溶酶体酶可裂解的抗肿瘤药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及药物－配体结合物，其中药物通过一蛋白肽的连接体和一连接基与配体相连，一种制备所说的结合物的方法，一种控制不期望细胞生长的方法，药物组合物及其中间产物。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供了一种药物-配体结合物，其中配体是通过肽的连接体与药物部分相连，该肽连接体是由一特定的蛋白肽，一羧酸的酰基部分和一可自动去除的间隔基组成，并且，该结合物是由溶酶体酶激活的。由一载体或连接体部分与一药物部分构成的两部分化合物已为人所知。这些化合物尤其在免疫结合物的形成中非常有用，所述免疫结合物是直接作用于与肿瘤相关的抗原。然而在某些情况下，两部分化合物有可能是不稳定的，原因在于连接抗体与药物的键的本身的性质或是在于药物部分的电学性质或空间结构特点可能会阻碍所需目标酶对该键的水解。Katzenellenbogen，J，Amer.Chem.Soc，.(1981)24.479-480。本专利技术提供一种对肿瘤具有特异性能、药物-配体结合物，它由一配体，一药物和一肽连接体组成，该结合物在肿瘤部位可被选择性地活化。本专利技术的药物-配体结合物包含至少一种药物分子，一个可针对性作用于所选择细胞群的配体和一个含有羧酸酰基及一特定的蛋白肽的肽连接体。肽链连接体也可含有一个能自动切除的间隔基，它把蛋白肽序列与药物间隔开。配体通过一含有硫醚的连接支链与羧酸酰基部分相连接，该硫醚键是由配体上的一巯基的反应的形成的，在优选实施例中，目标配体通过一共价的硫醚键直接与肽连接体相连。本专利技术一方面是提供一种能在肿瘤部位可被选择性活化的药物结合物。本专利技术另一方面是提供一种肿瘤特异性的药物结合物，它们是高度选择的被一种或多种肿瘤相关的酶在药物活化过程中进行酶裂解的底物。本专利技术的另一方面是提供一种肿瘤特异性的药物结合物，其中存在于肿瘤中的活化酶足以在肿瘤附近产生出具有细胞毒素水平的游离药物部分。本专利技术的另一方面是提供一种肿瘤特异性药物结合物，其中肿瘤特异性仅由配体产生。本专利技术的另一方面是提供一种肿瘤特异性药物结合物，它们对于血液中外来的蛋白酶是稳定的。更进一步的本专利技术的另一方面是提供一种与前述诸方面一致的肿瘤特异性药物结合物，它比该活化药物的毒性要小得多。本专利技术的另一方面是提供一种生产该药物结合物和药物组合物的方法，提供对靶细胞施用该结合物的方法，其中需要一个生物过程的改变作用，例如对于像癌症这样的疾病的治疗过程。本专利技术还提供一种对热血动物肿瘤细胞部位施以一种活性抗肿瘤药物的方法，即对上述热血动物给与本专利技术的药物-配体结合物。在一实施例中，药物部分是一蒽环类抗生素，配体是一抗体，A是对-氨苄基-氨基甲酰基，Y是phe，Z是Lys，n是5。在一优选实施例中蒽环类药物部分是亚德里亚霉素，配体部分是一嵌合抗体，A是对一氨苄基-氨基甲酰基，Y是phe，Z是Lys，n是5。在另一优选实施例中，药物部分是紫杉酚，配体是一抗体，Y是phe，Z是Lys，n是5。在另一优选实施例中，药物部分是丝裂霉素C，配体是一抗体，Y是phe，Z是Lys，n是5。本专利技术的上述及其它方面是通过一肽连接体将一抗肿瘤药剂与一配体在适于抑制抗肿瘤药剂的药理活性的激活位点连接，从而使该抗肿瘤药剂转变为一药理非活性的肽基衍生结合物来实现的。所述肽连接体是由一蛋白肽序列和一可自动切除的间隔基组成，该肽连接体具有一特定设计的氨基酸残基序列，以便使该肽基衍生物成为一种用一种或多种溶酶体蛋白酶，诸如组织蛋白酶B，C或D的进行药物活化酶裂解的选择性底物。酶裂解反应能从药物结合物上移去肽连接体部分，并且使具有药物活性形式的抗肿瘤药剂选择性地在肿瘤部位的释放。与那些基于简单酸水解由于连接体过早地在血液中的水解进行药释放的配体-药物连接体相比，这种新方法具有较少全身性毒性，所以大量药物便施于肿瘤部位，并且这种方法可使结合物具有较长的保存期限，简化了结合物使用条件。本专利技术的药物-配体结合物所具有的全身性的毒性比两部分的结合物和游离的药物要小得多。本专利技术结合物既具有特异性，又具有对所选靶细胞群进行治疗的药物活性。它们还可用于药物组合物中，例如该药物组合物包含一药物有效量的下式(Ⅰ)所示的化合物，和药物上可接受的载体，稀释剂或赋形剂结合。附图说明图1表明了BR96在L2987肺系，在A2780的卵巢系和HCT116的结肠系中的作用情况。图2显示的是BR96-亚德里亚霉素结合物和非结合的亚德里亚霉素的效力。下面进行了详细描述以使本专利技术能够被更好地理解。本专利技术提供了一种新型药物-配体结合物，它是由一能标靶所选择的细胞群的配体和一通过一肽连接体与配体相连的药物组成。该肽连接体由一羧酸的酰基和一蛋白肽序列组成，肽连接体还可以含有一可自动切除的间隔基，它将药物和蛋白肽序列间隔开配体分子可以是一免疫活性的蛋白，如抗体或其片段，或一非免疫活性蛋白，或肽配体如本贝辛，或一识别与细胞相关的受体的结合配体如外源凝集素，或任一具有一活性巯基(-SH-)或能被修饰上含有这一巯基的蛋白或肽。羧酸酰基部分通过一硫醚键与配体相连，药物通过一官能团与连接体相连，这些官能团选自一级或二级胺，羟基，巯基，羧基，醛或酮。本专利技术的结合物如通式(Ⅰ)所示 其中D是药物部分;L是-配体;A是-羧酸酰基部分Y是-氨基酸;Z是-氨基酸;X是-可自动切除的间隔基;W是-可自动切除的间隔基;m是1，2，3，4，5或6的整数。n是为0或1的整数。为了更好地理解本专利技术，下面将对药物，配体，肽和间隔基分别进行讨论。然后再阐明结合物的合成。应该指出在下面的详细描述和后面的权利要求中，所使用的缩写及命名是氨基酸和肽化学中的标准术语，并且所有氨基酸除非有其它说明均指L型氨基酸。本申请所用缩写列举如下，除非有其它说明AcOH乙酸;ALaL-丙氨酸;Alloc烯丙氧羰基;ArgL-精氨酸;Boc-叔-丁氧羰基;CitL-瓜氨酸;DBu二氮杂双环十一碳烯;DCC二环己基碳二亚胺;DCI直接化学电离;DCu二环己基脲;DIEA二异丙基乙胺;DMAP4-二甲氨吡啶;DME1，2-二甲氧乙烷;Dox亚德里亚霉素;DTT二硫苏糖醇;EEDQN-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氢喹啉;EtOAc乙酸乙酯;FAB快速原子轰击;Fmoc芴甲氧羰基;GABAγ-氨基丁酸;Gly甘氨酸;HOBtN-羟基苯并三唑;HRMS高分辨质谱;LDL低密度脂蛋白;IleL-异亮氨酸;LeuL-亮氨酸;LysL-赖氨酸;MC6-马来酰亚氨基己酰基;MMA丝裂霉素A;MMC丝裂霉素C;Mtr4-甲氧三苯甲基;NHSN-羟基琥珀酰亚胺;NMPN-甲基吡咯烷酮;PABC对一氨苄基-氨基甲酰;PAB-OH对-氨基苄醇，PheL-苯丙氨酸;PNP对-硝基苯酚;TFA三氟乙酸;THF四氢呋喃;TrpL-色氨酸;ValL-缬氨酸;Z苄氧羰基。肽连接体本专利技术的肽连接体是由一羧酸酰基和一蛋白肽序列组成。这一连接体也可以含有一能自动切除的间隔基，该间隔基把药物和蛋白肽序列隔开。通式Ⅰ所示的结合物中，肽连接体如“A-Y-Z-X-W”所示，其中“A”是羧酸酰基;“Y”和“Z”各是一氨基酸;共同形成蛋白肽序列，“X”和“W”分别是一可自动切除的将蛋白肽与药物隔开的间隔基，在通式Ⅰ式所示的结合物中的蛋白肽序列，Y是至少一种选自下列基团的氨基酸丙氨酸，缬氨酸，亮氨酸，异亮氨酸，甲硫氨酸，苯丙氨酸，色氨酸和脯氨酸，优选的是苯丙氨酸或缬氨酸;以及Z是至少一种选自下列基团的氨基酸赖氨酸，以乙酰基或甲酰基保护的赖氨酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
通式（Ⅰ）所示的化合物 ＊＊＊ 其中 Ｌ是配体； Ａ是羧酸的酰基部分； Ｙ是氨基酸； Ｚ是氨基酸； Ｘ和Ｗ分别是间隔基 Ｄ是药物部分，具有一个和其骨架结构相连的臂，即化学活性的官能团，这个官能团选自一级或二级胺，羟基，巯基，羧基、醛或酮； ｎ是整数０或１；以及 ｍ是整数１，２，３，４，５，或６。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：RA法尔斯通，GM杜保切克，
申请(专利权)人：布里斯托尔迈尔斯斯奎布公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]