新的肽酶和异构酶抑制剂制造技术

本发明专利技术涉及某些肽酶底物的活化亲电子酮类似物，它们可用于抑制丝氨酸－羧酸－或金属－蛋白酶，这种抑制作用对各种疾病都具有有用的生理学后果。（*该技术在2010年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本申请是1989年9月11日提交的405，491号美国专利申请的部分继续申请。本专利技术涉及适用于各种生理学应用的蛋白酶抑制剂。从广义上讲，本专利技术涉及肽酶底物类似物，其中羧基末端羧基已被三羰基(-C(O)C(O)C(O)R)所取代。这些肽酶底物类似物为各种蛋白酶提供特异性的酶抑制剂，其抑制作用产生有价值的药理学活性，因而对各种病症具有有用的生理学后果。更具体地讲，本专利技术涉及某些可用于抑制丝氨酸一，羧酸一，硫羟一，和金属-蛋白酶的肽酶底物三酮羰基类似物，其抑制作用对各种病症将具有有用的生理学后果。再具体地讲，本专利技术涉及落入下列根据其活性位点依赖性划分的总类别之内的肽酶底物三酮类似物。该总类别为Ⅰ.丝氨酸蛋白酶这些酶包括弹性蛋白酶(人白细胞)，组织蛋白酶G，凝血酶，纤溶酶，C-1酯酶，C-3转化酶，尿激酶，纤溶酶原激活剂，精虫头粒蛋白，β-内酰胺酶，D-丙氨酸-D-丙氨酸羧肽酶，糜蛋白酶，胰蛋白酶和胰激肽释放酶。Ⅱ.羧酸蛋白酶这些酶包括肾素，胃蛋白酶和组织蛋白酶D。Ⅲ.金属蛋白酶这些酶包括血管紧张素转化酶，脑啡肽酶，假单胞菌弹性蛋白酶和亮氨酸氨肽酶。Ⅳ.硫羟蛋白酶组织蛋白酶B和Calpain。本申请提出的上述酶的肽酶抑制剂选自通式Ⅰ的化合物及其水合物，等排物或药物上可接受的盐 其中R1是选自K组的氨基保护基，α-氨基酸或由数个α-氨基酸组成的肽，每个所述的α-氨基酸和肽可带有最好选自K组的氨基保护基，R2是α-氨基酸结构单元的侧链，负责引导抑制剂至酶的活性位点，和R是-OR1或-NR2R3，其中R1，R2和R3各自独立地选自氢、(C1-C6)烷基、(C2-C6)烷酰基、苯基、苄基、苯甲酰基、环己基、环己基甲基或2-吡啶基甲基。具有下列Ⅰ′结构的三酮化合物的水合物 比式Ⅰ的非水合三酮化合物具有高得多的化学稳定性。因此，水合物是优选的，并且只要符合上下文，本说明书和权利要求书中所提到的三酮(COCOCO)化合物都应被看作是包括所提到的相应的水合物形式。而且，在正常生理状况下，期望本专利技术的化合物以水合物形式存在。式Ⅰ化合物的等排物包括其中(a)R1取代基的一个或多个α-氨基酸残基以其非天然构型存在(当有天然构型时)或(b)当正常肽酰胺键被修饰时，例如形成-CH2NH-(还原)，-COCH2-(酮)，-CH(OH)CH2-(羟基)，-CH(NH2)CH2-(氨基)，-CH2CH2-(烃)的等排物。本专利技术的化合物最好不以等排物形式存在，特别是在R1基团上最好没有经修饰的肽酰胺基团，如果有的话，最好使等排修饰保持至最低限度。除特别指出者外，这些肽酶底物类似物的α-氨基酸结构单元最好以其L-构型存在。正如肽化学家使用的常规名称，其中第一个字母是大写字母的氨基酸代码表示氨基酸具有天然的“L”构型，其中第一个字母是小写字母的氨基酸代码表示氨基酸具有“D”构型。在本说明书中将涉及小写字母氨基酸代码或以“(D)-”开头的代码，这两种表示方法被认为是等同的。具有天冬氨酸或谷氨酸部分的本专利技术化合物可以是游离形式或盐形式的，例如，酸加成盐或阴离子盐。可按本领域已知的方法，将这种化合物转化为其盐或碱形式，这种转化是可逆的。优选的盐是三氟乙酸盐，盐酸盐，钠盐，钾盐，或铵盐，但本文所包括的盐的范围不限于此，其范围可扩大到包括已知可用于肽化学领域的所有盐类。在进一步限定和/或说明式Ⅰ所包括的肽酶抑制剂的范围之前，说明某些有关肽的基本概念可能是适宜的。每个α-氨基酸都有一个特征性“R-基团”，该R-基团是与α-氨基酸的α-碳原子相连的侧链或残基。例如，甘氨酸的R-基团侧链是氢，丙氨酸中为甲基，缬氨酸中为异丙基。(因此，在本说明书中，R2部分是各所示α-氨基酸的R-基团)。对于α-氨基酸的特定R-基团或侧链，可参见A.L.Lehninger的生物化学教科书(特别是第4章)。为便于进一步限定式Ⅰ上位概念所包括的化合物的范围，以及关于本专利技术所涉及的各个酶的概念，将不同的α-氨基酸分成各种组，其赋予每种被式Ⅰ的肽酶底物所抑制的特定酶相似的功能性特征。这些组如表Ⅱ所述，α-氨基酸单元的缩写符号如表Ⅰ所述。表 1 表 1(续) 表ⅡA组Lys和ArgB组Glu，AspC组Ser，Thr，Gln，Asn，Cys，His，Ala(3Pyr)，Ala(4Pyr)，和N-甲基衍生物D组Pro，IndE组Ala，bAla，Leu，Ile，Val，Nva，bVal，Met，Nle和N-甲基衍生物F组Phe，Tyr，Tyr(Me)，Ala(3Pyr)，Ala(4Pyr)，Trp，Nal(l)，和N-甲基衍生物G组Gly，SarJ组 其中φ表示苯基(应明确的是J-1-4的键总是与氨基酸相连)K组乙酰基(Ac)，琥珀酰基(Suc)，苯甲酰基(Bz)，叔丁氧羰基(Boc)，苄氧羰基(Cbz)，甲苯磺酰基(Ts)，1-二甲胺基萘-5-磺酰(Dns)，异戊酰(Iva);甲氧琥珀酰基(MeOSuc)，1-金刚烷磺酰基(AdSO2)，1-金刚烷乙酰基(AdAc)，2-羧苯甲酰基(2CBz)，苯乙酰基(PhAc)，叔丁基乙酰基(Tba)，双〔(1-萘基)甲基〕乙酰基(BNMA)，或-A-Rz，其中 Rz是含有6，10或12个碳原子的芳基，可被独立地选自下列基团的1-3个成员适当地取代氟、氯、溴、碘、三氟甲基、羟基、含有1-6个碳原子的烷基、含有1-6个碳原子的烷氧基、羧基、烷基羰基氨基(其中烷基含有1-6个碳原子)、5-四唑基、和含有1-15个碳原子的酰基亚磺酰氨基(即，酰基氨基磺酰基和磺酰氨基羰基“Sac”)，条件是当酰基亚磺酰氨基含有芳基时，该芳基可被选自氟、氯、溴、碘和硝基之一的基团进一步取代;以及功能上与上述基团相同的其它末端氨基保护基。根据上述，前述定义的式Ⅰ化合物也可以是下述式Ⅰ化合物，其水合物，等排物或药物上可接受的盐 其中R是OR1或-NR2R3，其中R1，R2和R3各自独立地选自氢、(C1-C6)烷基、(C2-C6)烷酰基、苯基、苄基、苯甲酰基、环己基、环己基甲基或2-吡啶基甲基，R1是选自K组的氨基保护基，α-氨基酸或由数个α-氨基酸组成的肽，每个所述的α-氨基酸或肽可带有最好选自K组的氨基保护基，R2是α-氨基酸的侧链，负责将抑制剂导向酶的活性位点其中所述的α-氨基酸和肽部分选自A、B、C、D、E、F、G和J组，K是末端氨基保护基，这些组的成员是A组Lys和ArgB组Glu，AspC组Ser，Thr，Gln，Asn，Cys，His，和N-甲基衍生物D组Pro，IndE组Ala，bAla，Leu，Ile，Val，Nva，bVal，Met，β-缬氨酸，β-丙氨酸，Nle和N-甲基衍生物F组Phe，Tyr，Trp，Nal(l)，和N-甲基衍生物G组Gly，SarJ组 其中φ表示苯基(应明确的是J-1-4的键总是与氨基酸相连)K组乙酰基(Ac)，琥珀酰基(Suc)，苯甲酰基(Bz)，叔丁氧羰基(Boc)，苄氧羰基(Cbz)，甲苯磺酰基(Ts)，1-二甲胺基萘-5-磺酰(Dns)，异戊酰(Iva)，甲氧琥珀酰基(MeOSuc)，1-金刚烷磺酰基(AdSO2)，1-金刚烷乙酰基(AdAc)，2-羧苯甲酰基(2CBz)，苯乙酰基(PhAc)，叔丁基乙酰基(Tba)本文档来自技高网...

【技术保护点】
制备下式所示化合物的方法Ｒ↓［１］ＮＨＣＨ（Ｒ↓［２］）Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ其中Ｒ为－ＯＲ↑［１］或－ＮＲ↑［２］Ｒ↑［３］，Ｒ↑［１］、Ｒ↑［２］和Ｒ↑［３］各自独立地选自氢（Ｃ↓［１］－Ｃ↓［６］）烷基、（Ｃ↓［２］－Ｃ↓ ［６］）烷酰基、苯基、苄基、苯甲酰基、环已基、环已基甲基或２－吡啶甲基，Ｒ１为选自Ｋ组的氨基保护基、α－氨基酸或由若干α－氨基酸组成的肽，每一氨基酸或肽可选择性地带有选自Ｋ组的氨基保护基，Ｒ２为负责将抑制剂引向酶的活性位点的氨基酸侧 链，其中所述的α－氨基酸及肽基团为选自Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、和Ｇ组的结构单元，或Ｒ↓［２］为Ｊ组基团，Ｋ为末端氨基保护基，以上各组分别包括：Ａ组：Ｌｙｓ和ＡｒｇＢ组：Ｓｅｒ，Ｔｈｒ，Ｃｌｎ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｈｉｓ和Ｎ－甲基衍生物。 Ｄ组：Ｐｒｏ，ＩｎｄＥ组：Ａｌａ、Ｌｅｕ、ＩＬｅ、Ｖａｌ、Ｎｖａ、Ｍｅｔ、ｂｖａｌ、ｂＡｌａ、ＮＬｅ和Ｎ－甲基衍生物Ｆ组：Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｙｒ（Ｍｅ）、Ｔｒｐ、Ｎａｌ（ｌ）及Ｎ－甲基衍生物Ｇ组Ｇｌｙ，ＳａｒＪ：＊＊ ＊（Ｊ－１）＊＊＊（Ｊ－２）＊＊＊（Ｊ－３）和＊＊＊（Ｊ－４）其中φ代表苯基Ｋ组：乙酰基（ＡＣ），琥珀酰基（Ｓａｃ），苯甲酰基（Ｂｚ）叔一丁氧羰基（ＢＯＣ），苄氧羰基（Ｃｂｚ），甲苯磺酰基（Ｔｓ）丹酰基（Ｄｎｓ），异戊酰基（Ｉｖ ａ），甲氧琥珀酰基（ＭｅＯＳｕｃ），１－金刚烷基磺酰基（ＡｄＳＯ↓［２］）１－金刚烷基乙酰基（ＡｄＡｃ），２－羧基苯甲酰基（２ＣＢｚ），苯基乙酰基，叔一丁基乙酰基（Ｔｂａ），双［（１－萘基）甲基］乙酰基（ＢＮＭＡ）或－Ａ－Ｒ↓［ｚ］，其中Ａ为：＊＊＊Ｒ↓［ｚ］为含有６、１０或１２个碳原子的芳基，它被下述基团中的１－３个基团适当取代：氟、氯、溴、碘、三氟甲基、羟基、含有１－６个碳原子的烷基、含有１－６个碳原子的烷氧基、羧基、烷基羰基氨基（其中烷基含１－６个碳原子）、５－ 四唑基、含有１－１５个碳原子的酰基亚磺酰氨基（即酰氨基磺酰基和磺酰氨基羰基），条件是当酰基亚磺酰氨基含有芳基时，芳基可进一步被选自Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ和硝基的基团取代；Ｒｚ或者为具有相同功能的其它末端氨基保护基，该方法包括用ａ）单纯的氧气或ｂ）过量的臭氧处理下式所示化合物的溶液：＊＊＊然后用二甲硫处理，并分离产物。...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：加里阿兰弗林，菲利普贝，
申请(专利权)人：默里尔多药物公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]