一种罗汉果苦味剂的制作方法技术

本发明专利技术公开了一种罗汉果苦味剂的制作方法，属于天然产物应用技术领域。其包括如下步骤：(1)原料前处理及渗漉提取；(2)柱层析；(3)脱色；(4)脱色液浓缩、干燥；(5)结晶与重结晶。本发明专利技术采用加酸渗漉提取，省去了加热提取耗用大量蒸汽，减少了二氧化碳排放，同时大大减少了提出物中的杂质和色素等，增大了柱层析步骤中树脂对有效成分的吸附量，增大了脱色柱对原料的处理量，能耗大幅度降低，产能效率提高明显，有效降低成本。

Method for making Momordica bitters

The invention discloses a method for making bitter fruit of Momordica fruit, belonging to the technical field of natural product application. It includes the following steps: (1) raw material pretreatment and percolation extraction; column chromatography; (2) (3) (4) decolorization decolorization; concentration and drying; (5) crystallization and recrystallization. The invention adopts acid percolation extraction, eliminating the heating extraction amount of steam, reducing carbon dioxide emissions, it can greatly reduce the extract of impurity and pigment, increase the adsorption capacity of the resin column chromatography of effective components, increase the processing capacity of raw materials of the decolorization column, the energy consumption is greatly reduced. Production efficiency is greatly improved, effectively reducing the cost.

【技术实现步骤摘要】
一种罗汉果苦味剂的制作方法
本专利技术涉及一种罗汉果苦味剂的制作方法，属于天然产物应用

技术介绍
2015年，广西罗汉果种植面积超过6万亩，年产鲜果3万吨以上，全国罗汉果种植面积达到12万亩，种植规模每年以15％～20％的速度增长。其中，由于受到种植产地土壤与气候等条件的影响，有15％～30％的罗汉果无法正常成熟。这种无法正常成熟的罗汉果味道及其苦，但是总量却非常大，总计达到万吨以上。可是罗汉果提取物厂家也不愿加工苦果，因为苦果混入正常果加工后，影响了植物提取物产品的甜度和质量，在正常的投料生产之前，需要把苦果筛选出去。通常，罗汉果种植户都是无法处理这部分未成熟的苦果，干脆当废品烂在种植基地，或者以低价卖给干果加工企业，待烤成干果后，混入正品之中，但是这样也给烤干果的企业带来了产品质量问题和信用问题。如何处理这些未成熟的罗汉果苦果，真真实实地变废为宝，并给罗汉果种植农户带来更多收益，就成了当下急待解决的新课题。徐位坤[1]等从未成熟的嫩苦味罗汉果出发，用乙醇提取,提取物再用正丁醇提取，再经硅胶柱层析，分离出几个苦味成分，其中一个苦味单体，收得率为0.029％，暂名为罗汉果苦贰A。罗汉果苦贰A，白色针状结晶,熔点183～185℃。该成分为首次从天然产物中得到。王磊[2]等采用乙烯利处理的方法对采收季节后期无法自然成熟的罗汉果苦果进行采后处理研究，以实现对罗汉果苦果废物利用。采摘20d、30d、40d果龄的罗汉果，进行温度、乙烯利用量、放置时间对罗汉果催熟的影响试验,结果表明,罗汉果苦果催熟的最佳条件为:30日龄以上的罗汉果、0.1％～0.2％乙烯利浸泡2min、室温15℃以上放置2～4周，70％的果实在试验结束时表现出全面成熟。说明使用乙烯利催熟罗汉果苦果的方法是可行的，但也带来乙烯利的残留问题。同样，王磊[3]等研究通过酶催化糖基转移反应将新的葡萄糖基团引入苦味的罗汉果皂苷Ⅱ中，可以延长其糖链，从而达到改善其口味的目的。该研究从原料选择、糖源选择以及反应温度等多方面考察了反应条件，最终确定的反应最佳条件为纯度在50％以上的罗汉果皂苷Ⅱ、2倍于皂苷重量的淀粉、60U·g-1罗汉果苦味皂苷的酶、60～65℃反应24h。经实际罗汉果苦果样品验证了方法的可行性,所获得的产品可以完全消除苦味，并且带有淡淡的甜味,经HPLC-MS确定了所获得的微甜产物为3～6个糖的皂苷混合物。该方法对于目前罗汉果生产中大量出现并被遗弃的嫩果、苦果以及脱苦工艺中产生的罗汉果皂苷Ⅱ而言,是一种潜在的实现废物利用的方法。上述研究或者是通过正丁醇萃取加硅胶反复柱层析获得罗汉果苦甙，不适合工业规模化大生产；或者是通过加激素(乙烯利)转化，坏果率较高，而且带来激素残留，操作比较麻烦，耗用人工和占用场地；或者是加酶转化其中的罗汉果苦甙，以去除其中的大部分苦味物质，但都未能够完全转化和去除，转化后的罗汉果总甜甙为非天然成分，也没有天然成熟罗汉果的甜度。鉴于此，有必要开发一种新的罗汉果苦味剂的制备方法，以弥补现有技术的不足。如果能利用罗汉果苦果作为原料，分离出其中的苦味物质，并直接应用于食品饮料中，将会使罗汉果的应用得到更广泛的开发。参考文献：[1]徐位坤,孟丽珊.罗汉果嫩果中一个苦味成分的分离和鉴定[J].广西植物，1992,12(2):136-138.[2]王磊,卢凤来,刘金磊等.罗汉果苦果的采后处理研究[J].西南农业学报,2014,27(1):344-348.[3]王磊,刘金磊,卢凤来.酶催化糖基转移反应在改善罗汉果苦味皂苷口味中的应用[J].广西植物,2015,35(6):782-785.
技术实现思路
本专利技术的目的是解决现有技术的不足，提供一种罗汉果苦味剂的制作方法。本专利技术的方法，可以将弃用资源罗汉果苦果综合利用起来，变废为宝，切实增加罗汉果种植户的收入。本专利技术解决上述技术问题的技术方案如下：一种罗汉果苦味剂的制作方法，包括如下步骤：(1)原料前处理及渗漉提取：取未成熟的罗汉果苦果，清洗、破碎后，加入上述罗汉果苦果重量10～30倍的质量百分数为1‰～1％的食品级醋酸水，浸泡1min～600min，然后装入层析柱，渗漉1～30小时，得到渗漉液；(2)柱层析：将步骤(1)得到的渗漉液进行柱层析，先用柱体积1-3倍量的质量百分数为2‰～5‰的氢氧化钠/钾乙醇水洗脱，再水洗至中性，然后用柱体积2～4倍量的体积百分数为45％～60％乙醇水洗脱，得到含有罗汉果苦味物质的洗脱液；(3)脱色：将步骤(2)得到的含有罗汉果苦味物质的洗脱液进脱色柱进行脱色，收集流出液，得到含有罗汉果苦味物质的脱色液；(4)脱色液浓缩、干燥：将步骤(3)得到的含有罗汉果苦味物质的脱色液浓缩，回收乙醇，干燥，得到含有罗汉果苦味物质的脱色干粉；(5)结晶与重结晶：在步骤(4)得到的含有罗汉果苦味物质的脱色干粉中，加入所述含有罗汉果苦味物质的脱色干粉2～8倍重量的体积百分数为75％～95％乙醇，40～70℃溶解，放置12～72小时结晶，得到晶体，晶体干燥后再用2～8倍晶体重量的体积百分数为75％～100％甲醇或乙醇重结晶，重结晶操作参数与结晶操作参数相同，重结晶晶体干燥后，即得到所述罗汉果苦味剂。本专利技术采用加酸渗漉提取罗汉果苦果中的罗汉果苦甙，得到一种罗汉果苦味剂，具有如下优点：(1)无需加热提取耗用大量蒸汽，既减少了二氧化碳排放，又大大降低了能耗，提高了产能，有效降低了生产成本；(2)大大减少了提出物中的杂质和色素等，增大了柱层析步骤中树脂对有效成分的吸附量，增大了脱色柱对原料的处理量。本专利技术步骤(2)的柱层析过程中采用低浓度碱性醇水溶液进行梯度洗脱，可以进一步除杂，有效提高了罗汉果苦味剂中的罗汉果甙ⅡE的的含量。本专利技术不采用硅胶柱及中低压制备柱等费时的分离制备方法，不使用有机氯仿和昂贵填料的层析方法，首次获得了含有高含量罗汉果甙ⅡE物质的罗汉果苦味剂，且可以实现工厂大规模化量产。在上述技术方案的基础上，本专利技术还可以做如下改进。进一步，步骤(1)所述未成熟的罗汉果苦果，指的是生长期25～40日龄，罗汉果甜甙的含量为鲜果重量的0.15％～0.28％。市面上对苦果的定义就是经口品尝，苦口就认为是苦果，学术上未做统一，一般是指罗汉果从点花结果开始40天果实生长期内含有比较多的罗汉果甙ⅡE这一苦味成分，或者由于地理位置气候变冷等原因导致的无法完全成熟的带有苦味的罗汉果。进一步，步骤(2)所述柱层析的树脂为DM58、LX-18、LX-T28LX-20B中的一种。采用上述进一步的有益效果是：上述树脂均为大孔型树脂，流速与渗漉速度同步相匹配，相比D101等常规大孔树脂对罗汉果成分的吸附量大，针对性强。采用质量百分数为2‰-5‰的氢氧化钠/钾乙醇水(属于低浓度碱性乙醇水)洗脱，可先除去部分黄酮、色素，蛋白、有机酸等杂质和少部分罗汉果甜味甜甙。进一步，步骤(3)所述脱色柱的填料为氧化铝、700B、D941、LX-T5树脂中的一种。进一步，步骤(4)所述干燥的方式为真空干燥或喷雾干燥。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术采用加酸渗漉提取，省去了加热提取耗用大量蒸汽，减少了二氧化碳排放，同时大大减少了提出物中的杂质和色素等，增大了柱层析步骤中树脂对有效成分的吸附量，增大了脱色柱对原料的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种罗汉果苦味剂的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)原料前处理及渗漉提取：取未成熟的罗汉果苦果，清洗、破碎后，加入上述罗汉果苦果重量10～30倍的质量百分数为1‰～1％的食品级醋酸水，浸泡1min～600min，然后装入层析柱，渗漉1～30小时，得到渗漉液；(2)柱层析：将步骤(1)得到的渗漉液进行柱层析，先用柱体积1‑3倍量的质量百分数为2‰～5‰的氢氧化钠/钾乙醇水洗脱，再水洗至中性，然后用柱体积2～4倍量的体积百分数为45％～60％乙醇水洗脱，得到含有罗汉果苦味物质的洗脱液；(3)脱色：将步骤(2)得到的含有罗汉果苦味物质的洗脱液进脱色柱进行脱色，收集流出液，得到含有罗汉果苦味物质的脱色液；(4)脱色液浓缩、干燥：将步骤(3)得到的含有罗汉果苦味物质的脱色液浓缩，回收乙醇，干燥，得到含有罗汉果苦味物质的脱色干粉；(5)结晶与重结晶：在步骤(4)得到的含有罗汉果苦味物质的脱色干粉中，加入所述含有罗汉果苦味物质的脱色干粉2～8倍重量的体积百分数为75％～95％乙醇，40～70℃溶解，放置12～72小时结晶，得到晶体，晶体干燥后再用2～8倍晶体重量的体积百分数为75％～100％甲醇或乙醇重结晶，重结晶操作参数与结晶操作参数相同，重结晶晶体干燥后，即得到所述罗汉果苦味剂。...

【技术特征摘要】
1.一种罗汉果苦味剂的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)原料前处理及渗漉提取：取未成熟的罗汉果苦果，清洗、破碎后，加入上述罗汉果苦果重量10～30倍的质量百分数为1‰～1％的食品级醋酸水，浸泡1min～600min，然后装入层析柱，渗漉1～30小时，得到渗漉液；(2)柱层析：将步骤(1)得到的渗漉液进行柱层析，先用柱体积1-3倍量的质量百分数为2‰～5‰的氢氧化钠/钾乙醇水洗脱，再水洗至中性，然后用柱体积2～4倍量的体积百分数为45％～60％乙醇水洗脱，得到含有罗汉果苦味物质的洗脱液；(3)脱色：将步骤(2)得到的含有罗汉果苦味物质的洗脱液进脱色柱进行脱色，收集流出液，得到含有罗汉果苦味物质的脱色液；(4)脱色液浓缩、干燥：将步骤(3)得到的含有罗汉果苦味物质的脱色液浓缩，回收乙醇，干燥，得到含有罗汉果苦味物质的脱色干粉；(5)结晶与重结晶：在步骤(4)得到的含有罗汉果苦味物质的脱色干粉中，加入所述含有罗汉果苦味物质的...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱丽凰，李杰，梁远盛，韦兴，陈雪玲，覃礼荣，
申请(专利权)人：桂林莱茵生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广西,45