本发明专利技术属于医药技术领域。本发明专利技术涉及式(I)或式(II)所示四氢异喹啉类生物碱或其在药学上可接受的盐在制备α‑淀粉酶抑制剂方面的用途。经活性筛选试验证明，本发明专利技术的化合物具备同时抑制α‑淀粉酶及胰脂肪酶两种体外消化酶的活性和抑制3T3‑L1前脂肪细胞增殖、分化的活性，在糖尿病，高脂血症，肥胖或代谢综合征的临床研究方面具有应用前景。
New use of four hydrogen isoquinoline alkaloids
The invention belongs to the technical field of medicine. The present invention relates to type (I) or (II) shows four hydrogen isoquinoline alkaloids or pharmaceutically acceptable salts by use of alpha amylase inhibitor in the preparation of. The screening test showed that the compounds of the invention have also inhibition of alpha amylase and pancreatic lipase in vitro two digestive enzyme activity and inhibition of 3T3 L1 preadipocyte proliferation and differentiation activity in diabetes, hyperlipidemia, obesity or metabolic syndrome clinical research has application prospect.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及四氢异喹啉类生物碱在制备α-淀粉酶等体外消化酶抑制剂和3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化抑制剂方面的用途。
技术介绍
世界卫生组织已宣布肥胖是最大的全球成年人慢性疾病。肥胖的病因极为复杂，包括各种行为，环境因素，代谢和遗传因素等相互作用，普遍是由于能量摄入和消耗之间的长期失衡所导致。肥胖不仅影响美观，而且极易诱发心脑血管及其他代谢疾病并增大其风险，包括高血压，高血脂，冠状动脉疾病和2型糖尿病等，已逐渐成为世界性健康问题之一。α-淀粉酶是一种内切葡糖苷酶，作用于α-1，4-葡萄糖糖苷键。唾液、胰液中的α-淀粉酶可作用于食物中碳水化合物，将其分解为麦芽糖，糊精，低聚糖和葡萄糖等寡糖。寡糖经进一步分解为单糖后，被小肠上皮细胞吸收入血。α-淀粉酶抑制剂(α-AmylaseInhibitor，α-AI)调节血脂的机制可能与其抑制酶活性有关。α-AI能有效地抑制肠道唾液和胰液中α-淀粉酶的活性，阻碍碳水化合物的分解，减少葡萄糖过度产生和摄取，减少糖向脂肪转化，降低血脂含量，并可以使一部分脂类转化成糖以供机体生理的需要，使脂肪的合成减少。天然存在的α-淀粉酶抑制剂有3种类型，分别为：(1)微生物产带一个寡生物胺单位的含氮碳水化合物；(2)微生物产多肽，如：Paim(来自微生物的猪胰腺a-淀粉酶抑制剂)和Haim(微生物起源人α-淀粉酶抑制剂)；(3)在谷类、豆类以及其它较高等植物中发现的大分子蛋白质抑制剂(吕凤霞等，α-淀粉酶抑制剂的研究进展，食品科学，2002年第23卷第3期，第152-155页)。临床上将α-淀粉酶抑制剂用于防治高血糖。人工合成小分子α-淀粉酶抑制剂目前尚为空白。胰脂肪酶(pancreaticlipase，PL)是脂肪水解过程中的关键酶，由胰腺分泌到十二指肠，可水解50％～70％的食物脂肪成甘油一酯和脂肪酸。通过抑制PL的活性可阻止脂肪分解，进而使其直接通过消化道排出体外，从而达到减肥目的。同时，该酶抑制剂可直接在肠道内起作用，不需肠吸收，副作用较小，所以PL抑制类药物研发成为一种重要研究方向。3T3-L1前脂肪细胞在诸多文献中已有报道，其与高脂肥胖症状有着密切的联系。3T3-L1前脂肪细胞可分化为成熟的脂肪细胞，成熟脂肪细胞可大容量的储存脂滴，而脂肪细胞的数目多少正是肥胖疾病形成的关键因素之一，故抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化，干预成熟脂肪细胞的形成及数量，可对脂滴的储存量进行调控，从而达到减少脂肪储存、控制和治疗肥胖的目的。四氢异喹啉生物碱在自然界中数量多，分布广泛。特别的，苄基异喹啉类生物碱和苯乙基四氢异喹啉类生物碱在生源上来自于苯丙氨酸/酪氨酸衍生途径，结构特征鲜明，合成途径简捷。药理学研究已经证实该类化合物在降胆固醇、抗心律失常、抗高血压的心脑血管疾病，自身免疫调节，中枢神经系统等多方面具有较好的药理活性。本专利技术通过在C环上添加取代基的方法，获得一系列取代四氢异喹啉类生物碱，并将其研究开发为3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化抑制剂及α-淀粉酶抑制剂和胰脂肪酶抑制剂，在制备糖尿病，高脂血症，肥胖或代谢综合征药物的临床研究方面具有良好的应用前景。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供四氢异喹啉类生物碱及其衍生物的新用途。本专利技术提供了一种式(I)或式(II)所示四氢异喹啉类生物碱在制备α-淀粉酶抑制剂及3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化抑制剂的应用。本专利技术制备的四氢异喹啉类生物碱及其衍生物，经α-淀粉酶、胰脂肪酶和3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化抑制活性的筛选，发现大多数化合物具有良好的体外活性，可作为进一步开发为3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化抑制剂及α-淀粉酶抑制剂的前体物质。本专利技术的四氢异喹啉类生物碱及衍生物结构通式(I)或(II)表示：结构通式(I)或(II)中R1、R2、R3、R4、R5分别选自氢，卤，-R0，-OR0，-R0CO，-R0COO；所述R0为芳香烃或C1～C12的烷烃；R6选自氢，羟基；R7选自氨基，叔丁氧羰基氨基，9-芴甲氧羰基氨基，苄氧羰基氨基。特别的，结构通式(II)所涉及的化合物，其C环原料为含苯环氨基酸，符合苄基异喹啉类生物碱和苯乙基四氢异喹啉类生物碱生源合成的途径。根据本专利技术中所有四氢异喹啉类生物碱衍生物，其药学上可接受的盐包括通式(I)或(II)化合物与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、马来酸等。本专利技术中取代四氢异喹啉类生物碱的制备方法包括：醚化反应，碱水解反应，酰氯化反应，N-酰化反应，Bischler-Napieralski反应，亚胺还原反应等。本专利技术所制备的四氢异喹啉类生物碱在预防或治疗糖尿病，高脂血症，肥胖或代谢综合征方面疾病的用途，是以α-淀粉酶、胰脂肪酶抑制活性及3T3-L1前脂肪细胞的增值和分化抑制活性的筛选为载体，本专利技术首次建立了以肠道中α-淀粉酶和胰脂肪酶两种体外消化酶抑制活性的筛选，来评价化合物降糖降脂活性的方法。其中，α-淀粉酶抑制活性的筛选采用3，5-二硝基水杨酸法，胰脂肪酶采用PNPP显色法，对3T3-L1前脂肪细胞的增殖活性的影响是采用MTT法检测，对细胞分化的影响是通过油红O脂肪染色法检测。MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。油红O脂肪染色法，是一种检测组织或细胞内脂肪的方法。其检测原理是油红O可特异性的对脂肪进行染色，从而可在显微镜下进行直观观察。而染色后的油红O还可通过异丙醇等有机溶剂萃取出来，在520nm波长下进行吸光度值量化测定。3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞的过程中，一个很明显的标志就是细胞内有明显的脂滴富集，故对分化结束后的脂肪细胞进行油红O染色，再进行定量，从而可对总生物碱提取物对3T3-L1前脂肪细胞的分化影响进行检测。本专利技术所制备的四氢异喹啉类生物碱及其衍生物，经α-淀粉酶活性筛选，在100μmol/L浓度下均表现出明显的抑制活性，部分化合物在5μmol/L浓度下仍让表现出较明显活性。经胰脂肪酶活性筛选，在100μmol/L浓度下均表现出明显的抑制活性。3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化抑制活性筛选了部分化合物，表现出了极明显的增殖抑制作用及分化抑制作用。根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术技术思想的前提下，还可以做出其他多种形式的修改，替换和变更。以下通过实施例形式对上述内容作进一步补充说明，但不应该理解为本专利技术范围仅限于以下实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。具体实施方式实施例1本专利技术所筛选化合物的合成与鉴定所有试剂均为市售化学纯或分析纯。反应基本过程：四氢异喹啉类的全合成可以以苯乙胺和苯乙酸或氨基酸为中间体原料进行N-酰化缩合，再经Bischler-Napieralski反应得到二氢异喹啉类化合物，再经亚胺还原以及成盐反应，最终得到四氢异喹啉类生物碱盐。中间体原料可通过改变苯乙本文档来自技高网...
【技术保护点】
本专利技术旨在提供一种通式(I)或式(II)所示四氢异喹啉类生物碱及其衍生物或其在药学上可接受的盐在抑制α‑淀粉酶活性方面的用途：结构通式(I)或(II)中R1～R5分别选自氢，卤，‑R0，‑OR0，‑R0CO，‑R0COO；所述R0为芳香烃或C1～C12的烷基；R6选自氢，羟基；R7选自氨基，叔丁氧羰基氨基，9‑芴甲氧羰基氨基，苄氧羰基氨基。
【技术特征摘要】
1.本发明旨在提供一种通式(I)或式(II)所示四氢异喹啉类生物碱及其衍生物或其在药学上可接受的盐在抑制α-淀粉酶活性方面的用途：结构通式(I)或(II)中R1～R5分别选自氢，卤，-R0，-OR0，-R0CO，-R0COO；所述R0为芳香烃或C1～C12的烷基；R6选自氢，羟基；R7选自氨基，叔丁氧羰基氨基，9-芴甲氧羰基氨基，苄氧羰基氨基。2.根据权利要求1所述四氢异喹啉类生物碱及其衍生物，其特征在于：构建C环的起始原料可选自苯乙酸及其衍生物或含苯环氨基酸；优选地，含苯环氨基酸选自苯丙氨酸或酪氨酸。3.根据权利要求1-2所述的四氢异喹啉类生物碱，其在药学上可接受的盐包括上述化合物与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、马来酸等...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋建勤，李丹，吕昊宇，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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