生理活性物质的搜寻方法、生产该物质的方法以及用搜寻方法找到的药物技术

一种以一定的可预测性有效地搜寻新的生理活性物质的方法。该搜寻方法包括，在对体内物质产生桔抗剂的细胞的受体或对细胞本身产生括抗剂的细胞的受体中，通过比较所述受体的ｃＤＮＡ序列，寻找有两种或多种大小氨基酸序列的受体；然后通过比较上述ｃＤＮＡ序列确定较短受体缺失了较长受体的哪些区域。利用该方法，提供了包含具有ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１或５所示氨基酸序列的肽的治疗糖尿病的药物、包含具有ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示氨基酸序列的肽的胰岛素产生调节剂、以及包含具有ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３或４所示氨基酸序列的肽的胃酸分泌抑制剂。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及搜寻各种新的生理活性物质的方法、生产该物质的方法以及用该搜寻方法找到的药物。相关技术在现有技术中，搜寻未知的生理活性物质涉及分析体液或组织中存在的组分，鉴定并分离出新物质，以及研究所发现新物质的生理活性。上述现有技术的方法包括分析体内的组分，寻找新物质并研究它们的生理活性。然而，体内存在的组分数量非常多，而生理活性物质通常仅以低浓度存在，因此寻找新物质是一项困难的任务。另外，由于体内发生了数量众多的生理反应，因此，寻找新发现物质所具有的生理活性特征也很困难。因此，用现有技术的方法寻找新的生理活性物质是一项困难的任务。本专利技术揭示因此，本专利技术的一个目的是提供一种搜寻新的生理活性物质，具有一定可预测性的更有效的方法。另外，本专利技术的另一个目的是提供上述方法找到的生理活性物质的生产方法。另外，本专利技术的一个目的是提供用于用本专利技术上述方法找到的治疗糖尿病的新药，胰岛素产生调节剂，胃酸分泌调节剂和生长激素分泌调节剂。本专利技术者已经专利技术了一种能以一定的可预测性来搜寻新的生理活性物质的更有效的方法，并提交了专利申请(专利待公开出版物平10-109997)。该方法基于这样的发现在物质的受体(其中在体内存在对该受体有拮抗作用的物质或细胞)，或物质A的受体(在体内存在对响应所述物质A的细胞有拮抗作用的细胞或物质)中，当相同受体有两种或多种大小时，则缺失的部分，即已被剪切的氨基酸序列部分，具有与所述受体有关的生理活性。在进行先前申请专利中的上述搜寻方法中，当受体存在两个或多个cDNA序列时，也可根据其cDNA碱基序列来推定受体的氨基酸序列，而且该方法不局限于基于已知实际存在的受体氨基酸序列的方法，在实际确认了这些观点后，专利技术者完成了本专利技术。即，本专利技术提供了一种搜寻生理活性物质的方法，该方法包括通过比较受体的cDNA序列，确定对于同一受体具有两种或多种大小氨基酸序列的肽，其中受体是对体内存在物质产生拮抗剂的细胞的受体，或是对细胞本身产生拮抗剂的细胞的受体；然后通过比较上述cDNA的序列，确定较短受体中缺失了较长受体的哪些区域。另外，本专利技术还提供了生理活性肽的生产方法，即生产用本专利技术上述方法确定的缺失区域或其衍生物。另外，本专利技术提供了用于治疗糖尿病的药物，该药物含有一种肽作为活性组分，该肽具有促进胰岛素产生细胞产生胰岛素的作用，所述肽是用本专利技术上述方法成功寻找并找到的那些肽，并具有序列表中SEQ ID NO1或5所示的氨基酸序列，或具有所述序列(SEQ ID NO1或5)经内部置换、缺失、插入或加入一个或数个氨基酸所获得的氨基酸序列。另外，本专利技术提供了胰岛素产生调节剂，它含有一种肽作为活性组分，该肽具有调节胰岛素产生细胞产生胰岛素的作用，所述肽具有序列表中SEQ ID NO2所示的氨基酸序列，或具有所述序列(SEQ ID NO2)经内部置换、缺失、插入或加入一个或数个氨基酸而获得的氨基酸序列。另外，本专利技术提供了胃酸分泌调节剂，它含有一种肽作为活性组分，该肽具有调节胃酸分泌的作用，所述肽具有序列表中SEQ ID NO3或4所示的氨基酸序列，或具有所述序列(SEQ ID NO3或4)经内部置换、缺失、插入或加入一个或数个氨基酸而获得的氨基酸序列。本专利技术提供了生长激素产生调节剂，它含有一种肽作为活性组分，该肽具有调节激素产生的作用，具有序列表中SEQ ID NO6所示的氨基酸序列，或具有所述序列(SEQ ID NO6)经内部置换、缺失、插入或加入一个或数个氨基酸而获得的氨基酸序列。本专利技术提供了一种根据cDNA碱基序列、以一定可预测性来有效搜寻新的生理活性物质的方法。在本专利技术的方法中，通过检查参与拮抗作用的物质的受体，可以找到新的生物活性物质，因此不必象现有技术那些需要从含有许多组分的生物样品中分离出微量存在的生理活性物质。另外，所搜寻到的生理活性物质的生理活性就是参与上述拮抗作用的活性，因此，搜寻其生理活性也比现有技术容易得多。因此，根据本专利技术方法来搜寻新的生理活性物质，其效率比现有技术要高得多。另外，本专利技术还提供用于治疗糖尿病的新药，该药具有很好的增加胰岛素产生的作用。另外，还提供了新的胰岛素产生调节剂、胃酸分泌调节剂和生长激素产生调节剂。专利技术较佳实施方案在本专利技术的搜寻生理活性物质的方法中，在对体内物质产生拮抗剂的细胞的受体之中，或在对所述细胞本身产生拮抗剂的细胞的受体之中，通过比较受体的cDNA序列，来检查对于同一受体有两种或多种大小的氨基酸序列，然后通过比较上述cDNA的序列或成熟mRNA的序列，检查出较短受体中缺少了较长受体的哪些区域。即，本专利技术方法涉及根据成熟mRNA碱基序列中的不同而产生大小不同的两种或多种受体的情况。换句话说，本专利技术方法搜寻的是mRNA水平的剪接差异。除了灭活基因表达外，还不完全了解mRNA水平的剪接差异(通常不会发生)所产生的剪接的作用。存在这样的情况有些序列最初应被翻译而后来没有被翻译，相反，也有些序列不应被翻译却被表达。在大多数情况下，由于剪接没有合适地进行，甚至不能表达出氨基酸，但是在其他情况下，实际情况却是剪接产生的氨基酸序列或被缺失的那些氨基酸序列能有效地起作用。本专利技术的方法包括搜寻这些在mRNA水平的剪接差异。本专利技术方法涉及检查上述受体cDNA的碱基序列，并寻找相同受体的cDNA以不同大小存在的那些受体。该工作可这样进行，测定所述受体cDNA的碱基序列及其大小数次，或者如果该信息在文献中有报道，则利用该信息。胰高血糖素受体、FGF受体和GIP受体是同一受体存在大小不同的两种或多种cDNA的受体例子。可通过产生与已认为有生理活性的序列缺失区域相同的肽，来获得生理活性物质。在大多数情况下，缺失区域由较短的肽组成，因此在这些情况下，所述生理活性物质可用市售的肽合成仪通过化学合成轻易制得。或者，它们可用本领域的基因工程技术制得。所得生理活性物质的生理活性参与上述拮抗作用，因此很容易用满足各种拮抗作用的合适方法来确认。另外，如本领域技术人员所熟知的，一般来说，在具有生理活性的肽中，即使少数氨基酸被其他氨基酸置换、加入少数氨基酸或缺失少数氨基酸，其生理活性也能维持。因此，以下物质的生产也在本专利技术范围内，该物质具有由上述缺失区域组成的生理活性物质的生理活性，且在构成上述缺失区域的氨基酸中有少数氨基酸被其他氨基酸置换、加入了少数氨基酸或缺失少数氨基酸(在本专利技术专利申请中，这些物质称为上述缺失区域的“衍生物”)。这些衍生物与上述缺失区域的同源性宜在70％以上，更佳的为90％。本专利技术者利用上述的本专利技术搜寻方法发现了一种肽，它具有促进胰岛素产生细胞产生胰岛素的作用。由于该肽具有促进胰岛素产生细胞产生胰岛素的作用，因此它可有效地作为治疗糖尿病的药物，即如下文实施方案所述的，在公众域内的文献中提到了胰高血糖素受体存在几种大小不同的cDNA，通过比较这些cDNA的碱基序列，检查编码较短氨基酸序列的碱基序列缺失了编码较长氨基酸序列的碱基序列中的哪些区域，并推断出缺失区域的氨基酸序列(SEQ ID NO1)。然后，化学合成具有SEQ ID NO1所示氨基酸序列的肽，当将该肽给予胰岛素产生细胞，所述细胞的胰岛素产生显著增加。这样就知道，具有SEQ ID NO1所示氨基酸序列的肽可有效作为治疗糖尿病本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种搜寻生理活性物质的方法，该方法包括：通过比较受体的ｃＤＮＡ序列，检查同一受体有两种或多种大小氨基酸序列的受体，其中受体是对体内物质产生拮抗剂的细胞的受体，或是对所述细胞本身产生拮抗剂的细胞的受体；然后通过比较ｃＤＮＡ序列检查较短受体缺失了较长受体的哪些区域。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：坂本贤二，
申请(专利权)人：坂本贤二，名越秀夫，
类型：发明
国别省市：JP[日本]