一种抗菌生物膜及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种抗菌生物膜及其制备方法，首先采用抗菌肽酰胺化果胶，得到抗菌肽修饰的果胶；然后将所述抗菌肽修饰的果胶溶解，得到抗菌肽修饰的果胶溶液，将其与胶原蛋白溶液混合，均化，得到成膜溶液；最后将所述成膜溶液制备形成抗菌生物膜。本发明专利技术采用抗菌肽对果胶进行酰胺化，然后与胶原蛋白符合得到抗菌生物膜，使得所述抗菌生物膜具有高效、广谱的特点，具有广阔的研究前景和实用价值。

Antibacterial biological film and preparation method thereof

The invention discloses a biological antibacterial film and its preparation method, the antibacterial peptide amidation pectin, pectin has antibacterial peptide modified; then the antibacterial peptide modified pectin solution, obtained pectin solution antibacterial peptide modified, the collagen solution mixing, homogenizing, get the film-forming solution; finally will the film-forming solution preparation of antibacterial membrane. The invention adopts the antibacterial peptide amidating of pectin, and then obtain the antibacterial membrane with collagen, so that the characteristics of antibacterial membrane has the advantages of high efficiency, broad spectrum, has broad research prospect and practical value.

【技术实现步骤摘要】
一种抗菌生物膜及其制备方法
本专利技术涉及医疗
，具体涉及以一种抗菌生物膜及其制备方法。
技术介绍
抗菌肽是生物体先天性免疫系统的重要组成成分，是多种不同具有抗菌活性碱性多肽分子的统称。抗菌肽具有高效、广谱抗菌活性，可以快速查杀靶标，主要可作用于革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌、真菌、寄生虫等。抗菌肽还具有潜在的抗肿瘤活性，以及能加速机体免疫和伤口愈合过程等功能，使其可能成为代替传统抗生素和抗肿瘤药物的一种新型药物。但是目前，现有的抗菌生物膜一般使用具有抗菌、消炎等医疗作用的壳聚糖材料制备，但是壳聚糖容易降解，所以得到抗菌生物膜存在不稳定易降解的问题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种抗菌生物膜及其制备方法。本专利技术所采取的技术方案是：一种抗菌生物膜的制备方法，包括以下步骤：S1：抗菌肽酰胺化果胶，得到抗菌肽修饰的果胶；S2：将所述抗菌肽修饰的果胶溶解，得到抗菌肽修饰的果胶溶液，将其与胶原蛋白溶液混合，均化，得到成膜溶液；S3：将所述成膜溶液制备形成抗菌生物膜。在一些优选的实施方式中，所述S1的具体步骤为：取抗菌肽溶液和果胶溶液混合，反应，过滤，取沉淀物洗涤，干燥，其中，所述抗菌肽溶液和所述果胶溶液中抗菌肽与果胶的质量比为(0.8-5)：1。在上述方案的优选的实施方式中，果胶为高甲氧基果胶。在上述方案的优选的实施方式中，取抗菌肽溶液和果胶溶液混合后，于10-15℃反应1-3h。在上述方案的优选的实施方式中，所述S1中的洗涤包括采用酒精溶液洗涤、pH为2-5的酒精溶液洗涤和酒精溶液洗涤三步。在一些优选的实施方式中，所述S2的具体步骤为：将所述抗菌肽修饰的果胶溶于乙酸溶液中，再加入甘油，得到抗菌肽修饰的果胶溶液，将其与胶原蛋白溶液混合，均化，调节pH至3-6.5，得到成膜溶液。在上述方案的优选的实施方式中，所述成膜溶液中抗菌肽修饰的果胶与胶原蛋白的质量比为1：(0.3-0.8)。在上述方案的优选的实施方式中，所述抗菌肽修饰的果胶溶液中抗菌肽修饰的果胶与甘油的质量比为1：(1-0.1)。在上述方案的优选的实施方式中，所述乙酸溶液的浓度为0.5-2wt％。此外，本专利技术还提供了采用如上所述的抗菌生物膜的制备方法制备得到的抗菌生物膜。本专利技术的有益效果是：针对目前的抗菌生物膜不稳定易降解的问题，本专利技术提供了一种抗菌生物膜及其制备方法，首先采用抗菌肽酰胺化果胶，得到抗菌肽修饰的果胶；然后将所述抗菌肽修饰的果胶溶解，得到抗菌肽修饰的果胶溶液，将其与胶原蛋白溶液混合，均化，得到成膜溶液；最后将所述成膜溶液制备形成抗菌生物膜。抗菌肽具有明显的两亲性，其N端分子富含亲水性氨基酸残基，特别是赖氨酸和精氨酸，而C端则含较多的疏水性氨基酸残基，且大部分被酰胺化，且酰胺化对抗菌活性具有重要作用，而且也能保护抗菌肽免受酶的降解作用从而延长在体内的半寿期或增大肽与受体的亲和力；果胶是一种复杂的多糖聚合物，可在碱性条件下进行酰胺化反应制备酰胺化果胶，酰胺化果胶可用于医药行业中用作治疗腹泻药物的组成成分以及促进伤口愈合等；胶原蛋白是一种生物性高分子物质，具有高亲水性、低毒性、弱抗原性、良好生物相容性、完全的生物可降解性等优点；本专利技术采用抗菌肽对果胶进行酰胺化，然后与胶原蛋白符合得到抗菌生物膜，使得所述抗菌生物膜具有高效、广谱的特点，具有广阔的研究前景和实用价值。具体实施方式实施例1：取高甲氧基果胶生产中得到果胶的浓缩液，使其果胶浓度在2％；将抗菌肽与95％的酒精混合，得到抗菌肽溶液，控制抗菌肽浓度在7％；将上述的抗菌肽溶液和果胶溶液按体积比3∶1的比例混合，12℃反应2h；反应结束后取出沉淀物，过滤，滤饼用60％酒精洗涤，再用pH3.5的60％的酒精溶液洗涤，然后用60％酒精洗涤；滤饼在60℃下干燥，粉碎，抗菌肽修饰的果胶。将浓度为3wt％抗菌肽修饰的果胶溶解在浓度为1wt％乙酸溶液中，然后向其中加入甘油，甘油的投加量为抗菌肽修饰的果胶的质量的25％，制备得到抗菌肽修饰的果胶溶液。将浓度为10wt％胶原蛋白溶解在蒸馏水中并加入甘油，甘油的投加量为胶原蛋白的质量的25％，得到胶原蛋白溶液。将抗菌肽修饰的果胶溶液和胶原蛋白溶液混合，达到抗菌肽修饰的果胶与胶原蛋白的质量比为1：0.6。复合得到的混合物用均化器(PT10-35，Kinematica)以3000rpm的转速均化60秒，用氢氧化钠溶液调节pH到5，得到成膜溶液。将成膜溶液通过尼龙筛过滤，以除去不溶的残留物并在真空下脱气。再将成膜溶液流延在平坦的特氟龙涂布的玻璃板上，面积为260x260mm，以达到大约70μm的均匀膜厚度。在25℃干燥2天后，将干燥的膜从板上剥离，得到抗菌生物膜，并切成片用于分析。对抗菌生物膜的抗菌效果进行分析，得到实验结果如表1，测量生物膜的抗菌效果的方法为CLSI标准方法，即空白原膜(果胶未经抗菌肽修饰直接与胶原蛋白复合制备的生物膜)与制备的抗菌生物膜分别切成相同大小的圆片(直径大小2cm)，置于琼脂培养皿中培养24小时，温度37℃，菌种为大肠杆菌(Escherichiacoli，编号：GIM1.355，购于广东省微生物所菌种保藏中心)。培养完成后测量样品周边空白区直径，空白区即抗菌区，没有菌种生长。空白区大则表示抗菌效果好，反之表示抗菌效果差。从表1中可看出，本专利技术的抗菌生物膜具有明显的抗菌效果。表1抗菌生物膜的抗菌效果实施例2：本实施例与实施例1基本相同，不同之处在于：所述果胶溶液中果胶浓度为2％；将抗菌肽与95％的酒精混合，得到抗菌肽溶液，控制抗菌肽浓度在6％；反应结束后取出沉淀物，过滤，滤饼用60％酒精洗涤，再用pH2的60％的酒精溶液洗涤，然后用60％酒精洗涤；将上述的抗菌肽溶液和果胶溶液按体积比3∶1的比例混合，10℃反应3h；将浓度为3wt％抗菌肽修饰的果胶溶解在浓度为0.5wt％乙酸溶液中，然后向其中加入甘油，甘油的投加量为抗菌肽修饰的果胶的质量，制备得到抗菌肽修饰的果胶溶液；所述成膜溶液中抗菌肽修饰的果胶与胶原蛋白的质量比为1：0.3，所述成膜溶液的pH为3。实施例3：本实施例与实施例1基本相同，不同之处在于：所述果胶溶液中果胶浓度为5％；将抗菌肽与95％的酒精混合，得到抗菌肽溶液，控制抗菌肽浓度在1％；反应结束后取出沉淀物，过滤，滤饼用60％酒精洗涤，再用pH5的60％的酒精溶液洗涤，然后用60％酒精洗涤；将上述的抗菌肽溶液和果胶溶液按体积比1∶1的比例混合，15℃反应1h；将浓度为3wt％抗菌肽修饰的果胶溶解在浓度为2wt％乙酸溶液中，然后向其中加入甘油，甘油的投加量为抗菌肽修饰的果胶的质量的10％；所述成膜溶液中抗菌肽修饰的果胶与胶原蛋白的质量比为1：0.8，所述成膜溶液的pH为6.5。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗菌生物膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：抗菌肽酰胺化果胶，得到抗菌肽修饰的果胶；S2：将所述抗菌肽修饰的果胶溶解，得到抗菌肽修饰的果胶溶液，将其与胶原蛋白溶液混合，均化，得到成膜溶液；S3：将所述成膜溶液制备形成抗菌生物膜。

【技术特征摘要】
1.一种抗菌生物膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：抗菌肽酰胺化果胶，得到抗菌肽修饰的果胶；S2：将所述抗菌肽修饰的果胶溶解，得到抗菌肽修饰的果胶溶液，将其与胶原蛋白溶液混合，均化，得到成膜溶液；S3：将所述成膜溶液制备形成抗菌生物膜。2.根据权利要求1所述的抗菌生物膜的制备方法，其特征在于，所述S1的具体步骤为：取抗菌肽溶液和果胶溶液混合，反应，过滤，取沉淀物洗涤，干燥，其中，所述抗菌肽溶液和所述果胶溶液中抗菌肽与果胶的质量比为（0.8-5）：1。3.根据权利要求2所述的抗菌生物膜的制备方法，其特征在于，果胶为高甲氧基果胶。4.根据权利要求2或3所述的抗菌生物膜的制备方法，其特征在于，取抗菌肽溶液和果胶溶液混合后，于10-15℃反应1-3h。5.根据权利要求2或3所述的抗菌生物膜的制备方法，其特征在于，所述S1中的洗涤包...

【专利技术属性】
技术研发人员：佘振安，
申请(专利权)人：深圳齐康医疗器械有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44