本发明专利技术公开了一种d‑柠檬烯抗癌增效组合物及其制备方法，特别是用于d‑柠檬烯的抗癌增效组合物，主要用于抑制癌细胞增生和促使癌细胞的凋亡，所述d‑柠檬烯增效组合物包括植物源表面活性剂和壳寡糖，其中，d‑柠檬烯抗癌增效组合物包括，0.5~10%的d‑柠檬烯，0.1‑5‰的壳寡糖，0.5‑10%的植物源表面活性剂。实验结果表明，植物源表面活性剂、壳寡糖对d‑柠檬烯具有协同的增效作用，尤其对口腔癌细胞的抑制和凋亡作用显著。
D limonene synergistic anticancer composition and preparation method and application thereof
The invention discloses a D limonene synergistic anticancer composition and a preparation method thereof, in particular for the synergistic anticancer composition D limonene, mainly for inhibition of cancer cell proliferation and promote apoptosis of cancer cells, the D limonene synergistic composition including botanical surfactant and chitosan oligosaccharide, wherein D limonene synergistic anticancer composition including 0.5~10%, D limonene, chitosan oligosaccharide 0.1 5 per thousand, botanical surfactant 0.5 10%. The experimental results show that the botanical surfactant, chitosan oligosaccharide has the synergistic action of D limonene, especially the inhibition and apoptosis of oral cancer cells significantly.
【技术实现步骤摘要】
d-柠檬烯抗癌增效组合物及其制备方法与应用
本专利技术属于天然抑制癌细胞增生的药物制备领域，具体涉及一种d-柠檬烯抗癌增效组合物及其制备方法与应用。
技术介绍
据世界卫生组织（WHO）统计，全世界每年有1000万新发癌症患者，600万人死于癌症。目前国内外治疗癌症的主要措施包括手术、化疗、放疗和免疫疗法，但多数存在不同程度的毒副作用或疗效不理想，在治疗癌细胞的同时，也给人的正常组织、器官及全身带来了损害，甚至会让患者产生难以接受的某些副作用，比如口腔癌的治疗手术，术后对人的面组织破坏严重，化疗也如此，副作用非常严重，因此，寻找高效和无副作用的防治或治疗药物显得尤其重要和迫切。口腔癌多属于鳞状上皮细胞癌，诱因极为复杂。一般认为与饮食习惯、饮用过热食物或水、吸烟、饮酒、病毒感染或不良的口腔卫生习惯有关，但确切的诱因目前尚不清楚，所以，暂没有防显著、副作用小的药物和治疗方法。柠檬烯，别称苧烯，学名为1-甲基-4-异丙基环乙稀，分子式C10H16，分子量136.23，柠檬烯是广泛存在于天然植物中的单环单萜，它是除蒎烯外，目前最重要和分布最广的萜烯，国际日用香精香料协会（InternationalFragranceAssociation，IFRA）没有限制规定。1994年，柠檬烯还被美国食用香料与提取物制造商协会（FlavorandExtractManufacture’SAssociationoftheUnitedStates，FEMA）认定其毒性属GRAS（一般公认安全）级，并经FDA批准食用，FAO和WHO对d-柠檬烯的ADI不作特殊规定，因此，它属于高安全性的食品添加剂原料，同时，在医药领域得到广泛的应用。国内外大量研究发现，d-柠檬烯对多种肿瘤具有抑制和逆转作用（CrowellP.L.,GouldM.N.,Chemopreventionandtherapyofcancerbyd-limonene[J].CritRevOncol,1994,5(1):1-22;CrowellP.L.,AyoubiS.A.,BurkeY.D.,Antitumorigeniceffectsoflimoneneandperillylalcoholagainstpancreaticandbreastcancer[J].AdvExpMedBiol,1996,401(2):131-136;ElegbedeJ.A.,ElsonC.E.,QureshiA.,etal.InhibitionofDMBA-inducedmammarycancerbythemonoterpenesd-limonene[J]，Carcinogenesis,1998,5(5):661-664.）。d-柠檬烯化毒性低、抗瘤谱广，同时具有预防和治疗癌症的作用，现已进入临床Ⅰ期和临床Ⅱ期试验（VigushinD.M.,PoonG.K.,BoddyA.,etal.PhaseⅠandpharmacokineticstudyofd-limoneneinpatientswithadvancedcancer[J],CancerChemotherpyandPharmacology,1998,42(2):111-117.）。国内外研究证明，d-柠檬烯的疏水性较强，不易进入肿瘤细胞，同时发现d-柠檬烯易挥发，不稳定，因此影响了d-柠檬烯的应用。有研究报道，提高柠檬烯的极性或水溶性有利于其抗肿瘤活性的提高（PamelaL.，CrowellP.L.,RenZ.B.,etal.Structure-activityrelationshipsamongmonoterpeneinhibitorsofproteinisoprenylationandcellproliferation[J],BiochemPharmacol,1994,47(8):1405-1415）。本专利技术申请人通过大量筛选实验，发现使用植物源表面活性剂和壳寡糖（增效组合物），可提高d-柠檬烯的抗癌活性，而且，增效作用非常显著。经本专利技术申请人查新，国内外有关d-柠檬烯可诱导癌细胞凋亡的研究及文献较多，但未见植物源表面活性剂和壳寡糖协同增效d-柠檬烯抗癌活性的报道。
技术实现思路
目前国内外治疗癌症（特别是口腔癌）技术普遍存在严重的副作用问题，另外，采用d-柠檬烯防治癌细胞，普遍存在易氧化分解、药效低、稳定性差的问题。本专利技术的目的是提供一种d-柠檬烯抗癌增效组合物及其制备方法，其中，所述组合物包括d-柠檬烯所用植物表面活性剂和壳寡糖联合增效物、组合物配方及采用高压均质工艺和制备方法，包括d-柠檬烯抗癌增效组合物纳米乳液的制备。本专利技术是采用如下技术方案实现的：一种d-柠檬烯抗癌增效组合物，包括如下配方（重量百分比）：抗癌活性物：0.5~10%，增效剂1：0.1~5‰，增效剂2：0.5~10%，其余为：去离子水或蒸馏水。其中，所述抗癌活性物为98%含量的纯天然提取物d-柠檬烯，所述增效剂1为分子量为800~1500的壳寡糖，所述增效剂2为非离子型NSF-5系列植物多烯酚聚氧乙烯醚。上述d-柠檬烯抗癌增效组合物的制备方法包括：将d-柠檬烯抗癌增效组合物各物料按重量百分比分别置入高压均质机内，在工作压力为200~1500par的条件下，均质10~120min，制成粒径为30~100nm的纳米乳液，即为本专利技术所述d-柠檬烯抗癌增效组合物产品。本专利技术在试验增效组合物的过程中，采用如下试验例：本申请人选取了4种较为安全的稳定剂作为抗癌活性物的增溶剂，在抗癌活性物重量配比为0.5%，分子量800的壳寡糖水溶性粉剂（上海峰瑜生物科技发展有限公司生产）的重量配比为0.2‰，增溶稳定剂重量配比为1.5%，其余为去离子水，该组合物与受试癌细胞作用2h，KB细胞凋亡率如下表所示。对比试验表明，在相同的受试条件下，NSF-5系列植物多烯酚聚氧乙烯醚对d-柠檬烯增效最好。实验结果表明，植物源表面活性剂、壳寡糖对d-柠檬烯具有协同的增效作用，尤其对口腔癌细胞的抑制和凋亡作用显著。d-柠檬烯抗癌增效组合物与癌细胞作用6~12h，抑制率可达99.90%~100%，对细胞的凋亡率达99.90%~100%，是对口腔癌细胞的作用尤其明显。本专利技术的有益之处在于：1、本专利技术首次发现应用壳寡糖和植物源表面活性剂对d-柠檬烯抗癌增效作用显著，0.5~10%含量的d-柠檬烯增效组合物与受试癌细胞作用3~12h，细胞的凋亡率可达90~100%。2、0.5~10%含量的d-柠檬烯增效组合物纳米乳液作用3~12h，可诱导人口腔表皮样癌细胞（KB细胞）凋亡，凋亡率可达100%。具体实施方式下面结合具体实施例进一步说明本专利技术。实施例1：0.5%含量的d-柠檬烯抗癌增效组合物及制备方法一种d-柠檬烯抗癌增效组合物配方（重量百分比）如下：抗癌活性物：0.5%，增效剂1：0.2‰，增效剂2：0.5%，去离子水：99.98%。其中，所述抗癌活性物为含量98%的d-柠檬烯（市售商品），所述增效剂1为分子量800的壳寡糖水溶性粉剂（上海峰瑜生物科技发展有限公司生产），所述增效剂2为非离子型NSF-5系列植物多烯酚聚氧乙烯醚（常熟耐素生物材料科技有限公司生产）。按照上述抗癌增效组合物配方、配比，称重，然后分本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种d‑柠檬烯抗癌增效组合物，其特征在于：包括如下重量百分比配方：抗癌活性物： 0.5~10%，增效剂1： 0.1~5‰，增效剂2： 0.5~10%，其余为： 去离子水或蒸馏水；其中，所述抗癌活性物为98%含量的d‑柠檬烯；所述增效剂1为分子量为800~1500的壳寡糖；所述增效剂2为非离子型NSF‑5系列植物多烯酚聚氧乙烯醚。
【技术特征摘要】
1.一种d-柠檬烯抗癌增效组合物，其特征在于：包括如下重量百分比配方：抗癌活性物：0.5~10%，增效剂1：0.1~5‰，增效剂2：0.5~10%，其余为：去离子水或蒸馏水；其中，所述抗癌活性物为98%含量的d-柠檬烯；所述增效剂1为分子量为800~1500的壳寡糖；所述增效剂2为非离子型NSF-5系列植物多烯酚聚氧乙烯醚。2.根据权利要求1所述的d-柠檬烯抗癌增效组合物，其特征在于：包括如下重量百分比配方：抗癌活性物：0.5%，增效剂1：0.2‰，增效剂2：0.5%，去离子水：99....
【专利技术属性】
技术研发人员：王渊，王桂琴，王毅，张帆，蔡红艳，王雪平，冯帅，张永光，
申请(专利权)人：山西医科大学，
类型：发明
国别省市：山西,14
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