一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法技术

本发明专利技术公开了一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，结合芩黄清肺散组方的特征和甘草的性质，采用盐酸加热回流后先用乙醚得到低极性的物质，除去色素，再让氨水与甘草次酸和其它成分结合，后加盐酸得到甘草次酸，然后再用乙醚萃取得到更纯的甘草次酸和甘草它他成分，将其溶解在甲醇溶液中作为芩黄清肺散中甘草成分薄层色谱鉴别的供试品溶液；该分离方法简单易操作，且分离效果极佳，采用所述供试品溶液与对照药材溶液和阴性对照液进行薄层色谱鉴别，能够得到准确的鉴别结果。

Method for TLC identification of licorice in Qingfei Qingfei powder

The invention discloses a method for TLC identification of licorice Ling Huang Qingfei powder composition, characteristics and combined with the Huang Qingfei formula of licorice powder, using hydrochloric acid reflux with ether obtained low polar substances, remove pigment, let the ammonia combined with glycyrrhetinic acid and other ingredients, after by adding hydrochloric acid to glycyrrhetinic acid, then ethyl ether extraction got pure glycyrrhetinic acid and licorice which he component, which was dissolved in methanol solution as Ling Huang Qingfei in licorice ingredient TLC for sample; the separation method is simple and easy to operate, and the separation effect is excellent, with the the test solution and negative solution and control medicinal materials were identified by thin layer chromatography control solution, can get accurate identification of the.

【技术实现步骤摘要】
一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法
本专利技术涉及薄层色谱领域，尤其涉及的是一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法。
技术介绍
薄层色谱又称薄层层析(thin—layerchromatography），是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。芩黄清肺散是一种由黄芩、大黄、枇杷叶和甘草四位中药组成的纯中药制剂，具有清肺热、止咳喘的功效。在药物申报的过程中，通常需要采用薄层色谱法对药品中的各种成分进行定性检测，然而在对芩黄清肺散中的甘草成分进行薄层色谱鉴别的过程中，往往因为甘草成分在芩黄清肺散中的含量较低导致薄层色谱鉴别失败，从而得出错误的结论，影响药物申报结果。因此，现有技术还有待于改进和发展。
技术实现思路
鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，旨在解决现有方法对芩黄清肺散中的甘草成分进行薄层色谱鉴别的效果较差，无法得出准确的结论，影响药物申报结果的问题。本专利技术的技术方案如下：一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，其中，包括步骤：A、取芩黄清肺散样品5~10g加入质量百分比为60~80%的乙醇中，超声处理25~35min后进行第一次过滤，得到一次滤液；B、在一次滤液中添加2~5ml盐酸，加热回流预定时间后进行第二次过滤，得到二次滤液；C、将二次滤液蒸干得到的残渣加水溶解，然后用乙醚萃取，得到一次乙醚萃取液；D、在一次乙醚萃取液中添加6~12ml氨水，萃取得到二次乙醚萃取液；E、在二次乙醚萃取液中添加8~12ml盐酸后，再次用乙醚萃取，得到三次乙醚萃取液；F、将三次乙醚萃取液蒸干得到的残渣加入到甲醇溶液中，得到供试品溶液；G、分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及阴性对照液各1~2μL滴加到同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸作为展开剂，展开完成后取出、晾干，喷洒显色剂，加热至预定温度使斑点显色清晰，最后放置在日光或紫外灯光下检视。较佳地，所述的对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，其中，所述步骤B中，加热回流的时间为40~80min。较佳地，所述的对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，其中，所述步骤C中，将二次滤液蒸干得到的残渣加水进行多次溶解，每次溶解后添加相同体积用量的乙醚进行萃取，将每次萃取的乙醚溶液合并，得到一次乙醚萃取液。较佳地，所述的对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，其中，所述步骤C之后还包括：C1、将一次乙醚萃取液用水洗涤3~5次，每次用水量为20ml，洗涤完成后弃去水液。较佳地，所述的对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，其中，所述步骤G中的显色剂为质量百分比为8~12%硫酸乙醇溶液。较佳地，所述的对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，其中，所述步骤G中的预定温度为90~110℃。有益效果：本专利技术结合芩黄清肺散组方的特征和甘草的性质，采用盐酸加热回流后先用乙醚得到低极性的物质，除去色素，再让氨水与甘草次酸和其它成分结合，后加盐酸得到甘草次酸，然后再用乙醚萃取得到更纯的甘草次酸和甘草它他成分，将其溶解在甲醇溶液中作为芩黄清肺散中甘草成分薄层色谱鉴别的供试品溶液；该分离方法简单易操作，且分离效果极佳，采用所述供试品溶液与对照药材溶液和阴性对照液进行薄层色谱鉴别，能够得到准确的鉴别结果。附图说明图1为本专利技术一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法较佳实施例的流程图。图2为本专利技术对芩黄清肺散样品中的甘草成分进行薄层色谱鉴别的第一结果示意图。图3为本专利技术对芩黄清肺散样品中的甘草成分进行薄层色谱鉴别的第二结果示意图。图4为本专利技术对芩黄清肺散样品中的甘草成分进行薄层色谱鉴别的第三结果示意图。图5为本专利技术对芩黄清肺散样品中的甘草成分进行薄层色谱鉴别的第四结果示意图。图6为本专利技术对芩黄清肺散样品中的甘草成分进行薄层色谱鉴别的第五结果示意图。具体实施方式本专利技术提供一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，为使本专利技术的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下参照附图并举实例对本专利技术进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。具体地，本专利技术所提供的一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法中所用到的仪器如下所示：HN1012超声波仪（中国广州华南超声设备厂）、点样毛细管（华西医科大学仪器厂生产），电子天平（赛多利斯科学仪器北京有限公司，型号：BSA2245-CW)，100mm×200mm双槽玻璃层析缸（上海信谊仪器厂有限公司，型号：P-1）；薄层层析硅胶G和硅胶H板（青岛海洋化工有限公司，型号：201509012）；进一步，本专利技术所提供的芩黄清肺散中甘草成分薄层色谱中所用到的药品和试剂如下所示：甘草对照药材（批号：120904-201519）；均购自中国食品药品检定研究院。芩黄清肺散（由本实验室自制）；缺甘草的阴性对照样品（有本实验室自制）；三氯甲烷、乙醇、甲醇、正丁醇、甲酸、甲苯、乙酸乙酯、冰醋酸、硫酸、盐酸、氨水和乙醚均为分析纯。请参阅图1，图1为本专利技术一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法较佳实施例的流程图，如图所示，其包括步骤：S100、取芩黄清肺散样品5~10g加入质量百分比为60~80%的乙醇中，超声处理25~35min后进行第一次过滤，得到一次滤液；具体地说，本专利技术提供的薄层色谱鉴别方法主要是鉴别芩黄清肺散样品中甘草的甘草酸和甘草次酸成分，其中甘草的主要活性成分为甘草酸，也叫甘草甜素或甘草皂苷等，所述甘草酸的极性较大，非常容易溶于烯醇中；因此本专利技术采用质量百分比为60~80%的乙醇来溶解所述甘草中的甘草酸成分；优选地，本专利技术采用质量百分比为70%的乙醇来溶解甘草中的甘草酸成分，其提取效果达到最佳。进一步，将样品溶解在乙醇中后，采用超声处理是为了进一步的提高溶解效果，为了达到充分溶解的效果，本专利技术优选超声处理30min，超声完成后进行过滤，得到充分溶解有甘草酸的一次滤液。S200、在一次滤液中添加2~5ml盐酸，加热回流预定时间后进行第二次过滤，得到二次滤液；具体来说，通过在一次滤液中添加2~5ml的质量百分比为37%的盐酸，使得一次滤液中的甘草酸水解成甘草次酸，进一步，采用加热回流40~80min的方式可使甘草酸充分水解成甘草次酸；优选地，通过添加3ml的盐酸，加热回流60min，可使得一次滤液中的甘草次酸充分、且快速地水解成甘草次酸，经过过滤后，得到二次过滤液。S300、将二次滤液蒸干得到的残渣加水溶解，然后用乙醚萃取，得到一次乙醚萃取液；具体来说，由于甘草次酸属于低极性化合物，因此，本专利技术采用乙醚来萃取二次滤液中的甘草次酸；具体地，可将二次滤液蒸干得到的残渣加水进行多次溶解，每次溶解后添加相同体积用量的乙醚进行萃取，将每次萃取的乙醚溶液合并，得到一次乙醚提取液。通过多次溶解、萃取过程可有效除去二次滤液中的极性较强的化合物，得到浓度较高的溶解有甘草次酸的一次乙醚萃取液；进一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，其特征在于，包括步骤：A、取芩黄清肺散样品5~10g加入质量百分比为60~80%的乙醇中，超声处理25~35min后进行第一次过滤，得到一次滤液；B、在一次滤液中添加2~5ml盐酸，加热回流预定时间后进行第二次过滤，得到二次滤液；C、将二次滤液蒸干得到的残渣加水溶解，然后用乙醚萃取，得到一次乙醚萃取液；D、在一次乙醚萃取液中添加6~12ml氨水，萃取得到二次乙醚萃取液；E、在二次乙醚萃取液中添加8~12ml盐酸后，再次用乙醚萃取，得到三次乙醚萃取液；F、将三次乙醚萃取液蒸干得到的残渣加入到甲醇溶液中，得到供试品溶液；G、分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及阴性对照液各1~2μL滴加到同一硅胶G薄层板上，以甲苯‑乙酸乙酯‑甲酸作为展开剂，展开完成后取出、晾干，喷洒显色剂，加热至预定温度使斑点显色清晰，最后放置在日光或紫外灯光下检视。

【技术特征摘要】
1.一种对芩黄清肺散中甘草成分进行薄层色谱鉴别的方法，其特征在于，包括步骤：A、取芩黄清肺散样品5~10g加入质量百分比为60~80%的乙醇中，超声处理25~35min后进行第一次过滤，得到一次滤液；B、在一次滤液中添加2~5ml盐酸，加热回流预定时间后进行第二次过滤，得到二次滤液；C、将二次滤液蒸干得到的残渣加水溶解，然后用乙醚萃取，得到一次乙醚萃取液；D、在一次乙醚萃取液中添加6~12ml氨水，萃取得到二次乙醚萃取液；E、在二次乙醚萃取液中添加8~12ml盐酸后，再次用乙醚萃取，得到三次乙醚萃取液；F、将三次乙醚萃取液蒸干得到的残渣加入到甲醇溶液中，得到供试品溶液；G、分别吸取所述供试品溶液、对照药材溶液以及阴性对照液各1~2μL滴加到同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸作为展开剂，展开完成后取出、晾干，喷洒显色剂，加热至预定温度使斑点显色清晰，最后放置在日光或紫外灯光下检视。2...

【专利技术属性】
技术研发人员：何永明，刘俊丹，梁伟燊，李紫元，唐陆平，蒲文珺，邓桦，杨鸿，王丙云，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：广东,44