一种从北葶苈子中提取硫苷化合物的方法及其应用技术

本发明专利技术涉及从北葶苈子中提取硫苷化合物的方法及其应用，可有效挖掘北葶苈子的新作用，其解决的技术方案是，硫苷化合物分子式为C

A method for extracting sulfur compounds from North Tinglizi and its application in

The invention relates to a method for extracting sulfur compounds from North Tinglizi and its application, new effective mining north of Tinglizi, its technical solution is the molecular formula C glucosinolate compounds

【技术实现步骤摘要】
一种从北葶苈子中提取硫苷化合物的方法及其应用
本专利技术涉及医药领域，特别是一种从北葶苈子中提取硫苷化合物的方法及其应用。
技术介绍
葶苈子始载于《神农本草经》，列为草部下品，为常用中药材。2015版《中国药典》收录的“葶苈子”有南北之分，其中十字花科植物独行菜LepidiumapetalumWilld.的干燥成熟种子习称“北葶苈子”，而播娘蒿Descurainiasophia(L.)WebbexPrantl.的干燥成熟种子习称“南葶苈子”。该药味辛、苦，性大寒，归肺与膀胱经，具有宣泄平喘、行水消肿的功效。南葶苈子研究较多，其化学成分主要有黄酮类、硫苷类、异硫氰酸类等，而北葶苈子研究较少。据记载，北葶苈子具有强心作用，其化学成分主要是黄酮类。而从葶苈子的水提物中分离硫苷化合物以及研究其应用至今还未见有这方面的相关报道。
技术实现思路
针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种从北葶苈子中提取硫苷化合物的方法，可有效挖掘北葶苈子的新作用。本专利技术解决的技术方案是，从北葶苈子中提取硫苷化合物的方法：取炮制后的北葶苈子，加北葶苈子10倍重量的水提取三次，每次1.5h，提取液减压浓缩至浸膏状，浓缩的浸膏用北葶苈子2-3倍重量的体积浓度为80％的乙醇醇沉，将上清液离心过滤，浓缩至无醇味，上DianionHP-20柱(高多孔性苯乙烯的吸附/脱附树脂)，先用水洗脱，再用20％乙醇洗脱，得到20％乙醇洗脱部位A，20％乙醇洗脱部位A用水离散溶解，离心过滤，浓缩后通过ToyopearlHW-40柱色谱，依次用水和10％含水甲醇洗脱，得到水洗脱组分B1和10％甲醇洗脱组分B2，组分B2经ODS-18反相柱色谱，分别用水和10％含水甲醇洗脱洗脱，得到组分C1和C2，组分C2用甲醇溶解，静置24h，析出无色结晶，将上层溶液吸出，干燥，再次用甲醇溶解，静置24h，析出无色结晶，如此反复操作4次，合并得到的无色结晶，将无色结晶用甲醇溶解，用半制备HPLC分离，色谱柱为YMC-PackODS-A色谱柱(规格型号：250×10mm,粒径5μm,孔径12nm)，流动相为甲醇：水(v/v)＝32:68，得到硫苷化合物cis-desulfoglucotropaeolin。硫苷化合物(cis-desulfoglucotropaeolin)，分子式为C14H19NO6S[M+H]+m/z330.1013，其结构式如下：本专利技术从北葶苈子水提物中分离得到硫苷化合物cis-desulfoglucotropaeolin，含量较高，且硫苷化合物cis-desulfoglucotropaeolin对双氧水(H2O2)损伤大鼠心肌细胞H9c2具有一定的保护作用，能极显著提高细胞活力，为制备心肌保护类药物提供了新的途径。附图说明图1为本专利技术cis-desulfoglucotropaeolin的1H-NMR谱(DMSO-d6)。图2为本专利技术cis-desulfoglucotropaeolin的13C-NMR谱(DMSO-d6)。图3为本专利技术cis-desulfoglucotropaeolin的1H-1HCOSY谱。图4为本专利技术cis-desulfoglucotropaeolin的HSQC谱。图5为cis-desulfoglucotropaeolin的HMBC谱。图6为本专利技术cis-desulfoglucotropaeolin的NOESY谱。图7为本专利技术cis-desulfoglucotropaeolin的MS谱。图8为本专利技术cis-desulfoglucotropaeolin的UV谱。图9为本专利技术cis-desulfoglucotropaeolin的IR谱。图10为本专利技术硫苷化合物cis-desulfoglucotropaeolin对H2O2诱导的H9c2大鼠心肌细胞存活率的影响(n＝6)。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的具体实施方式作进一步详细说明。实施例1取炮制后的北葶苈子8kg，加北葶苈子10倍重量的水提取三次，每次1.5h，提取液减压浓缩至2000ml浸膏状，浓缩的浸膏用北葶苈子4倍体积的体积浓度为80％的乙醇醇沉，醇沉5次，将上清液离心过滤，浓缩至无醇味(约1500ml)，上DianionHP-20柱(高多孔性苯乙烯的吸附/脱附树脂)，先用水洗脱，除去大部分多糖，再用20％乙醇洗脱，得到20％乙醇洗脱部位A(71.2g)，20％乙醇洗脱部位A用水离散溶解，离心过滤，浓缩后(约30ml)通过ToyopearlHW-40柱色谱，依次用水和10％含水甲醇洗脱，得到水洗脱组分B1(40.2g)和10％甲醇洗脱组分B2(12.8g)，组分B2经ODS-18反相柱色谱，分别用水和10％含水甲醇洗脱洗脱，得到组分C1(5.0g)和C2(5.2g)，组分C2用甲醇溶解，静置24h，析出无色结晶，将上层溶液吸出，干燥，再次用甲醇溶解，静置24h，析出无色结晶，如此反复操作4次，合并得到的无色结晶，将无色结晶用甲醇溶解，用半制备HPLC分离，YMC-PackODS-A色谱柱(规格型号：250×10mm,粒径5μm,孔径12nm)，流动相为甲醇：水(v/v)＝32:68，得到硫苷化合物cis-desulfoglucotropaeolin(质量m＝2.0g,保留时间tR＝26.2min)。实施例2取炮制后的北葶苈子5kg，加北葶苈子10倍重量的水提取三次，每次1.5h，提取液减压浓缩至1500ml浸膏状，浓缩的浸膏用北葶苈子4倍体积的体积浓度为80％的乙醇醇沉，醇沉5次，将上清液离心过滤，浓缩至无醇味(约1200ml)，上DianionHP-20柱(高多孔性苯乙烯的吸附/脱附树脂)，先用水洗脱，再用20％乙醇洗脱，得到20％乙醇洗脱部位A(45.3g)，20％乙醇洗脱部位A用水离散溶解，离心过滤，浓缩后(约25ml)通过ToyopearlHW-40柱色谱，依次用水和10％含水甲醇洗脱，得到水洗脱组分B1(25.6g)和10％甲醇洗脱组分B2(9.1g)，组分B2经ODS-18反相柱色谱，分别用水和10％含水甲醇洗脱洗脱，得到组分C1(3.3g)和C2(3.4g)，组分C2用甲醇溶解，静置24h，析出无色结晶，将上层溶液吸出，干燥，再次用甲醇溶解，静置24h，析出无色结晶，如此反复操作4次，合并得到的无色结晶，将无色结晶用甲醇溶解，用半制备HPLC分离，色谱柱为YMC-PackODS-A色谱柱(规格型号：250×10mm,粒径5μm,孔径12nm)，流动相为甲醇：水(v/v)＝32:68，得到硫苷化合物cis-desulfoglucotropaeolin(1.3g)。实施例3取炮制后的北葶苈子10kg，加北葶苈子10倍重量的水提取三次，每次1.5h，提取液减压浓缩至2500ml浸膏状，浓缩的浸膏用北葶苈子4倍体积的体积浓度为80％的乙醇醇沉，醇沉5次，将上清液离心过滤，浓缩至无醇味(约2000ml)，将上清液离心过滤，浓缩至无醇味，上DianionHP-20柱(高多孔性苯乙烯的吸附/脱附树脂)，先用水洗脱，再用20％乙醇洗脱，得到20％乙醇洗脱部位A(88.9g)，20％乙醇洗脱部位A用水离散溶解，离心过滤，浓缩(40ml)后通过ToyopearlH本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从北葶苈子中提取的硫苷化合物，其特征在于，分子式为C

【技术特征摘要】
1.一种从北葶苈子中提取的硫苷化合物，其特征在于，分子式为C14H19NO6S[M+H]+m/z330.1013，其结构式如下：2.权利要求1所述的从北葶苈子中提取的硫苷化合物的提取方法，其特征在于，取炮制后的北葶苈子，加北葶苈子10倍重量的水提取三次，每次1.5h，提取液减压浓缩至浸膏状，浓缩的浸膏用北葶苈子2-3倍重量的体积浓度为80％的乙醇醇沉，将上清液离心过滤，浓缩至无醇味，上DianionHP-20柱，先用水洗脱，再用20％乙醇洗脱，得到20％乙醇洗脱部位A，20％乙醇洗脱部位A用水离散溶解，离心过滤，浓缩后通过ToyopearlHW-40柱色谱，依次用水和10％含水甲醇洗脱，得到水洗脱组分B1和10％甲醇洗脱组分B2，组分B2经ODS-18反相柱色谱，分别用水和10％含水甲醇洗脱洗脱，得到组分C1和C2，组分C2用甲醇溶解，静置24h，析出无色结晶，将上层溶液吸出，干燥，再次用甲醇溶解，静置24h，析出无色结晶，如此反复操作4次，合并得到的无色结晶，将无色结晶用甲醇溶解，用半制备HPLC分离，色谱柱为YMC-PackODS-A色谱柱，流动相为甲醇：水＝32:68，得到硫苷化合物。3.根据权利要求2所述的从北葶苈子中提取的硫苷化合物的提取方法，其特征在于，取炮制后的北葶苈子8kg，加北葶苈子10倍重量的水提取三次，每次1.5h，提取液减压浓缩至270g浸膏状，浓缩的浸膏用20L体积浓度为80％的乙醇醇沉，将上清液离心过滤，浓缩至无醇味，上DianionHP-20柱，先用水洗脱，除去大部分多糖，再用20％乙醇洗脱，得到20％乙醇洗脱部位A，20％乙醇洗脱部位A用水离散溶解，离心过滤，浓缩后通过ToyopearlHW-40柱色谱，依次用水和10％含水甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑晓珂，李孟，杨方方，冯卫生，张志广，张靖柯，吕锦锦，赵璇，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：河南,41