鱼藤酮用于治疗动脉粥样硬化的用途制造技术

本发明专利技术公开了鱼藤酮用于制备治疗动脉粥样硬化药物的用途。

Use of rotenone for the treatment of atherosclerosis

The present invention discloses the application of rotenone in preparing medicine for curing atherosclerosis.

【技术实现步骤摘要】
鱼藤酮用于治疗动脉粥样硬化的用途
本专利技术涉及鱼藤酮在制备药物中的应用，具体是鱼藤酮在制备治疗动脉粥样硬化药物中的新应用。
技术介绍
随着中国经济的快速发展，国人的生活水平得到了大幅度提高，生活方式也发生了巨大的改变，与之相对应的是心血管疾病的发生率和死亡率大大增高，这不但严重影响了患者的寿命及生活质量，也给国家和患者家庭带来极大的经济负担。有效防治心血管疾病已经成为中国乃至世界性的一个难题。动脉粥样硬化是一种慢性炎症性动脉疾病，它是冠心病、脑中风以及外周血管疾病的主要病理基础，因此，开发新型治疗动脉粥样硬化药物依然是治疗心血管疾病的关键。动脉粥样硬化的病变先从内膜开始，内膜损伤后机体会启动内膜损伤修复，局部浸润的巨噬细胞会摄取ox-LDL，形成泡沫细胞，血管平滑肌会增殖迁移到内膜，在这些过程中，不但需要大量的能量供应，还会伴发产生大量代谢相关的损伤性产物，比如超氧阴离子等。鱼藤酮（又称毒鱼藤，英文名tubatoxin），存在于豆科鱼藤属植物的种子、茎部和根部，不溶于水，溶于醇、丙酮、氯仿、四氯化碳、乙醚等。主要用作农用杀虫剂，也可防治人畜体外寄生虫和生化研究。防治对象有：蚜虫、飞虱、黄条跳甲、蓟马、黄守瓜、猿叶虫、菜青虫、斜纹夜蛾、甜菜夜蛾、小菜蛾等。在毒理学上是一种专属性很强的物质，对昆虫尤其是菜粉蝶幼虫、小菜蛾和蚜虫具有强烈的触杀和胃毒两种作用。早期的研究表明鱼藤酮主要是与NADH脱氢酶与辅酶Q之间的某一成分发生作用，使害虫细胞的电子传递链受到抑制，从而降低生物体内的ATP水平最终使害虫得不到能量供应，然后行动迟滞、麻痹而缓慢死亡。目前，尚无关于鱼藤酮用于治疗动脉粥样硬化的任何报道。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足，本专利技术目的在于提供鱼藤酮治疗动脉粥样硬化的应用，提供了一种新的治疗候选药物。补充了现有治疗药物的不足。本专利技术采用的技术方案如下：专利技术人的设想：适度的抑制线粒体功能，一方面可以减少能量的供应，减轻血管损伤部位过度的增殖性修复，同时也可以减少超氧阴离子等损伤性产物的生成，进而减轻动脉粥样硬化的形成和进展。基于该设想，专利技术人在动脉粥样硬化小鼠模型中使用了鱼藤酮，其为一种特异性线粒体复合体-1抑制剂，具有很强的脂溶性，可以直接通过细胞膜进入胞质，特异性地抑制线粒体呼吸链复合物I，从而降低生物体内ATP的水平，减少能量的供应，也同时减少了超氧阴离子等副产物的生成。专利技术人在ApoE缺陷小鼠喂养高脂高胆固醇饲料诱发动脉粥样硬化小鼠模型，应用小剂量（100ppm）鱼藤酮治疗后，发现心脏流出道及主动脉血管中斑块得到显著改善；在体外实验，鱼藤酮有效降低了巨噬细胞CD36的表达（CD36介导脂质摄入及泡沫细胞形成）及血管平滑肌细胞的迁移，显示通过小剂量鱼藤酮适度限制线粒体活性，可能是一种治疗动脉粥样硬化性血管疾病的有效手段。附图说明图1:鱼藤酮可以降低ApoE敲除小鼠心脏流出道斑块面积（镜下图）；图2：鱼藤酮可以降低ApoE敲除小鼠心脏流出道斑块面积（散点图）；图3：鱼藤酮可以降低ApoE敲除小鼠主动脉斑块面积（实物图）；图4：鱼藤酮可以降低ApoE敲除小鼠主动脉斑块面积（柱状图）；图5：鱼藤酮可以降低巨噬细胞清道夫受体CD36（柱状图）；图6:鱼藤酮可以降低平滑肌细胞的迁移（镜下图）；图7:鱼藤酮可以降低平滑肌细胞的迁移（柱状图）。具体实施方式以下将结合实施例和附图具体说明本专利技术的技术方案：本专利技术以下实施例中使用的鱼藤酮购置于Sigma；ApoE敲除小鼠购置于北京大学医学部实验动物中心；小鼠原代腹腔巨噬细胞取自南京大学模式动物中心购买的C57B6小鼠；小鼠平滑肌细胞购置广州吉妮欧生物科技有限公司。实施例1鱼藤酮可以降低ApoE敲除小鼠心脏流出道斑块面积将高脂高胆固醇饲料喂养的ApoE缺陷小鼠分为对照组和鱼藤酮治疗组，每组6只，治疗组小鼠饲料中添加100ppm的鱼藤酮，连续喂养8周。实验结束后取小鼠心脏流出道，冰冻包埋后切片，冰冻切片进行油红O染色，统计小鼠心脏流出道斑块面积。如图1、2所示鱼藤酮治疗组小鼠的流出道斑块面积小于对照组，具有统计学差异（p＝0.0368）。实施例2鱼藤酮可以降低ApoE敲除小鼠主动脉斑块面积将高脂高胆固醇饲料喂养的ApoE缺陷小鼠分为对照组和鱼藤酮治疗组，每组3只，治疗组小鼠饲料中添加100ppm的鱼藤酮，连续喂养8周。实验结束后取小鼠主动脉，剥离干净主动脉周围的脂肪和结缔组织，油红O染色，统计主动脉染色斑块面积比例。如图3、4所示，鱼藤酮治疗组小鼠主动脉斑块面积比列小于对照组，具有统计学差异（p＝0.0159）。实施例3鱼藤酮可以降低巨噬细胞清道夫受体CD36C57B6小鼠腹腔注射3ml的3%巯基乙酸盐，三天后取腹腔巨噬细胞，接种到6孔板中，贴壁4小时后，换新鲜培养基，0.1μM鱼藤酮预处理2小时，后加入50μg/ml的氧化性低密度脂蛋白（ox-LDL），24小时后，提取细胞RNA，Q-PCR检测巨噬细胞清道夫受体CD36的情况，如图5所示，鱼藤酮可以降低ox-LDL对CD36的诱导，提示可能降低了泡沫细胞的形成。实施例4鱼藤酮可以降低平滑肌细胞的迁移小鼠平滑肌细胞接种到12孔板中，贴壁过夜后，给予不同浓度的鱼藤酮(0.1μM，0.4μM，0.8μM)处理2小时，后加入50μg/ml的氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL），24小时后，对细胞进行消化重悬，细胞计数后，调整细胞浓度为15000个细胞/200μl,取200μl细胞悬液加到迁移小室中，小室下方的培养孔中加入600μl完全培养基，24小时后，结晶紫染液染色，拍照后，进行染色细胞统计分析，结果如图6、7所示，鱼藤酮可以降低平滑肌细胞的迁移，在低浓度0.1μM的鱼藤酮处理下就已经表现出降低平滑肌迁移的能力，并且具有浓度依赖性。本文档来自技高网...

【技术保护点】
鱼藤酮用于制备治疗动脉粥样硬化药物的用途。

【技术特征摘要】
1.鱼藤酮用于制备治疗动脉粥样硬化药物的用途。2.权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾占军，夏薇薇，张爱华，黄松明，张玥，李袁媛，殷杰，郭楚楚，李树珍，公伟，于婧，于晓文，杨运文，
申请(专利权)人：南京市儿童医院，
类型：发明
国别省市：江苏,32