2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮化合物及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种含噻唑杂环类化合物，该化合物是2‑(4‑三氟甲基苯亚胺基)‑5‑(2‑萘基亚甲基)噻唑烷‑4‑酮，简称TNTO，其化学结构如通式(I)所示。本发明专利技术还公开了所述化合物作为芳香烃受体激动剂的应用。实验证实，本发明专利技术的含噻唑杂环类化合物在10μM的浓度下能显著上调小鼠肝癌细胞中芳香烃受体下游靶基因的相关外源物质代谢酶CYP1A1的基因、蛋白表达，提示该化合物为芳香烃受体的激动剂，有望成为潜在的以芳香烃受体为治疗肿瘤靶点的药物，具有广泛的临床应用前景和经济开发价值。

2 (4 three trifluoromethyl benzene imidogen) 5 (2 naphthyl Ya Jiaji) thiazolidines 4 ketone compound and its application

The invention discloses a thiazole heterocyclic compound, the compound is 2 (4 three trifluoromethyl benzene imidogen) 5 (2 naphthyl Ya Jiaji) 4 thiazolidine ketone, referred to as TNTO, its chemical structure as shown in the general formula (I). The invention also discloses the application of said compound as an aromatic hydrocarbon receptor agonist. The experiment confirmed that the expression of gene and protein of the present invention containing thiazole heterocyclic compounds to exogenous substances AHR significantly up-regulated murine hepatoma cells downstream target genes and metabolic enzyme CYP1A1 in concentration of 10 M, suggesting that this compound is aromatic hydrocarbon receptor agonist, is expected to become the potential to aromatic hydrocarbon receptor drug treatment of tumor targeting, has clinical application prospect and extensive economic development value.

【技术实现步骤摘要】
2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮化合物及应用
本专利技术涉及一种含噻唑杂环类化合物及其应用，尤其涉及一种2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮化合物及其作为芳香烃受体激动剂的应用；属医药化学领域。
技术介绍
芳香烃受体(arylhydrocarbonreceptor,AhR)是碱性螺旋-环-螺旋(basichelix-loop-helix,bHLH)超亚家族bHLH-PAS(Bhlh-PER-ARNT-SIM)成员之一，是该家族中唯一可以被配体激活的受体。进化分析显示AhR基因在哺乳动物、两栖动物、爬行动物和鸟类中都有存在。在人体的肝、肺、肾、胎盘、扁桃体、B淋巴细胞等各种组织和细胞中也都有存在。AhR作为一种配体激活转录因子，主要调控细胞色素P-450酶系家族Ⅰ相(CYP1)和一些Ⅱ相代谢酶的表达，参与一些药物和毒物的代谢过程。同时，AhR还具有许多内源性功能，如调控细胞周期、免疫应答、细胞分化和昼夜节律等。有研究表明芳香烃受体可以通过参与细胞增殖与凋亡、免疫代谢等过程，影响肿瘤的生长、生活、迁移和侵袭。AhR对肿瘤的调控具有双重作用，在多环芳烃、卤代芳烃等配体作用下，AhR可促进肿瘤生成；但苯并噻唑、氨基黄酮等化合物激活AhR后，可发挥抑癌功能，因此以芳香烃受体为作用靶点，寻找含有活性氮类的化合物不失为一种寻找抗肿瘤药物的手段。针对上述内容，要寻找以芳香烃受体为治疗肿瘤靶点的化合物，首先需要确定该化合物是否为芳香烃受体的激动剂。通过激活芳香烃受体的信号通路，可以激活下游靶基因(如CYP1A1、CYP1A2、CYP1B1)的相关外源物质代谢酶，可以促进对外源性毒物的代谢，从而保护机体不受外源物质影响。同时间接干预与芳香烃受体相关抗肿瘤信号通路，防止肿瘤的发生。由于芳香烃受体具有一个较为宽松的配体结合口袋，多种内源性和外源性的化合物都被确定为芳香烃受体的配体。确定一个化合物是否为芳香烃受体的激动剂，其方法主要通过检测其通过信号通路对下游相关基因(CYP1A1、CYP1B1等)和相关蛋白表达水平(CYP1A1、CYP1B1等)的上调来进行确定。但经权威机构检索查新发现：有关2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮化合物及其作为芳香烃受体激动剂的应用目前国内外尚未见报导。
技术实现思路
针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种新型含噻唑杂环类化合物即2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮化合物及其作为芳香烃受体激动剂的应用。本专利技术所述含噻唑杂环类化合物，其特征在于：该化合物是2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮，简称TNTO(2-(4-trifluoromethyl-phenylimino)-5-(2-naphthyl)methylene-thiazolidin-4-one)，其化学结构如通式(I)所示：上述式(I)化合物的制备方法，是由4-三氟甲基苯胺为起始原料，通过与硫氰酸铵反应生成取代苯硫脲，再经过与乙酸乙酯的关环反应，形成噻唑杂环，最后与取代苯甲醛发生缩合反应得到最终产物，其具体合成步骤见实施例1。本专利技术所述含噻唑杂环类化合物作为芳香烃受体激动剂的应用，其中所述化合物优选是2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮。实验证实：上述2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮，即TNTO化合物在激活芳香烃受体方面具有明显作用，此为新型肿瘤治疗药物的开发提供了美好的前景。为了更好的理解本专利技术的实质及本专利技术所述化合物的作用，下面结合TNTO化合物的实验及结果，来进一步阐述其在激活芳香烃受体中的作用。HepaWT细胞的制备：以常规方法培养HepaWT细胞，收集生长状态良好的且处于对数期的细胞，备用。1.10μM的TNTO化合物作用于HepaWT细胞24小时后，实时荧光定量PCR(RT-PCR)分析CYP1A1的表达(图1)。显示2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮化合物引起CYP1A1基因表达量上调。2.10μM的TNTO化合物作用于HepaWT细胞24小时后，蛋白质印迹法(WesternBlot)分析CYP1A1蛋白的表达(图2)。显示2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮化合物引起CYP1A1蛋白表达量上调。通过上述实验及其结果，可以得到以下结论：本专利技术所述的化合物2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮能显著引起CYP1A1相关基因和蛋白的表达上调，激活芳香烃受体信号通路。提示这种含有活性氮类的芳香烃受体激动剂对寻找以芳香烃受体为靶点的抗肿瘤药物具有重要意义。本专利技术公开的新型含噻唑杂环类化合物即2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮化合物及其作为芳香烃受体激动剂的应用预示该化合物有望成为以芳香烃受体为靶点的治疗肿瘤的有潜力药物，具有很大的开发应用前景。附图说明图1为HepaWT细胞中TNTO(10μM)对CYP1A1基因表达的影响。其中，DMSO(0.1％)为阳性对照，TCDD(1nM)为阴性对照，TNTO(10μM)化合物。图2为HepaWT细胞中TNTO(10μM)对CYP1A1蛋白表达的影响。其中，DMSO(0.1％)为阳性对照，TCDD(1nM)为阴性对照，TNTO(10μM)化合物。具体实施方式实施例1：2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮的制备按HCl:H2O(1:4)的比例配成盐酸溶液。称取11.4g(150mmol)硫氰酸铵溶于50mL盐酸溶液中，加入12.4mL(100mmol)4-三氟甲基苯胺,搅拌条件下加热到85℃，混合物变澄清，反应12小时候后，TLC监测反应，反应结束后，将混合物冷却到室温，有黏稠的油状液体出现，用乙酸乙酯萃取，萃取液用10％盐酸溶液，氯化钠饱和溶液，水依次洗涤，萃取液减压蒸除溶剂，得到4-三氟甲基苯硫脲。将4-三氟甲基苯硫脲0.906mL(6.0mmol)，无水乙酸钠2479mg(30mmol)，加入到20mL乙醇中,搅拌条件下，加入氯代乙酸乙酯1.28mL(12mmol)，然后在60℃下加热6个小时，TLC检测反应,反应结束后冷却到室温，出现沉淀。将反应液过滤,固体用乙醇洗涤，得到部分粗产物，滤液减压蒸馏，然后用乙酸乙酯和水萃取，有机相合并得到更多的粗产物。粗产物在乙酸乙酯中重结晶，得到产物2-(4-三氟甲基苯基)氨基-1,3-噻唑-4-酮。称取2-(4-三氟甲基苯基)氨基-1,3-噻唑-4-酮130.1mg(0.5mmol)溶于3mL乙醇中，加入2-萘甲醛81.2mg(0.6mmol)，哌啶100μL，在平行合成仪上，60℃恒温振荡，反应24小时。反应通过TLC监测，反应完毕后冷却到室温，在反应过程中有大量沉淀生成，经过分析表征，沉淀即为产物2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮。过滤，用乙酸乙酯，乙醇，石油醚依次进行洗涤，若没有沉淀生成，将溶剂蒸干，按1：2配比加入乙醇(乙酸乙酯)或者本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含噻唑杂环类化合物，其特征在于：所述化合物是2‑(4‑三氟甲基苯亚胺基)‑5‑(2‑萘基亚甲基)噻唑烷‑4‑酮，简称TNTO，其化学结构如通式(I)所示：

【技术特征摘要】
1.一种含噻唑杂环类化合物，其特征在于：所述化合物是2-(4-三氟甲基苯亚胺基)-5-(2-萘基亚甲基)噻唑烷-4-酮，简称TNTO，其化学结构如通式(I...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫兵，苗潇元，赵斌，张嵩岩，周宏钰，王深清，刘寅，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东,37