新疆一枝蒿多糖提取方法技术

本发明专利技术涉及一种新疆一枝蒿多糖提取方法，该方法利用超声波辅助提取工艺，并结合动态大孔吸附树脂法脱蛋白，提取率高、工艺简单、成本低、适合工业化大生产，新疆一枝蒿多糖粗品的提取率至少为3.11％，在浓度为2.5mg/mL时对羟自由基和DPPH的清除作用均高于60％，纯化多糖粗品的多糖得率至少为77.9％。

Xinjiang Artemisia polysaccharide extraction method

The invention relates to a Xinjiang Artemisia polysaccharide extraction method, the method of using ultrasonic assisted extraction technology, combined with the dynamic macroporous resin method for removing protein, high extraction rate, simple process, low cost, suitable for industrial production, the extraction rate of Xinjiang Artemisia polysaccharide crude product of at least 3.11%, when the concentration is 2.5mg/mL clear effect of hydroxyl radicals and DPPH were higher than 60%, purification of polysaccharide the crude polysaccharide yield of at least 77.9%.

【技术实现步骤摘要】
新疆一枝蒿多糖提取方法
本专利技术涉及一种多糖提取方法，具体涉及新疆一枝蒿多糖提取方法，属于生物医药领域。
技术介绍
多糖(Polysaccharide，PS)是由醛糖或酮糖通过糖苷键聚合而成的大分子，广泛存在于动、植物和微生物中。多糖作为一种重要的生命物质，具有抗氧化、抗衰老、抗病毒、抗肿瘤、抗疲劳、降血糖等多种生物活性。现如今己有不少研究结果表明，糖类作为信息分子在受精、发生、发育分化，神经系统的维持等方面起着重要作用。另外，炎症和自身免疫疾病、老化、癌细胞的异常增殖和转换，细胞识别和病原体感染等生物学过程中也都有糖类的介导。新疆一枝蒿为菊科蒿属的一种多年生草本植物，味苦，性寒，是维吾尔族传统药材，具有驱风活血、清热解毒、散瘀消肿、健胃消食、抗过敏、抗肿瘤、止吐、止血、解蛇毒等多重功效。临床上用于治疗感冒发烧、肝炎、消化不良、荨麻疹、过敏性疾病等。维吾尔语称之为“一孜乎艾曼尼”。新疆一枝蒿化学成分主要包括黄酮类、倍半萜类、多糖等物质。徐鑫等(新疆一枝蒿多糖的体外抗氧化性研究，食品科技，2011年第36卷第12期)研究表明，新疆一枝蒿多糖含量高，具有抗氧化、抗衰老活性。因此优化新疆一枝蒿多糖的提取工艺，对于新疆一枝蒿植物资源的综合利用具有重要的意义。现有的新疆一枝蒿多糖提取工艺有水煮法、微波辅助法，均存在提取率低、工艺复杂、成本高、不适合工业化大生产等缺陷。
技术实现思路
本专利技术提供了一种提取率高、工艺简单、成本低、适合工业化大生产的新疆一枝蒿多糖超声波辅助提取工艺。根据本专利技术的一个方面，提供一种新疆一枝蒿多糖提取方法，包括以下步骤：(1)取新疆一枝蒿，置于浓度为75-100％(优选85-98％，最优选95％)的乙醇中，热水浴下回流，晾干。该步骤可以除去脂类、低聚糖、单糖和色素。(2)取步骤(1)中晾干的新疆一枝蒿粉碎，置于水中，利用超声波辅助提取新疆一枝蒿多糖，将提取液过滤后浓缩。(3)取步骤(2)中浓缩后的提取液，加入浓度为75-100％(优选85-98％，最优选95％)的乙醇，进行醇沉，取沉淀物，干燥得新疆一枝蒿多糖。此时得到的新疆一枝蒿多糖为粗品。在优选的技术方案中，本专利技术的提取方法进一步包括步骤(4)利用动态大孔吸附树脂法进行纯化以脱蛋白，得脱去游离蛋白的新疆一枝蒿多糖。在优选的实施方案中，步骤(1)中，回流2-5次，更优选2-3次，最优选2次；每次0.5-5h，更优选每次1-3h，最优选每次2h；料液比为1:2-1:7(g:mL)，更优选为1:3-1:5(g:mL)，最优选为1:4(g:mL)。在优选的实施方案中，步骤(2)中，粉碎的新疆一枝蒿过40-60目筛，更优选过40-50目筛，最优选过40目筛；料液比为1:10-1:50(g:mL)，更优选为1:20-1:40(g:mL)，最优选为1:30(g:mL)；提取温度为40-80℃，更优选为60-80℃，最优选为72℃；提取时间为1-5h，更优选为2-3h，最优选为2.5h；超声波功率为200-500W，更优选为300-400W，最优选为350W；在水浴下浓缩，进一步优选水浴温度为70-90℃，更优选75-85℃，最优选为80℃。在优选的实施方案中，步骤(3)中，浓缩后的提取液和乙醇的体积比为1:3-1:5，更优选为1:4-1:5，最优选为1:4；醇沉时间为4-24h，更优选为8-16h，最优选为12h；醇沉后离心获得沉淀物，更优选3000-4500r/min离心5-15min，最优选4000r/min离心10min。在优选的实施方案中，步骤(4)中树脂为HPD-300树脂、LS-46D树脂或HP-600树脂；优选，按湿法装柱，加入浓度为1.5-4.0％(优选2.0-3.0％，最优选3.0％)的新疆一枝蒿多糖水溶液，用蒸馏水洗脱，收集后得脱去游离蛋白的新疆一枝蒿多糖。在进一步优选的实施方案中，步骤(4)中，新疆一枝蒿多糖溶液的流速为0.5-2.5mL/min，更优选为0.8-2.0mL/min，最优选为1.0mL/min；蒸馏水的流速为0.2-2.0mL/min，更优选为0.3-1.5mL/min，最优选为0.5mL/min。根据本专利技术的另一个方面，本专利技术还涉及根据上述提取方法提取得到的新疆一枝蒿多糖。本专利技术的新疆一枝蒿多糖可用于制备抗衰老的保健品和药品。与现有技术相比，本专利技术的优点是新疆一枝蒿多糖粗品的提取率至少为3.11％，较传统水煮法提取工艺多糖提取率(1.67％)提高1.64％。且本专利技术成本低，提取条件准确可靠，工艺流程简单，可实现大规模生产。本专利技术制备得到的新疆一枝蒿多糖粗品在浓度为2.5mg/mL时对羟自由基和DPPH的清除作用均高于60％。本专利技术纯化多糖粗品的方法，多糖得率至少为77.9％，而利用静态大孔吸附树脂法脱蛋白法纯化多糖粗品的方法，多糖得率仅为51.7％，利用酶法—Sevage法联合脱蛋白法纯化多糖粗品的方法，多糖得率仅为50.5％。下面通过说明书附图和具体实施方式对本专利技术做进一步介绍。附图说明图1本专利技术的新疆一枝蒿多糖粗品清除羟自由基和DPPH的活性具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外，应理解，在阅读了本专利技术所记载的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本专利技术所限定的范围。实施例1(1)取新疆一枝蒿，置于浓度为95％的乙醇中，料液比为1:4(g:mL)，热水浴下回流2次，每次2h，晾干。(2)将步骤(1)中晾干的新疆一枝蒿粉碎，过40目筛，置于水中，利用超声波辅助提取新疆一枝蒿多糖，料液比为1:30(g:mL)，提取温度为72℃，提取时间为2.5h，超声波功率为350W，将提取液过滤后，80℃水浴浓缩。(3)取步骤(2)中浓缩后的提取液，加入4倍提取液体积的浓度为95％的乙醇进行醇沉，醇沉时间为12h，4000r/min离心10min，获得沉淀物，干燥得新疆一枝蒿多糖。(4)利用HPD-300动态大孔吸附树脂法脱蛋白：湿法装柱，加入浓度为3.0％的新疆一枝蒿多糖溶液(流速为1.0mL/min)，用蒸馏水洗脱(流速为0.5mL/min)，收集后得脱去游离蛋白的新疆一枝蒿多糖。本实施例中，多糖粗品提取率为3.11％，纯化多糖粗品的方法多糖得率为79.6％。其中多糖粗品提取率的计算方法为：新疆一支蒿多糖粗品提取率(％)＝多糖粗品质量/原料质量×100％纯化多糖方法的多糖得率的计算方法为：新疆一支蒿纯化多糖得率(％)＝脱去游离蛋白的多糖质量/多糖粗品质量×100％实施例2(1)取新疆一枝蒿，置于浓度为95％的乙醇中，料液比为1:4(g:mL)，热水浴下回流2次，每次2h，晾干。(2)将步骤(1)中晾干的新疆一枝蒿粉碎，过40目筛，置于水中，利用超声波辅助提取新疆一枝蒿多糖，料液比为1:20(g:mL)，提取温度为70℃，提取时间为2.5h，超声波功率为350W，将提取液过滤后，80℃水浴浓缩。(3)取步骤(2)中浓缩后的提取液，加入4倍提取液体积的浓度为95％的乙醇进行醇沉，醇沉时间为12h，4000r/min离心10min，获得沉淀物，干燥得新疆一枝蒿多糖。(4)利用HPD-300动态大孔吸附树脂法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新疆一枝蒿多糖提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取新疆一枝蒿，置于浓度为75‑100％(优选85‑98％，最优选95％)的乙醇中，热水浴下回流，晾干。(2)将步骤(1)中晾干的新疆一枝蒿粉碎，置于水中，利用超声波辅助提取新疆一枝蒿多糖，将提取液过滤后浓缩。(3)取步骤(2)中浓缩后的提取液，加入浓度为75‑100％(优选85‑98％，最优选95％)的乙醇，进行醇沉，取沉淀物，干燥得新疆一枝蒿多糖。

【技术特征摘要】
1.一种新疆一枝蒿多糖提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取新疆一枝蒿，置于浓度为75-100％(优选85-98％，最优选95％)的乙醇中，热水浴下回流，晾干。(2)将步骤(1)中晾干的新疆一枝蒿粉碎，置于水中，利用超声波辅助提取新疆一枝蒿多糖，将提取液过滤后浓缩。(3)取步骤(2)中浓缩后的提取液，加入浓度为75-100％(优选85-98％，最优选95％)的乙醇，进行醇沉，取沉淀物，干燥得新疆一枝蒿多糖。2.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，进一步包括以下步骤：(4)利用动态大孔吸附树脂法进行纯化以脱蛋白，得脱去游离蛋白的新疆一枝蒿多糖。3.如权利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，优选，步骤(1)中回流2-5次，更优选2-3次，最优选2次；每次0.5-5h，更优选每次1-3h，最优选每次2h；优选，步骤(1)中料液比为1:2-1:7(g:mL)，更优选为1:3-1:5(g:mL)，最优选为1:4(g:mL)。4.如权利要求1-3中任一项所述的提取方法，其特征在于，优选，步骤(2)中粉碎的新疆一枝蒿过40-60目筛，更优选过40-50目筛，最优选过40目筛；优选，步骤(2)中料液比为1:10-1:50(g:mL)，更优选为1:20-1:40(g:mL)，最优选为1:30(g:mL)；优选，步骤(2)中提取温度为40-80℃，更优选为60-80℃，最优选为72℃；优选，步骤(2)中提取时间为1-5h，更优选为2-3h，最优选为2.5h；优选，步骤(2)中超声波功率为200-...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘春兰，包瑛，岳丽君，黄雅婷，申翔宇，
申请(专利权)人：中央民族大学，
类型：发明
国别省市：北京,11