归芍茶的检测方法技术

本发明专利技术通过对“经久老茶叶”进行成分及药效研究分析，命名并定义了一种新的茶，即归芍茶并提供了一种归芍茶的检测方法。归芍茶的主要挥发性气体成分跟当归和白芍的主要挥发性气体成分相同较多，主要挥发性气体成分跟当归相同的有β‑蒎烯、β‑水芹烯、β‑月桂烯、β‑罗勒烯，跟白芍相同的有β‑蒎烯、β‑月桂烯、β‑罗勒烯，因此根据其气味近似程度，把具有“中药房混合味”的“经久老茶叶”命名为“归芍茶”。本发明专利技术通过对经久老茶叶的成分研究分析，提出并定义了归芍茶，并通过对其的药效研究发现，其具有抑制胃癌细胞生长和延长带瘤生存期的效果，因而可用于制备治疗胃癌药物中，从而为胃癌的治疗提供了新的方法和思路。

Detection method of tea for restoring Peony

The invention analyzes and analyzes the ingredients and the efficacy of the old tea leaves, and then names and defines a new tea, namely, a peony tea, and provides a method for detecting the peony tea. The main volatile gas components in the main volatile gas of Guishao constituents in tea with Angelica sinensis and Radix Paeoniae Alba were the same, the main volatile gas components with the same Angelica beta pinene, beta phellandrene, beta myrcene, beta ocimene, with the same peony beta pinene, beta myrcene, beta ocimene, so the smell according to the degree of approximation, the \real\ Chinese medicine mixed flavor \and old tea\ named \Guishao tea\. The present invention through the analysis and composition of the old tea, put forward and defined Guishao tea, and it was discovered through research on its efficacy, which has inhibited the growth of gastric cancer cells and prolong the survival time of the effect, which can be used for preparing drugs in the treatment of gastric cancer, which provides a new method and idea for gastric cancer the treatment.

【技术实现步骤摘要】
归芍茶的检测方法
本专利技术涉及茶叶领域，尤其是涉及一种归芍茶的检测方法。
技术介绍
中国是世界的产茶大国，各种茶的种类繁多。中国人饮茶的历史悠久。茶具有多种保健功效。根据茶的储存时间和氧化程度的不同，以前一般将茶分为“茶叶”、“陈茶”以及“经久老茶叶”，其中“茶叶”一般指新茶或储存时间和氧化程度不超过三年的茶；“陈茶”一般指储存时间和氧化程度在三年到二十年之间的茶；“经久老茶叶”一般指储存时间和氧化程度在二十年以上的茶，以上没有严格的标准。1973年陈椽提出按制茶时茶多酚氧化程度分为白、绿、黄、青、红、黑茶六种。“经久老茶叶”在长时间存放中发生缓慢的氧化反应所产生的物质，可能具有多种功效，目前对“经久老茶叶”的成分及其药效研究，尚属空白。
技术实现思路
本专利技术是在无意中发现部分“经久老茶叶”在胃癌的防治，特别是对抑制胃癌肿瘤细胞的生长以及带瘤生存期的延长具有显著的效果。对此，本专利技术进行了大量的创造性实验筛选，发现具有“中药房混合味”的“经久老茶叶”对胃癌的防治效果最为显著。进一步，本专利技术对具有“中药房混合味”的“经久老茶叶”进行成分及药效研究分析，命名并定义了一种新的茶，即归芍茶，并给出了一种归芍茶的检测方法。一种归芍茶的检测方法，包括如下步骤：步骤一：将待测茶样粉碎成粉料，置于检测容器中，使用气体吹扫，捕集吹扫气体；步骤二：使用气质联用检测所述吹扫气体中的4-松油醇、β-蒎烯、β-水芹烯、β-月桂烯以及β-罗勒烯的含量。归芍茶中必须同时含有4-松油醇、β-蒎烯、β-水芹烯、β-月桂烯以及β-罗勒烯等挥发性气体成分。在其中一个实施例中，所述归芍茶的检测方法还包括检测所述吹扫气体中的如下十八种挥发性气体成分的含量的步骤：6-甲基-5-庚烯-2-酮、α-柠檬烯、α-松油烯、α-水芹烯、Vitispirane、十三烷、2,6,10-三甲基十二烷、6,10-二甲基-2-十一烷酮、罗汉柏烯、羟基二氢鸡蛋果素、2,6-二叔丁基-1,4-苯醌、β-桉叶烯、壬基环己烷、甲基-2-内-乙酰氨基[2.2.1]庚烷基-2-外-羧酸酯、2-甲基十五烷、5,6-二氢-5,6-二甲基苯并[c]噌啉、3-甲基十六烷以及十九烷。进一步，除上述必须含有的挥发性气体成分外，优选的，归芍茶还需要含有其他新出现或含量显著增加的其他挥发性气体成分，如上述6-甲基-5-庚烯-2-酮、α-柠檬烯、α-松油烯、α-水芹烯、Vitispirane、十三烷、2,6,10-三甲基十二烷、6,10-二甲基-2-十一烷酮、罗汉柏烯、羟基二氢鸡蛋果素、2,6-二叔丁基-1,4-苯醌、β-桉叶烯、壬基环己烷、甲基-2-内-乙酰氨基[2.2.1]庚烷基-2-外-羧酸酯、2-甲基十五烷、5,6-二氢-5,6-二甲基苯并[c]噌啉、3-甲基十六烷以及十九烷等十八种挥发性气体成分中的至少九种。在其中一个实施例中，所述归芍茶的检测方法还包括检测所述吹扫气体中的如下十种挥发性气体成分的含量的步骤：芳樟醇、α-松油醇、二氢猕猴桃内酯、水杨酸甲酯、β-紫罗兰酮、2-甲基丙酸-3-羟基-2,2-二甲基-1-(2-羟基-1-甲基乙基)戊基酯、甲基-N-邻氨基苯甲酸甲酯、δ-杜松烯、1,1-二苯基-2-甲基丙烯及2,3-二氢-1-甲基-3-苯基-1H-茚。更进一步，除上述必须含有以及新出现或含量显著增加的挥发性气体成分外，优选的，归芍茶中消失的或含量显著降低的挥发性气体成分需要至少满足上述十种挥发性气体成分中的至少五种。在其中一个实施例中，所述归芍茶的检测方法还包括如下步骤：制备供试品溶液：将待测茶样粉碎成粉料，加入容器中，加入提取液进行震旦浸提，后离心，收集上清液，过滤后得到的滤液作为所述供试品溶液；使用高效液相色谱检测所述供试品溶液中咖啡因和茶碱的含量。归芍茶中的咖啡因和茶碱的含量需要显著降低。上述显著增加和显著降低指相对于同类新茶，满足统计学指标P<0.05。在其中一个实施例中，所述归芍茶的检测方法还包括对所述待测茶样冲泡后进行气味检测的步骤。归芍茶在冲泡后，具有浓烈的当归和白芍为主的混合气味。在其中一个实施例中，所述粉料的粒径不大于20目；所述提取液含有70％甲醇、29.7％水和0.3％乙酸；所述过滤是使用0.45μm的滤膜过滤。在其中一个实施例中，所述高效液相色谱检测的条件：色谱柱为250mm×4.6mm、5μm的C18柱，流动相A：0.2％乙酸乙腈溶液；流动相B：0.2％乙酸水溶液；采用梯度洗脱的方法，流速为1.0mL/min，柱温35℃，检测波长为270mm。在其中一个实施例中，所述步骤一具体是将待测茶样粉碎成不大于20目的粉料，置于密闭容器中，并将密闭容器置于恒温水浴锅中，所述密闭容器的胶塞开设有两个开口，将吹扫氮气从其中一开口引入瓶底，用流量计调节氮气流量为150mL/min，另一开口用于吹扫气体的排出，在该排出口连接活性碳管采样管，用于捕集吹扫气体，动态顶空分离，将采样管中活性炭取出后加入二硫化碳溶液进行解析。在其中一个实施例中，气质联用检测的条件：吸取二硫化碳解析液，手动进样；气相进样口模式为分流模式，分流比5：1；进样口温度250℃；载气He，载气为恒流模式，柱流速1.0mL/min，平均线速37cm/sec；分析柱为30m×250μm×0.25μm的毛细石英管柱；升温程序为初始温度60℃，保持3min，以5℃/min升至150℃，保持10min，再以5℃/min升至250℃，保持9min，共计60分钟；离子源温度230℃，质谱传输线温度250℃，质量扫描范围30-550amu。在其中一个实施例中，所述归芍茶的检测方法还包括使用与待测茶样同类的新茶进行与所述待测茶样同样检测的步骤。本专利技术通过对经久老茶叶的成分研究分析，提出并定义了归芍茶，并通过对其的药效研究发现，其具有抑制胃癌细胞生长和延长带瘤生存期的效果，因而可用于制备治疗胃癌药物或食品中，从而为胃癌的治疗提供了新的方法和思路。此外，本专利技术还对其进行肠道菌群的分析研究，发现其具有良好的调节肠道菌群的功效，因而可以应用于制备调节肠道菌群的药物或食品中。附图说明图1为气质联用检测结果，其中1、2、4、5为“归芍茶”，3、6为当年同类新茶；图2为第1、3、5、7天不同分组的肿瘤体积情况；图3为受试者的影响情况，图中的time*group分组中看第一行(p＝0.007)，表示有统计学意义，说明剂量的效应随着时间的改变而改变，即剂量和时间有交互作用；图4为归芍茶干膏抑制肿瘤生长的曲线，其中，中剂量组可抑制肿瘤生长，第7天时效果最显著；图5为各组肿瘤体积差，其中，中剂量体积差最小，说明中剂量对肿瘤生长抑制效果最显著，低剂量体积差最大，说明低剂量促进肿瘤体积增大，高剂量体积差为0，因为高剂量1天后即死亡；图6为多样性分析，其中，6a为Chao分析，6b为Shannon分析；图7为物种分类分析，其中7a为聚类图，7b为热图，7c为GraPhlAn绘制的分类和系统发育信息可视化图；图8为PCA分析，发现正常组和中剂量组最相似；图9为PCoA分析，为unweighted分析，发现正常组和中剂量组最相似；图10为菌群丰度差异分析；图11为基于COG和KEGG进行菌群的功能分析；图12为基于COG和KEGG进行的分组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种归芍茶的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：将待测茶样粉碎成粉料，置于检测容器中，使用气体吹扫，捕集吹扫气体；步骤二：使用气质联用检测所述吹扫气体中的4‑松油醇、β‑蒎烯、β‑水芹烯、β‑月桂烯以及β‑罗勒烯的含量。

【技术特征摘要】
1.一种归芍茶的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：将待测茶样粉碎成粉料，置于检测容器中，使用气体吹扫，捕集吹扫气体；步骤二：使用气质联用检测所述吹扫气体中的4-松油醇、β-蒎烯、β-水芹烯、β-月桂烯以及β-罗勒烯的含量。2.如权利要求1所述的归芍茶的检测方法，其特征在于，还包括检测所述吹扫气体中的如下十八种挥发性气体成分的含量的步骤：6-甲基-5-庚烯-2-酮、α-柠檬烯、α-松油烯、α-水芹烯、Vitispirane、十三烷、2,6,10-三甲基十二烷、6,10-二甲基-2-十一烷酮、罗汉柏烯、羟基二氢鸡蛋果素、2,6-二叔丁基-1,4-苯醌、β-桉叶烯、壬基环己烷、甲基-2-内-乙酰氨基[2.2.1]庚烷基-2-外-羧酸酯、2-甲基十五烷、5,6-二氢-5,6-二甲基苯并[c]噌啉、3-甲基十六烷以及十九烷。3.如权利要求2所述的归芍茶的检测方法，其特征在于，还包括检测所述吹扫气体中的如下十种挥发性气体成分的含量的步骤：芳樟醇、α-松油醇、二氢猕猴桃内酯、水杨酸甲酯、β-紫罗兰酮、2-甲基丙酸-3-羟基-2,2-二甲基-1-(2-羟基-1-甲基乙基)戊基酯、甲基-N-邻氨基苯甲酸甲酯、δ-杜松烯、1,1-二苯基-2-甲基丙烯及2,3-二氢-1-甲基-3-苯基-1H-茚。4.如权利要求3所述的归芍茶的检测方法，其特征在于，还包括如下步骤：制备供试品溶液：将待测茶样粉碎成粉料，加入容器中，加入提取液进行震荡浸提，后离心，收集上清液，过滤后得到的滤液作为所述供试品溶液；使用高效液相色谱检测所述供试品溶液中咖啡因和茶碱的含量。5.如权利要求4所述的归芍茶的检测方法，其特征在于，还包括对所述待测茶样冲泡后进行气味检测的步骤。6.如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘玥，徐志坚，
申请(专利权)人：刘玥，徐志坚，
类型：发明
国别省市：广东,44