由印尼莪术分离的免疫增强用多糖类及其制造方法技术

本发明专利技术提供一种多糖类的制造方法、由该制造方法得到的多糖类、以及作为有效成分而含有该多糖类的药物组合物，所述多糖类的制造方法包括：（Ｓ１）准备印尼莪术根的粉末的工序；（Ｓ２）用有机溶剂提取上述粉末后，进行过滤或离心分离而得到滤渣的工序；（Ｓ３）提取上述滤渣，从而配制含有多糖类的溶液的工序；（Ｓ４）往上述含有多糖类的溶液中添加淀粉水解酶，从而去除淀粉的工序；（Ｓ５）在上述（Ｓ４）工序后对多糖类进行沉淀的工序；及（Ｓ６）在上述（Ｓ５）工序后对多糖类进行精制的工序。本发明专利技术的多糖类能够活化巨噬细胞，可极其有效地应用于包括癌的有关免疫性疾病的预防、治疗以及用于治疗后的免疫增强的药品以及功能性食品中。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及由印尼莪术(O^cwwaxawAo/r/^a)分离的有效的多糖类、 及其制造方法、以及被分离的多糖类的用途。
技术介绍
当生物体受细菌、真菌及病毒的感染时，具有巨噬细胞活化功能的多糖 类，拥有使在被诱发的生物体的防御机制中起重要作用的巨噬细胞活化的功 能。此时，上述巨噬细胞被分类为免疫细胞(cellular immunity)，通过巨噬 细胞活化与补体、天然杀伤细胞(NKcdl)等的免疫细胞进行反应，成为免 疫系统的中枢(Plafair, J,H，L: Immunology at a Glance 5th ed. Blackwell Scientific Publications. London, 1992)。巨噬细胞在暴露于细菌或外部的剌激性物质中时被活化，成为被活化的 巨噬细胞。被活化的巨噬细胞显示出吞噬细胞作用、前列腺素(prostaglandin) 分泌增加等的多种酶的蛋白质合成机能增加的功能性变化，其细胞的大小和 细胞分泌物会增加。特别是，在对癌细胞的细胞毒性作用机理中，己知，通 过被活化的巨噬细胞分泌的细胞因子(IL-lp, IL-6, TNF-oO、过氧化氢(H202)、 亚硝酸(NO)、细胞毒性蛋白分解酶(cytolyticprotease)等对癌细胞显示出细 胞毒性(Hibbs J. B. et al.,祝oc/ze肌所o; /z". Cbwmw"" 157: 87-94， 1998)。虽然被活化的巨噬细胞具有抗微生物作用、抗癌作用，但实际上在癌患 者的生物体内的抗癌作用不会单独有效，且通过以往的化学疗法、放射线疗 法进行的抗癌疗法会诱发非常严重的高热、发汗、头痛以及呕吐等的全身副 作用，因而，可以说通过免疫增强活性的抗癌治疗的开发具有极其重要的意 义。已知有多种生物化学现象参与到免疫调节中，特别是，与作为产生氧化 氮(nitric oxide: NO)的酶的一氧化氮合酶(nitric oxide synthase: NOS)禾口 前列腺素的生物合成相关的酶等起到重要的作用。因此，作为由L-精氨酸 (L-arginine)生成NO的酶的NOS或者作为有关由花生四烯酸(ArachidonicAcid )合成前列腺素类的环氧化酶(cyclooxygenase, COX)被视为免疫调节 的重要的指标(ChiharaG.etal.， Immunology, 34:695-711, 1978) 。 NOS以及 COX—2的表达是通过复杂的细胞传达过程而实现，有将外部信号传达至细 胞内的多种激酶(kinase)等的参与，但在其中，主要是对细胞核因子 -kb(nuclear factor kappa B， NF-kB)、 iNOS以及COX—2的表达产生影响。 酪氨酸(tyrosine)或丝氨酸/苏氨酸激酶(serine/threonine kinases)通过LPS或 TNF—a等的剌激被磷酸化及活化，而存在于细胞质的作为NF—kB复合体 的抑制结构要素的抑制性蛋白(inhibitor kappa B, IkB )则通过I—kB激酶被 磷酸化以及活化，并被蛋白分解，由此NF—kB被活化(D'AcquistoF.etal.， Mo/. Interv. 2:22-35,2002)。转录因子(transcription factor) NF—kB作为序 列特异的DNA结合蛋白，是诱发参与到细胞生长、分化以及免疫反应中的 多种基因转录的重要因子。因此，对在不显示副作用的同时能够活化巨噬细胞的天然物质的研究进 行得非常活跃，并主要作为以高分子级分而非低分子级分而显示出其活性的 物质而公知。来自天然物质的免疫增强剂，通过强化免疫反应或者恢复已降 低的免疫功能，应用于癌症治疗、免疫缺乏症治疗、慢性感染等的治疗中。 以往，为了从天然物质得到免疫活性调节物质，对担子菌类、真菌类以及药 用植物类进行了研究，特别是，对作为这些物质的高分子级分成分的多糖类 等已有了很多报告，己经发现了抗癌活性、抗补体活性以及淋巴细胞分裂诱 导等的免疫调节活性。至今为止，主要是来自于蘑菇类的香菇多糖 (Lentinan)、裂裥菌多糖 (Schzophyllan)、百士欣(Bestatin)、云芝多 糖k (krestin)以及肽PSK (peptide PSK)等葡聚糖(glucan)类多糖被应用 于抗癌治疗中。另一方面，印尼莪术属于姜科植物，通常是作为大姜黄(temu lawak) 或者爪哇姜黄(Javaneseturmeric)而广为人知的印尼的传统药用植物，其主 要成分含有芳香-姜黄酮(artumenone) 、 a-姜黄烯、卩-姜黄烯、莪术呋喃酮、 吉马酮、P-倍半水芹烯、a-姜黄酮、卩-姜黄酮、黄根醇等的类萜系列化合物 和7_30%的精油、30—40%的碳水化合物、以及0.02—2.0%的作为芳香性 色素的类姜黄色素等(Lin S. C. et al.， Am. J. Chin. Med" 23:243-254, 1995 )。
技术实现思路
因此，本专利技术的目的在于提供一种由天然物质分离出的具有安全性的同 时免疫增强效果及/或抗癌效果优异的物质、其制造方法、以及该物质的用途b为了实现上述目的，本专利技术提供一种由印尼莪术分离的多糖类的制造方 法，其特征在于，包括(51) 准备印尼莪术根(CurcumaxanthorrhizaRoxb.)的粉末的工序；(52) 用有机溶剂提取上述粉末后，进行过滤或离心分离而得到滤渣的工序；(53) 提取上述滤渣，从而配制含有多糖类的溶液的工序；(54) 往上述含有多糖类的溶液中添加淀粉水解酶，从而去除淀粉的工序；(55) 在上述(S4)工序后对多糖类进行沉淀的工序；及(56) 在上述(S5)工序后对多糖类进行精制的工序。 本专利技术还提供一种由印尼莪术分离的多糖类以及免疫增强剂组合物，其特征在于，所述由印尼莪术分离的多糖类是通过上述制造方法而得到，所述 免疫增强剂组合物含有该多糖类。本专利技术人等以多种天然物质为对象进行了寻求免疫增强活性剂的研究， 其结果发现从印尼莪术的根分离出的多糖类显示免疫增强活性，从而完成了 本专利技术。下面，对本专利技术的由印尼莪术分离出的免疫增强多糖类、其制造方法、 及含有该多糖类的免疫增强组合物或者抗癌辅助剂组合物进行更加详细的 说明。本专利技术提供一种由印尼莪术分离的多糖类的制造方法，其特征在于，包括(51) 准备印尼莪术根的粉末的工序；(52) 用有机溶剂提取上述粉末后，进行过滤或离心分离而得到滤渣的工序；(53) 提取上述滤渣，从而配制含有多糖类的溶液的工序；(54) 往上述含有多糖类的溶液中添加淀粉水解酶，从而去除淀粉的工序；(55) 在上述(S4)工序后对多糖类进行沉淀的工序；及(56) 在上述(S5)工序后对多糖类进行精制的工序。 本专利技术的制造方法包括(Sl)准备印尼莪术根的粉末的工序。印尼莪术根的粉末可通过本
中通常使用的粉末化方法来进行准备。本专利技术的制造方法包括(S2)用有机溶剂提取上述粉末后，进行过滤或离心分离而得到滤渣的工序。作为有机溶剂，可以单独或混合使用甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、丙酮、乙醚，苯、氯仿、乙酸乙酯、二氯甲烷，己烷、环本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种由印尼莪术分离的多糖类的制造方法，其特征在于，包括：（Ｓ１）准备印尼莪术根的粉末的工序；（Ｓ２）用有机溶剂提取上述粉末后，进行过滤或离心分离而得到滤渣的工序；（Ｓ３）提取上述滤渣，从而配制含有多糖类的溶液的工序；（Ｓ４）往上述含有多糖类的溶液中添加淀粉水解酶，从而去除淀粉的工序；（Ｓ５）在上述（Ｓ４）工序后对多糖类进行沉淀的工序；及（Ｓ６）在上述（Ｓ５）工序后对多糖类进行精制的工序。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄在宽，金我真，孙钟熙，韩奎利，李仙姬，秋政翰，
申请(专利权)人：黄在宽，
类型：发明
国别省市：KR[韩国]