短管兔耳草提取物其制备方法和应用、含其的皮肤外用剂技术

本发明专利技术公开了短管兔耳草提取物其制备方法和应用、含其的皮肤外用剂。本发明专利技术提供了短管兔耳草提取物的制备方法，方法1：将短管兔耳草粉末与体积浓度为50～80％的乙醇水溶液形成的混合物，在10～35℃下提取0.5～5小时，固液分离得滤液，滤液脱除溶剂，所述的短管兔耳草粉末与所述的乙醇水溶液的质量体积比为1：8～1：15mg/mL。方法2：将方法1得到的短管兔耳草粗提物，上样到大孔树脂填充柱，依次用溶剂Ⅰ、溶剂Ⅱ和溶剂Ⅲ洗脱，分别收集洗脱液，脱除溶剂，得到溶剂洗脱部位A、溶剂洗脱部位B和溶剂洗脱部位C。本发明专利技术的短管兔耳草提取物具有较好的美白、抗老化和抗氧化的功效，有良好的市场化前景。

Short tube rabbit ear grass extract, preparation method and application thereof, and external skin preparation containing the same

The invention discloses a short tube rabbit ear grass extract, a preparation method and an application thereof, and an external skin preparation containing the same. The present invention provides a method for preparation of extracts from Lagotis brevituba method 1: Lagotis brevituba powder and the volume concentration of a mixture of 50 ~ 80% aqueous ethanol formation, in 10 ~ 35 degrees from 0.5 to 5 hours, solid-liquid separation filtrate, the filtrate to remove the solvent quality, volume of ethanol water solution short tube pecteilis the powder and the ratio of 1:8 to 1:15mg/mL. Method 2: 1 methods obtained Lagotis brevituba crude extract sample to macroporous resin column, followed by solvent I, II and III solvent solvent elution, respectively collect the eluent, removing the solvent and solvent elution fractions of B C A, elution solvent elution solvent. The short ear extract of rabbit ear has the advantages of good whitening, anti-aging and antioxidation, and has a favorable market prospect.

【技术实现步骤摘要】
短管兔耳草提取物其制备方法和应用、含其的皮肤外用剂
本专利技术涉及短管兔耳草提取物其制备方法和应用、含其的皮肤外用剂。
技术介绍
1956年Harman提出了自由基衰老学说[Harman,D.Aging:Atheorybasedonfreeradicalandradiationchemistry.J.Gerontol.1956,11:289-300.]，认为过多的自由基是造成生物老化的重要原因。根据这一理论，体内过量的活性氧自由基与不饱和脂肪酸作用产生丙二醛等物质，丙二醛将与细胞膜上的蛋白质等作用生产褐色素，沉淀于皮肤便成为各种色斑。过量的自由基还能使皮肤内的胶原纤维、弹性纤维发生交联和变性、变脆、失去弹性，当皮肤水分不足时，容易使弹性纤维断裂，出现暗纹、细纹、皱纹等皮肤老化现象。此外，环境中的离子辐射以及诸如空气污染与化学物质等的环境污染物，也会使生物体内不断的产生自由基。例如环境中的紫外线会使皮肤真皮中的纤维母细胞及线粒体受到刺激，进而释放出超氧阴离子，而过量的超氧阴离子则会转换成其它破坏性更强的自由基。虽然人体内具有能够维持氧化与抗氧化之间平衡状态的抗氧化防御系统，用以减缓活性氧及自由基的产生，但若是长期过度的曝晒在阳光下，则人体内大量产生的自由基会导致皮肤的抗氧化防御能力降低，造成皮肤的伤害，例如光老化、表皮皱纹、皮肤免疫力失调等。抗氧化剂是具有捕捉自由基能力的物质，可以清除皮肤中的活性自由基，减轻自由基引起的皮肤氧化应激损伤，从而改善由氧化应激等造成的皮肤老化。目前已知有维生素E、维生素C等生物体内的清除自由基型抗氧化剂，另外也报道了植物来源的抗氧化剂如莲花、梅果提取物等(专利文献CN201110158540含有莲花提取物和乌梅提取物作为有效成分而具有抗氧化活性的皮肤外用剂组合物)。关于皮肤黑色素的形成，目前研究表明主要是由于黑素细胞内的生物化学反应引起，即酪氨酸在作为催化剂的酪氨酸酶的作用下，生成多巴醌，再通过酶的催化作用或非酶的氧化作用形成黑色素。关于抑制上述黑色素生成的美白活性物，通常以抑制酪氨酸酶活性为主要靶点。来源于植物提取物的酪氨酸酶抑制剂作为潜在的美白活性物，同时又具有安全性和对皮肤低刺激性的预期，目前已有各种开发的报道(专利文献CN201310411195白蔹提取物美白功效的检测方法；CN201310382406白木香果皮提取物在制备美白化妆品中的应用)。皮肤胶原约占干燥皮肤重量的75％，是皮肤细胞外基质的重要组成成分，起着皮肤结构的支撑体功能，并提供皮肤的抗拉和弹力等重要功能。正常皮肤中胶原的生成和分解在生物调节作用下处于平衡状态，随着年龄增长，以及紫外线辐射等环境因素引起生物调节功能减弱，胶原的分解作用大于生成作用时，皮肤中胶原含量的下降，皮肤相应出现弹力减少、皱纹产生等皮肤老化现象。而通过合适的植物提取物调节胶原蛋白的生成，或者适当增加可以产生的胶原蛋白的成纤维细胞的数量，就可以期待会对皮肤老化的现象有所改善，目前已有报道红杉新芽、越桔新芽等来自植物提取物的抑制皮肤老化成分具有类似的改善皮肤老化机理(专利文献CN200980106591.8含有植物的新芽提取物的用于抑制皮肤老化的组合物)。短管兔耳草LagotisbrevitubaMaxim是玄参科兔耳草属植物，生于海拔3000～4850米的高山草甸及倒石堆、碎石带上。主要分布于青海、西藏、甘肃等省区。全草入药，具退热、降血压、调经解毒之功效；治疗全身发热、肾炎、肺病、阴道流黄黑色液物、湿热泻痢、高血压病、动脉粥样硬化症、月经不调、治痨热咳嗽、霍乱、伤寒、黄疸、目赤、综合性毒物中毒及“心热”等疾病，《中华人民共和国卫生部药品标准·藏药》(第1册)载入的兔耳草(藏名洪连)为玄参科植物短管兔耳草LagotisbrevitubaMaxim(藏名红林)或全缘兔耳草L.integraW.Smith(藏名洪连)的干燥全草。性味苦、甘、寒。具清热解毒，行血调经之功能。全身发热、肾炎、肺病、高血压病、动脉粥样硬化、月经不调、综合性毒物中毒及“心热”症。史高峰等对短管兔耳草的化学成分进行了系统的分析和研究，从中分离鉴定了5个已知化合物，分别为β-谷甾醇(β-sitosterol)，软脂酸单甘油脂(palmiticmonloglycerolester)，琥珀酸(succinicacid)，木犀草素(luteolin)，木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin-7-O-β-D-glucoside)。现代药理学研究显示短管兔耳草水提物对大鼠血清性关节肿有明显的抑制作用，对大鼠头部急性充血性水肿(急性炎症)有显著的抑制作用。短管兔耳草对大鼠甲醛性关节炎(亚急性炎症)有明显地预防作用；另有研究显示短管兔耳草的总提取物对P388抑制率实验和小白鼠抗癌实验，发现短管兔耳草具有一定的抗肿瘤作用。此外，青海省药品检验药物研究所的姜平、杨娜等在1984年对大鼠进行了胃溃疡、镇静和毒性实验，将其分为短管兔耳草实验组、盐水对照组和胃膜素对照组。结果发现，以溃疡面积和溃疡容积为指标，短管兔耳草与盐水对照组比较，有显著差异，说明短管兔耳草水提物对大鼠慢性胃溃疡的愈合有明显的促进作用，且较胃膜素对照组的疗效为优。通过镇静实验，结果显示短管兔耳草水提物可显著延长戊巴比妥钠的睡眠时间，说明其对小鼠有较好的镇静作用。综合短管兔耳草近年来的研究进展，在其化学成分、提取分离、药理活性方面的研究还处于初步研究阶段。对药效作用部位及作用机理方面的研究还只是一片空白。鉴于短管兔耳草在藏药中的广泛应用及其丰富的自然资源，对短管兔耳草进一步的研究及有效合理地开发利用是十分必要的。尤为重要的是，目前为止，未发现短管兔耳草在化妆品领域，尤其是抗衰老和美白的用途和报道。寻找安全有效、抗衰老和美白效果好的皮肤外用剂是目前急需解决的技术问题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是为了克服现有技术中化妆品抗衰老和美白效果差、安全性低等缺陷而提供了短管兔耳草提取物其制备方法和应用、含其的皮肤外用剂。本专利技术的含短管兔耳草提取物的组合物自由基清除率高、酪氨酸酶抑制作用显著、弹性蛋白酶抑制作用显著、抗氧化和老化效果明显、同时表现出优良的美白性，并且天然、安全，可用作皮肤外用剂的美白活性成分和抗衰老活性成分。本专利技术的皮肤外用剂成分天然、安全，并具有美白、抗氧化和老化的功效，具有良好的市场应用前景。本专利技术提供了一种短管兔耳草提取物的制备方法，其采用方法1或方法2：所述的方法1包括如下步骤：将短管兔耳草粉末与体积浓度为50％～80％的乙醇水溶液形成的混合物，在10℃～35℃下提取0.5小时～5小时，固液分离得滤液，滤液脱除溶剂，即得短管兔耳草粗提物；其中，所述的短管兔耳草粉末与所述的乙醇水溶液的质量体积比为(1：8)g/mL～(1：15)mg/mL；所述的体积浓度是指乙醇的体积与乙醇水溶液总体积的百分比。所述的方法2包括如下步骤：将方法1得到的短管兔耳草粗提物，上样到大孔树脂填充柱，依次用溶剂Ⅰ、溶剂Ⅱ和溶剂Ⅲ洗脱，分别收集洗脱液，并脱除溶剂后，相应地得到溶剂洗脱部位A、溶剂洗脱部位B和溶剂洗脱部位C。所述的溶剂I、所述的溶剂II和所述的溶剂III分别为体积浓度为20％～30％本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种短管兔耳草提取物的制备方法，其特征在于其采用方法1或方法2：所述的方法1包括如下步骤：将短管兔耳草粉末与体积浓度为50％～80％的乙醇水溶液形成的混合物，在10℃～35℃下提取0.5小时～5小时，固液分离得滤液，滤液脱除溶剂，即得短管兔耳草粗提物；其中，所述的短管兔耳草粉末与所述的乙醇水溶液的质量体积比为(1：8)g/mL～(1：15)mg/mL；所述的体积浓度是指乙醇的体积与乙醇水溶液总体积的百分比；所述的方法2包括如下步骤：将方法1得到的短管兔耳草粗提物，上样到大孔树脂填充柱，依次用溶剂Ⅰ、溶剂Ⅱ和溶剂Ⅲ洗脱，分别收集洗脱液，并脱除溶剂后，相应地得到溶剂洗脱部位A、溶剂洗脱部位B和溶剂洗脱部位C，所述的溶剂I、所述的溶剂II和所述的溶剂III分别为体积浓度为20％～30％的乙醇水溶液、体积浓度为40％～50％的乙醇水溶液和体积浓度为60％～70％的乙醇水溶液，溶剂I对应溶剂洗脱部位A，溶剂II对应溶剂洗脱部位B，溶剂III对应溶剂洗脱部位C。

【技术特征摘要】
1.一种短管兔耳草提取物的制备方法，其特征在于其采用方法1或方法2：所述的方法1包括如下步骤：将短管兔耳草粉末与体积浓度为50％～80％的乙醇水溶液形成的混合物，在10℃～35℃下提取0.5小时～5小时，固液分离得滤液，滤液脱除溶剂，即得短管兔耳草粗提物；其中，所述的短管兔耳草粉末与所述的乙醇水溶液的质量体积比为(1：8)g/mL～(1：15)mg/mL；所述的体积浓度是指乙醇的体积与乙醇水溶液总体积的百分比；所述的方法2包括如下步骤：将方法1得到的短管兔耳草粗提物，上样到大孔树脂填充柱，依次用溶剂Ⅰ、溶剂Ⅱ和溶剂Ⅲ洗脱，分别收集洗脱液，并脱除溶剂后，相应地得到溶剂洗脱部位A、溶剂洗脱部位B和溶剂洗脱部位C，所述的溶剂I、所述的溶剂II和所述的溶剂III分别为体积浓度为20％～30％的乙醇水溶液、体积浓度为40％～50％的乙醇水溶液和体积浓度为60％～70％的乙醇水溶液，溶剂I对应溶剂洗脱部位A，溶剂II对应溶剂洗脱部位B，溶剂III对应溶剂洗脱部位C。2.如权利要求1所述的短管兔耳草提取物的制备方法，其特征在于：方法1中，所述的短管兔耳草粉末的粒度为20目～60目；和/或，方法1中，所述的提取为超声提取；和/或，方法1中，所述的提取的温度为20℃～25℃；和/或，方法1中，所述的提取的时间为0.5小时～1小时；和/或，方法1中，所述的提取的次数为1～2次；和/或，方法1中，所述的短管兔耳草粉末与所述的乙醇水溶液的质量体积比为(1:10)g/mL～(1:15)g/mL；和/或，方法1中，所述的乙醇的体积浓度为70％；和/或，方...

【专利技术属性】
技术研发人员：金家宏，
申请(专利权)人：伽蓝集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31