)浓缩沉淀：真空旋转蒸发仪浓缩至有固体开始析出，得浓缩液，向浓缩液中加入5倍体积的95％乙醇，静置8小时，离心，离心转速为4000r/min，离心时间为10min，最后加入75％的乙醇反复洗涤，得到的沉淀烘干即得到铁钉菜多糖。高压灭菌锅基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密闭的情况下，随着水的煮沸，蒸汽压力升高，温度也相应增高。超声波是一种高频率的机械波，能形成强大的冲击波或高速射流产生的“空化作用”对藻类细胞膜进行破坏，有利用有效成分的分解，可有效地减小、消除与水相之间的阻滞层，加大了传质效率，有助于溶质的扩散。目前单纯使用超声波水提法提取铁钉菜多糖的方法具有操作简单、时间短等优点，但提取率不高；采用高压灭菌锅115℃条件下提取，可以增加藻体多糖的水解率，本专利技术将高压灭菌锅提取和超声波水提法相结合，大大地提高了铁本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，其特征在于包括以下步骤：1)采集烘干：采集铁钉菜流水清洗，用超声波清洗器低频率清洗，放入恒温培养箱烘干；2)粉碎：用粉碎机将铁钉菜样品进行粉碎，用筛网过滤后即得到铁钉菜干粉；3)预处理：取步骤2)中的铁钉菜干粉于容器中，加入95％的乙醇，浸泡，用双层纱布过滤，重复3次，将过滤后的铁钉菜风干即得预处理铁钉菜干粉；4)混合提取：在预处理铁钉菜干粉中加入蒸馏水，在高压灭菌锅中115℃条件下提取0.5h，然后放入超声波发生器中将频率调到130KHZ，温度75℃，超声萃取30min；5)离心：离心，收集上清夜；6)浓缩沉淀：真空旋转蒸发仪浓缩至有固体开始析出，得浓缩液，向浓缩液中加入95％乙醇，静置，离心，最后加入75％的乙醇反复洗涤，得到的沉淀烘干即得到铁钉菜多糖。

【技术特征摘要】
1.一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，其特征在于包括以下步骤：1)采集烘干：采集铁钉菜流水清洗，用超声波清洗器低频率清洗，放入恒温培养箱烘干；2)粉碎：用粉碎机将铁钉菜样品进行粉碎，用筛网过滤后即得到铁钉菜干粉；3)预处理：取步骤2)中的铁钉菜干粉于容器中，加入95％的乙醇，浸泡，用双层纱布过滤，重复3次，将过滤后的铁钉菜风干即得预处理铁钉菜干粉；4)混合提取：在预处理铁钉菜干粉中加入蒸馏水，在高压灭菌锅中115℃条件下提取0.5h，然后放入超声波发生器中将频率调到130KHZ，温度75℃，超声萃取30min；5)离心：离心，收集上清夜；6)浓缩沉淀：真空旋转蒸发仪浓缩至有固体开始析出，得浓缩液，向浓缩液中加入95％乙醇，静置，离心，最后加入75％的乙醇反复洗涤，得到的沉淀烘干即得到铁钉菜多糖。2.根据权利要求1所述一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，其特征在于所述步骤1)中超声波低频率为25KHZ；超声波清洗器清洗的时间为8～12min，更优选为10min。3....

【专利技术属性】
技术研发人员：王春月，张志健，
申请(专利权)人：浙江海洋大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33