肿瘤标志物CEA快速检测试纸制造技术

肿瘤标志物CEA快速检测试纸，本发明专利技术涉及肿瘤标志物CEA快速检测试纸。本发明专利技术的目的是为了解决现有的临床上肿瘤标志物CEA长期跟踪检测不易患者自行操作，患者经济压力大，操作不易且耗时长的问题。本发明专利技术肿瘤标志物CEA快速检测试纸由样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水纸和PVC板组成。本发明专利技术肿瘤标志物CEA快速检测试纸检测灵敏度高，特异性强，且简单，高效。本发明专利技术应用于检测试纸领域。

【技术实现步骤摘要】
肿瘤标志物CEA快速检测试纸
本专利技术涉及肿瘤标志物CEA快速检测试纸。
技术介绍
癌症已经取代心血管疾病成为世界上导致人类死亡的首要原因，绝大多数癌症在癌症发生早期是可以被治愈的。因此，早期筛查、早期诊断具有极其重要的意义。CEA是被广泛应用于多种癌症检测的肿瘤标志物之一，也是医院进行绝大多数肿瘤检测时必检标志物之一。正常情况下，CEA经胃肠道代谢，而肿瘤状态时的CEA则进入血和淋巴循环，引起血清CEA异常增高。CEA值升高，表明有病变残存或进展。CEA常用于甲状腺癌、肺癌、胃癌、结直肠癌、食管癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌、子宫颈癌等癌症的疗效观察和预后评估。一般CEA的参考值为小于2.5μg/L，当CEA浓度持续不断升高，或其数值超过正常5-6倍者，则说明有病变残存或进展，亦或是预后不良，可认为有转移性病变。因此，连续随访定量检测血清CEA含量，有助于相关癌症患者对自身疾病的掌控，对肿瘤病情判断更具有意义。肿瘤标志物需要长期跟踪检测，目前，在临床肿瘤诊断中肿瘤标志物的检测一般采用化学发光方法，该方法检查费用相对昂贵，耗时长，需配备专业的仪器和专业的技术人员，操作性差，给临床患者的长期跟踪检测造成困扰。因此准确、快速、便捷的操作是目前临床上亟待解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有的临床上肿瘤标志物CEA长期跟踪检测不易患者自行操作，患者经济压力大，操作不易且耗时长的问题，提供肿瘤标志物CEA快速检测试纸。本专利技术肿瘤标志物CEA快速检测试纸由样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水纸和PVC板组成；玻璃纤维膜上涂覆有标记CEA抗体的胶体金溶液，其中胶体金溶液是由CEA抗体包被到胶体金颗粒上制成，未包被CEA抗体的胶体金颗粒的粒径为20.15nm-23.89nm，已包被CEA抗体的胶体金颗粒的粒径为35.42nm-38.54nm；硝酸纤维素膜上设有T1区、T2区和质控区，硝酸纤维素的T1区固定有0.63ng的CEA抗原，T2区固定有0.12ng的CEA抗原，质控区固定有CEA兔抗鼠二抗0.5ng。竞争ELISA法与胶体金技术结合，适合对小分子的CEA抗原进行更为灵敏准确的检测。本专利技术针对此设计开发了肿瘤标志物CEA竞争性检测试纸，该试纸具有快速、准确、易自行操作的特点，本专利技术建立的试纸可实现对血液中CEA在5min内进行快速检测。因此，本研究的成果将填补利用竞争性ELISA方法对肿瘤标志物CEA快速准确检测试纸上的空白，为临床医学提供重要的检测手段，尤其在配合其他标志物联合检测将更有意义。本专利技术的有益效果：用此方法建立的肿瘤标志物CEA快检测试纸具有以下特点：(1)两条检测带，检测结果分为没有风险、有一定风险、非常危险，更加清楚明白；(2)检测快速，5分钟可检测出结果；(3)易操作，患者可自行操作，无需专业仪器和专业技术人员；(4)需血量少，只需一滴血清，减少患者抽血的痛楚；(5)成本低廉，平均成本低于临床上检测费用；(6)可实现患者长期跟踪检测的需要，并且本专利技术通过平衡灵敏度及特异性的关系，选择最适胶体金颗粒粒径为20-24nm，制备的肿瘤标志物CEA快速检测试纸检测灵敏度高，特异性强；(7)首次专利技术了一个利用竞争ELISA技术检测CEA的试纸，且简单，高效。附图说明图1为本专利技术肿瘤标志物CEA快速检测试纸的结构示意图，其中a为样品垫、b为玻璃纤维膜、c为T1检测带、d为T2检测带、e为质控带、f为吸水纸、g为PVC板、h为硝酸纤维素膜、i为血清样本,箭头方向为样品流动方向。具体实施方式具体实施方式一：本实施方式肿瘤标志物CEA快速检测试纸由样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水纸和PVC板组成；玻璃纤维膜上涂覆有标记CEA抗体的胶体金溶液，其中胶体金溶液是由CEA抗体包被到胶体金颗粒上制成，未包被CEA抗体的胶体金颗粒的粒径为20.15nm-23.89nm，已包被CEA抗体的胶体金颗粒的粒径为35.42nm-38.54nm；硝酸纤维素膜上设有T1区、T2区和质控区，硝酸纤维素的T1区固定有0.63ng的CEA抗原，T2区固定有0.12ng的CEA抗原，质控区固定有CEA兔抗鼠二抗。本实施方式金标CEA抗体A、检测带T1及检测带T2中抗体/抗原量均不同用来检测2.5ng/mL和15ng/mL的阈值。本实施方式的CEA抗原购自中检所，货号为1821-0102。本实施方式测试原理：当样品垫端滴入一滴血清样品后，由于虹吸作用，血清样品将沿着该膜向前移动，样品中相应抗原与玻璃纤维膜中固定的一定量金标CEA抗体A结合，当剩余金标CEA抗体A移动至固定有CEA的检测带T1区域时，即与CEA发生特异性结合，该区域内的免疫金就会显示出红色条带，提示血液中的CEA蛋白含量小于15ng/mL，如果不显色，提示血液中的CEA蛋白含量大于15ng/mL。反应后，各种蛋白会随着血清溶液沿着NC膜继续向前移动，到固定有CEA的检测带T2区域时，当血清中的CEA蛋白含量大于2.5ng/mL时不显色，当血液中的CEA蛋白含量小于2.5ng/mL时，该区域内的免疫金就会显示出红色，由于毛细管作用，血液会继续沿着该膜向前移动，到固定有CEA二抗的质控带C带时，该区域会显色红色，提示试纸条工作正常，未失效，且全部显色反应时间在5min之内。本实施方式选择粒径为20.15nm-23.89nm的胶体金颗粒，胶体金颗粒越大，检测灵敏度越高，但特异性越差，假阳性严重；反之，胶体金颗粒越小，检测灵敏度越低，但特异性越强，假阳性较弱。因此，需根据结合蛋白大小及类型，选择最适胶体金粒径。本申请的胶体金标记的是CEA单抗，平衡灵敏度及特异性的关系，选择最适粒径为20-24nm。结果判定：当一滴血清中的CEA浓度小于2.5ng/mL时，试纸条三条带均显色，检测带T1、检测带T2、质控带；当一滴血清中的CEA浓度2.5ng/mL<CEA<15ng/mL时，试纸条有两条带显色，检测带T1和质控带；当一滴血清中的CEA浓度大于15ng/mL时，试纸条有一条带显色，质控带；当试纸条无条带显色，提示试纸条失效。竞争ELISA法与胶体金技术结合，适合对小分子的CEA抗原进行更为灵敏准确的检测。本实施方式针对此设计开发了肿瘤标志物CEA竞争性检测试纸，该试纸具有快速、准确、易自行操作的特点，本实施方式建立的试纸可实现对血液中CEA在5min内进行快速检测。因此，本研究的成果将填补利用竞争性ELISA方法对肿瘤标志物CEA快速准确检测试纸上的空白，为临床医学提供重要的检测手段，尤其在配合其他标志物联合检测将更有意义。本实施方式的有益效果：用此方法建立的肿瘤标志物CEA快检测试纸具有以下特点：(1)两条检测带，检测结果分为无患病风险、存在一定风险、非常危险，且可根据颜色强弱更进一步分析，更加清楚明白；(2)检测快速，5分钟可检测出结果；(3)易操作，患者可自行操作，无需专业仪器和专业技术人员；(4)需血量少，只需一滴血清，减少患者抽血的痛楚；(5)成本低廉，平均成本低于临床上检测费用；(6)可实现患者长期跟踪检测的需要，并且本专利技术通过平衡灵敏度及特异性的关系，选择最适胶体金颗粒粒径为20-24nm，制备的肿瘤标志物CEA快速检测试纸检测灵敏度本文档来自技高网...

【技术保护点】
肿瘤标志物CEA快速检测试纸，其特征在于肿瘤标志物CEA快速检测试纸由样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水纸和PVC板组成；玻璃纤维膜上涂覆有标记CEA抗体的胶体金溶液，其中胶体金溶液是由CEA抗体包被到胶体金颗粒上制成，未包被CEA抗体的胶体金颗粒的粒径为20.15nm‑23.89nm，已包被CEA抗体的胶体金颗粒的粒径为35.42nm‑38.54nm；硝酸纤维素膜上设有T1区、T2区和质控区，硝酸纤维素的T1区固定有0.63ng的CEA抗原，T2区固定有0.12ng的CEA抗原，质控区固定有CEA兔抗鼠二抗。

【技术特征摘要】
1.肿瘤标志物CEA快速检测试纸，其特征在于肿瘤标志物CEA快速检测试纸由样品垫、玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水纸和PVC板组成；玻璃纤维膜上涂覆有标记CEA抗体的胶体金溶液，其中胶体金溶液是由CEA抗体包被到胶体金颗粒上制成，未包被CEA抗体的胶体金颗粒的粒径为20.15nm-23.89nm，已包被CEA抗体的胶体金颗粒的粒径为35.42nm-38.54nm；硝酸纤维素膜上设有T1区、T2区和质控区，硝酸纤维素的T1区固定有0.63ng的CEA抗原，T2区固定有0.12ng的C...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄国庆，曹涤非，薛家莹，王雷，孙尧，吴琼，李瑶，宫禹，赵金海，
申请(专利权)人：黑龙江省科学院高技术研究院，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23