FA-F127-PCL叶酸靶向共聚物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种含有叶酸靶向基团的、由聚氧乙烯‑氧丙烯‑氧乙烯作为亲水链段、聚己内酯作为疏水链段的两亲性嵌段具有新型化学结构的聚合物叶酸‑聚氧乙烯‑聚氧丙烯‑聚氧乙烯‑聚己内酯(FA‑F127‑PCL)，以及该化合物的制备方法。本发明专利技术化合物具有良好的缓释效果。

FA F127 PCL folate copolymer and preparation method and application thereof

The invention discloses a folic acid containing target group, polyoxyethylene propylene oxide ethylene oxide as a hydrophilic segment, polycaprolactone as hydrophobic segments of two amphiphilic diblock polymers with novel chemical structure of folic acid polyoxyethylene polyoxypropylene polyoxyethylene polycaprolactone (FA F127 PCL), and a method for preparing the compound. The compound has good sustained-release effect.

【技术实现步骤摘要】
FA-F127-PCL叶酸靶向共聚物及其制备方法与应用
本专利技术属于生物医药领域，涉及一种靶向高分子药物载体及其制备方法。
技术介绍
两亲性高分子，尤其是生物相容的两亲性高分子(也就是含有亲水性和疏水性两种链段的高分子)被广泛研究，因为它们可以在水中通过疏水链段间的疏水作用等自聚集形成具有各种不同形态的纳米粒子，这种性质使得两亲性高分子在药物释放体系有很大的应用前景，如可控释放体系、靶向释放体系等。我们知道，目前大部分药物(如抗癌药物)是疏水性的，也就是不溶于水，很容易被人体内的一系列排斥反应排出体外，如药物抵制作用、酶降解作用等等，这大大限制了癌症等疾病治疗的有效性。而两亲性高分子形成的纳米粒子可以作为药物载体，把药物包埋在疏水核内，表面由纳米粒子的亲水层保护，这样药物便可被输送到病变部位(如肿瘤等)，从而起到有效治疗癌症的作用。对高分子纳米粒子的表面进行靶向性基团的修饰，可以提高药物输送的选择性和疾病治疗的有效性。因为靶向型纳米粒子将包埋的药物定向输送到肿瘤等病变部位，这样既可以减少药物对正常细胞的损害，又可因提高药物利用率而减少药物的用量，从而减轻药物对人体产生的副作用。因此，靶向型高分子纳米粒子在药物释放体系有很大的应用前景。叶酸是细胞(尤其是增生细胞)所必需的维生素，参与多种代谢途径的一碳转移反应。叶酸的细胞转运通过两种跨膜蛋白，即低亲和力的还原性叶酸载体和高亲和力的叶酸受体(folatereceptor，FR)来完成。目前已证实FR在多种肿瘤细胞表面过度表达，而在多数正常组织中的表达仅限于一些难于进入血液循环的上皮细胞顶膜。正因为FR表达的特性，FR天然配体—叶酸(folicacid,FA)成为将药物靶向到肿瘤细胞的重要分子，叶酸具有与叶酸受体的高亲和力(Kd＝l×10-10mol·L-1)、低免疫原性、易于修饰、体积小(Mw＝441.4)、高度化学稳定性和生物学稳定性，高的肿瘤渗透性、易与药物结合，与有机和水性溶剂的相容性以及低成本等优点，使叶酸介导肿瘤靶向的研究得到迅速发展。近年来，国内外对叶酸靶向的高分子药物释放体系已有较广泛地研究。Park等合成的叶酸修饰后的包埋紫杉醇的叶酸-聚己内酯-聚乙二醇(FA-PCL-PEO)纳米粒子比PCL-PEO纳米粒子对癌细胞有更高的细胞毒性(Park,E.K.；etal.JournalofControlledRelease2005,109,158)。
技术实现思路
本专利技术的目的就是提供一种新型化学结构的聚合物，具有药物靶向载体作用。本专利技术的含叶酸靶向高分子药物载体，含有叶酸靶向基团的、由聚氧乙烯-氧丙烯-氧乙烯(PEO100-PPO65-PEO100,PluronicF127)作为亲水链段、聚己内酯[polycaprolactone,PCL]作为疏水链段的两亲性嵌段共聚物叶酸-聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯-聚己内酯(FA-F127-PCL)，其化学结构式如下：其中n代表己内酯的重复单元的数目。本专利技术其合成路线如图1，具体制备方法是：(1)取0.71g(1.61mmol)的FA与0.36g(1.76mmol)的1,3-二环己基碳二亚胺(DCC)混合加入搅拌中的70ml的无水DMSO，在室温下搅拌48小时。再将干燥后的20g的F127与0.20mg(1.60mmol)的4-二甲氨基吡啶(DMAP)加入其中，再在25℃室温下搅拌48小时，之后在5000r/min转速下离心5min，取上清液在普通DMSO环境下用3500截留分子量的透析袋透析3小时，之后再用二蒸水透析24小时。旋干后用CH2Cl2溶解后沉入冻乙醚之中纯化两次，取沉淀烘干后制得FA-F127-OH；(2)用FA-F127-OH做大分子引发剂和辛酸亚锡为催化剂，在无水、无氧的条件下，引发环状单体己内酯(caprolactone,CL)进行开环聚合反应，最终得到所需的共聚物。具体合成方法为：反应瓶通过抽真空-通氩气除氧除湿后，在氩气条件下加入FA-F127-OH、己内酯和辛酸亚锡，己内酯的量为FA-F127-OH重量的40–50％，辛酸亚锡的量为己内酯重量的0.1-0.15％，将反应物加热至140-160℃，搅拌下，反应持续15-17小时；将反应物二氯甲烷溶解，然后沉入甲醇中，有白色物质沉出，过滤；然后再用二氯甲烷溶解聚合物，并沉入甲醇中，过滤，干燥，得到FA-F127-PCL共聚物。本专利技术还涉及FA-F127-PCL共聚物在包埋抗癌药物紫杉醇中的应用。包埋紫杉醇的方法是：1、包埋紫杉醇的FA-F127-PCL纳米粒子的制备称取15mgFA-F127-PCL聚合物和5mg紫杉醇(Paclitaxel，PTX)于具塞试管中，加3ml四氢呋喃(THF)进行溶解。再将该THF溶液分散于15g超纯水中，倒入透析袋中透析24h，以除去未包封的紫杉醇。2、紫杉醇包埋率和载药量的测定取0.3ml步骤1中的纳米粒子水溶液冻干，然后加入0.7ml乙腈-水(7︰3v/v)混合溶液溶解，接着用高效液相色谱(HPLC)进行测试，测试条件如下：C18柱，以1.0ml·min-1流速的乙腈-水(7:3v/v)为流动相，在227nm处检测峰面积，通过与标准品的主峰面积相比较，计算样品中的紫杉醇浓度。包埋率的计算公式如下：3、包埋紫杉醇的FA-F127-PCL纳米粒子的释放取10ml透析液，放置在对应的透析袋中；将透析袋(分子截留量3.5kDa)放在含有100mlPBS溶液的广口瓶中。广口瓶放在恒温震荡仪中，保持瓶中溶液在37.5℃震荡。在设定的时间点，从广口瓶中取5mL释放外液，再补充5ml的PBS的缓冲液，保持总量为100mL。释放液中紫杉醇的含量用HPLC法测定，测试条件同上。本专利技术涉及的FA-F127-PCL两亲性嵌段共聚物是一个具有新型化学结构的聚合物。并且与现有的FA-F127-PLA共聚物相比，具有更好的药物缓释效果。附图说明图1本专利技术聚合物FA-F127-PCL的合成路线。图2本专利技术聚合物FA-F127-PCL的紫外吸收图。图3包埋紫杉醇的FA-F127-PCL纳米粒子的体外释放图。具体实施方式实施例1本专利技术的FA-F127-PCL共聚物的制备方法如下：(1)取0.71g(1.61mmol)的FA与0.36g(1.76mmol)的1,3-二环己基碳二亚胺(DCC)混合加入搅拌中的70ml的无水DMSO，在室温下搅拌48小时。再将干燥后的20g的F127与0.20mg(1.60mmol)的4-二甲氨基吡啶(DMAP)加入其中，再在25℃室温下搅拌48小时，之后在5000r/min转速下离心5min，取上清液在普通DMSO环境下用3500截留分子量的透析袋透析3小时，之后再用二蒸水透析24小时。旋干后用CH2Cl2溶解后沉入冻乙醚之中纯化两次，取沉淀烘干后制得FA-F127-OH；所得共聚物称重为18.0g,产率为81.7％。(2)用FA-F127-OH做大分子引发剂和辛酸亚锡为催化剂，在无水、无氧的条件下，引发环状单体己内酯(caprolactone,CL)进行开环聚合反应，最终得到所需的共聚物。具体合成方法为：反应瓶通过抽真空-通氩气除氧除湿后，在氩气条件下加入FA-F127-OH(5g)、己内酯(2.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种聚合物，其分子结构式如下：

【技术特征摘要】
1.一种聚合物，其分子结构式如下：2.根据权利要求1所述聚合物，其制备方法包括以下步骤：(1)取0.71g(1.61mmol)的FA与0.36g(1.76mmol)的1,3-二环己基碳二亚胺(DCC)混合加入搅拌中的70ml的无水DMSO，在室温下搅拌48小时；再将干燥后的20g的F127与0.20mg(1.60mmol)的4-二甲氨基吡啶(DMAP)加入其中，再在25℃室温下搅拌48小时，之后在5000r/min转速下离心5min，取上清液在普通DMSO环境下用3500截留分子量的透析袋透析3小时，之后再用二蒸水透析24小时；旋干后用CH2Cl2溶解后沉入冻乙醚之中纯化两次，取沉淀烘干后制得FA-F127-OH；(2)用FA-F127-OH做大分子引发剂，辛酸亚...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊向源，谢爽，李资玲，龚妍春，李玉萍，
申请(专利权)人：江西科技师范大学，
类型：发明
国别省市：江西,36