一种卵巢癌检测产品及试剂盒制造技术

本发明专利技术设计医学诊断设备技术领域，具体涉及一种卵巢癌检测产品及试剂盒。所述卵巢癌检测试剂盒，包括使用荧光定量聚合酶链式反应检测检测样品中上皮细胞粘附分子、卵巢癌抗原CA125、黏蛋白1和切除修复交叉互补基因1四种基因mRNA水平的物质，所述检测的样品为利用免疫磁珠结合微流控法富集的受检者外周血中的循环肿瘤细胞。本发明专利技术的卵巢癌检测产品或试剂盒，对CTC中的一组卵巢癌特异性高表达基因的mRNA含量进行测定，通过对比几种基因mRNA水平来判断该受检者是否患有卵巢癌。对比现有临床检测产品敏感度高，特异性好；可早于影像学预知判断；即时反应，随时监测；取样便捷，安全性高。

【技术实现步骤摘要】
一种卵巢癌检测产品及试剂盒
本专利技术设计医学诊断设备
，具体涉及一种卵巢癌检测产品及试剂盒。
技术介绍
卵巢癌是女性生殖器三大常见癌症之一，其恶性化程度及致死率极高(在中国城市地区女性生殖器癌症中死亡率居首)，是严重威胁女性生命和健康的主要癌种。然而，由于卵巢深居盆腔深部，其恶性肿瘤临床症状通常不典型往往不明显且不具有特异性，尤其是在癌症早期。70％的患者就诊发现病变时已属晚期(III和IV期)，该类患者五年生存率急剧下降至不足30％，治疗与预后较差。卵巢癌现有筛查、诊断方法包括影像学检查、血清学检查(肿瘤标志物检查)和病理学检查(细胞学检查和组织活检)等。然而，长期居高不下的发病率、确诊不及时以及由此引起的治疗效果差和不良预后均提示现有的卵巢癌临床检测方法并未能完全满足日益迫切的临床需求。准确、灵敏、便捷、安全的卵巢癌临床检测手段的开发迫在眉睫。公开号为CN104316683A的中国专利技术专利公开了一种针对全血的卵巢癌细胞检测试剂盒，该专利专利技术利用免疫磁珠法富集分离卵巢癌患者全血中的癌细胞后，通过链霉亲和素化的量子点(SA-QDs)与生物素化的人附睾蛋白4(HE4)抗原抗体复合物特异性靶向结合卵巢癌细胞，实现多重信号协同放大，最终通过倒置荧光显微镜观察计数分离效率及荧光信号采集系统定量分析获得最终检测结果。然而，已有研究表明HE4并不仅仅在卵巢癌中表达异常，其在子宫内膜癌等妇科癌症以及肺癌中均有异常的高表达，该专利仅针对HE4这一个靶点对卵巢癌进行检测，其卵巢癌特异性有限。公开号为CN102735840A的专利专利技术专利通过检测血浆中肿瘤抗原125(基因名称：MUC1或CA125)、巢蛋白1(基因名称：NID1)和基质金属蛋白酶抑制剂2(基因名称：TIMP2)这三种卵巢癌相关蛋白质的浓度，对卵巢癌进行检测和诊断。该专利联合使用了三种卵巢癌标志物，特异性较高，但其检测方法较为复杂，需分别使用ModularE170仪器(Roche，Mannheim，Germany)测定血浆中CA125的蛋白浓度，使用ELISA法测定血浆中NID1和TIMP2的蛋白浓度，且最终结果需要套入二分类逻辑回归法构建的函数中进行计算，其检测的简便性及结果的直观性有待提高。卵巢癌现有临床筛查、诊断方法可归为三大类：影像学(超声，CT，PET/CT，MRI等)，血清学(血清中肿瘤标志物如CA-125的检测)和病理学(组织活检，细胞学检查等)。但所有这些方法都有不可避免的缺点，例如灵敏性及特异性差，检测结果滞后，对受检者造成放射性伤害，取样不方便，过于依赖医生判断的主观性等。连年来，卵巢癌发病率和死亡率的持续上升，表明现有的检测与治疗技术远远不能满足临床需求，更加准确、安全、便捷的卵巢癌临床诊疗新技术的开发势在必行。现有的公开号为CN104316683A和CN102735840A的专利虽然提出了卵巢癌临床常用检测方法外的新型检测手段，但是均未能同时兼顾检测操作的便捷性和检测结果的特异性。
技术实现思路
本专利技术目的在于针对卵巢癌现有临床检测方法的缺点与不足，提供一种兼顾检测操作的便捷性和检测结果特异性的诊断或辅助诊断卵巢癌的产品及试剂盒，以及筛查或辅助筛查卵巢癌的产品或试剂盒。本专利技术的一个技术方案为：提供一种卵巢癌检测产品或试剂盒，包括检测上皮细胞粘附分子、卵巢癌抗原CA125、黏蛋白1和切除修复交叉互补基因1四种基因mRNA水平的物质。本专利技术的另一技术方案为：提供一种上皮细胞粘附分子、卵巢癌抗原CA125、黏蛋白1和切除修复交叉互补基因1的基因组合在制备诊断或辅助诊断卵巢癌的产品。本专利技术的又一技术方案为：提供一种卵巢癌检测试剂盒，包括使用荧光定量聚合酶链式反应检测样品中上皮细胞粘附分子、卵巢癌抗原CA125、黏蛋白1和切除修复交叉互补基因1四种基因mRNA水平的物质，所述检测的样品为利用免疫磁珠结合微流控法富集的受检者外周血中的循环肿瘤细胞。优选的，上述的卵巢癌检测试剂盒中，所述物质包括同一PCR反应体系的5个引物组和5个探针；所述5个引物组分别为：SEQIDNO：1和SEQIDNO：2；SEQIDNO：3和SEQIDNO：4；SEQIDNO：5和SEQIDNO：6；SEQIDNO：7和SEQIDNO：8；SEQIDNO：9和SEQIDNO：10；所述5个探针分别为：SEQIDNO：11-15。本专利技术有益效果在于：本专利技术的卵巢癌检测产品或试剂盒，所用检测样品为利用免疫磁珠结合微流控法富集的受检者外周血中的循环肿瘤细胞(CirculatingTumorCells，CTC)，其利用荧光定量聚合酶链式反应技术对CTC中的一组卵巢癌特异性高表达基因的mRNA含量进行测定，并通过对比CTC与正常血液白细胞中几种基因mRNA水平来判断该受检者是否患有卵巢癌。该组基因包括上皮细胞粘附分子(Epithelialcelladhesionmolecule，EpCAM)、卵巢癌抗原CA125(OvariancarcinomaantigenCA125)、黏蛋白1(Mucin1，MUC1)，切除修复交叉互补基因1(ExcisionRepairCross-ComplementationGroup1，ERCC1)。使用本专利技术产品及试剂盒进行检测对比现有临床检测产品敏感度高，特异性好；可早于影像学预知判断；即时反应，随时监测；取样便捷，安全性高。附图说明图1为本专利技术具体实施方式的卵巢癌与卵巢癌良性肿瘤血样的基因相对表达水平图；图2本专利技术具体实施方式的卵巢癌与子宫内膜样腺癌血样的基因相对表达水平图。具体实施方式为详细说明本专利技术的
技术实现思路
、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式并配合附图详予说明。本专利技术最关键的构思在于：对CTC中的一组卵巢癌特异性高表达基因的mRNA含量进行测定，并通过对比CTC与正常血液白细胞中这几种基因mRNA水平来判断该受检者是否患有卵巢癌。本专利技术缩略语对应如下：CTC：循环肿瘤细胞；qRT-PCR：荧光定量聚合酶链式反应；EpCAM：上皮细胞粘附分子；CA125：卵巢癌抗原CA125；MUC1：黏蛋白1；ERCC1：切除修复交叉互补基因1；本专利技术提供一种卵巢癌检测产品，包括检测上皮细胞粘附分子、卵巢癌抗原CA125、黏蛋白1和切除修复交叉互补基因1四种基因mRNA水平的物质组成。实施例一一种卵巢癌检测试剂盒，包括使用荧光定量聚合酶链式反应检测检测样品中上皮细胞粘附分子、卵巢癌抗原CA125、黏蛋白1和切除修复交叉互补基因1四种基因mRNA水平的物质组成，所述检测的样品为利用免疫磁珠结合微流控法富集的受检者外周血中的循环肿瘤细胞。上述试剂盒组成：本专利技术针对检测样品试剂盒包括：PCR引物组(包括PCR上游引物和下游引物)、PremixExTaq(qPCR)、pooledassay、PremixExTaq(ProbeqPCR)、TaqManprobe、ROXReferenceDyeII、ddH2O(灭菌蒸馏水)。所述PCR引物组如下：1)序列为GATGGGATTTCCATTGATGACA(SEQIDNO：1)的引物和序列为ATTCCACCCATGGCAAATTC(SEQIDNO：2)的引物所组成的引物组；2)序列为CTCGCGTTCG本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卵巢癌检测产品，其特征在于，包括检测上皮细胞粘附分子、卵巢癌抗原CA125、黏蛋白1和切除修复交叉互补基因1四种基因mRNA水平的物质。

【技术特征摘要】
1.一种卵巢癌检测产品，其特征在于，包括检测上皮细胞粘附分子、卵巢癌抗原CA125、黏蛋白1和切除修复交叉互补基因1四种基因mRNA水平的物质。2.上皮细胞粘附分子、卵巢癌抗原CA125、黏蛋白1和切除修复交叉互补基因1的基因组合在制备诊断或辅助诊断卵巢癌产品中的应用。3.一种卵巢癌检测试剂盒，其特征在于，包括使用荧光定量聚合酶链式反应检测检测样品中上皮细胞粘附分子、卵巢癌抗原CA125、黏蛋白1和切除修复交叉互补基因1四种基因mRNA水平的物质，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张磊，张茜，
申请(专利权)人：亚能生物技术深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44