微生物发酵保育期仔猪液态饲料及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种发酵液态仔猪饲料及其制备方法与应用。它是由芽孢菌、乳酸菌混菌组合而成；其中芽孢菌与乳酸菌混合接种量为4%~6%（v/w），其中芽孢菌与乳酸菌接种比例为2:1~3:1（v/v），芽孢菌B1与芽孢菌B2接种比例为1:1（v/v），乳酸菌R1和乳酸菌R2接种比例为1:2（v/v），料水比为1:3~1:3.5（w/w）。本发明专利技术制备的发酵液态饲料在提高饲料的利用率，改善饲料风味，提高适口性，防治“断奶仔猪综合征”等方面有明显的作用。饲料经过发酵，还原糖、乳酸含量明显增加，益生菌数明显增加，具有酸香味。

Liquid feed for piglet during microbial fermentation and nursing period and preparation method and application thereof

The invention discloses a fermented liquid pig feed, a preparation method and an application thereof. It is composed of Bacillus, lactic acid bacteria and mixed bacteria; the bacteria and lactic acid bacteria Mixed Inoculation of 4%~6% (v/w), in which bacteria and lactic acid bacteria inoculation ratio was 2:1~3:1 (v/v), Bacillus B1 and Bacillus B2 inoculation ratio was 1:1 (v/v), lactic acid bacteria and lactic acid bacteria R1 R2 inoculation ratio was 1:2 (v/v), the ratio of material to water was 1:3~1:3.5 (w/w). The fermented liquid feed prepared by the invention has obvious function in improving the utilization rate of feed, improving the flavor of the feed, improving palatability, preventing and controlling the syndrome of the weaned piglet and so on. When the feed was fermented, the content of reducing sugar and lactic acid increased obviously, and the number of probiotics increased obviously, and it had acid flavor.

【技术实现步骤摘要】
微生物发酵保育期仔猪液态饲料及其制备方法与应用
本专利技术属于微生物发酵饲料
，具体涉及一种发酵液态仔猪饲料及其制备方法。
技术介绍
随着仔猪的断奶日龄不断提前，面临着“早期断奶综合征”的挑战，如得不到有效解决将使早期断奶失去预期价值。长久以来，人们习惯添加抗生素来增强仔猪的免疫能力，以此来控制腹泻等各种疾病。经过广泛和长期使用抗生素，抗生素带来的负面效应越来越多。在食品安全倍受关注的今天，世界各国人民纷纷禁用抗生素。与其他的饲料相比，发酵液态保育期仔猪饲料有以下优势：第一，在物理形态与母乳相似，仔猪可以同时获得养分和水的供应；第二，发酵过程中产生大量的乳酸等微生物代谢产物，使液体发酵饲料含有特殊的香味，适口性好，诱使仔猪采食量增加，生长速度加快；第三，发酵液态仔猪饲料往往含有大量的益生菌，其主要是通过消耗氧气、产生乳酸和分泌一些抗菌物质来增强仔猪免疫功能，杀灭病原微生物，防止仔猪腹泻等疾病的发生。
技术实现思路
本专利技术公开了一种微生物发酵保育期仔猪液态饲料的制备方法和应用，以取代抗生素的添加及防治仔猪“早期断奶综合征”。本专利技术公开的技术方案如下：一种用于发酵液态仔猪饲料的液体菌液，其特征在于它是由芽孢菌和乳酸菌组合而成；芽孢菌与乳酸菌接种的体积份数比为2:1~3:1（v/v），所述芽孢菌指的是芽孢B1与芽孢菌B2，B1B2接种比例为1:1（v/v），所述乳酸菌指的是：乳酸菌R1和乳酸菌R2，R1和R2接种比例为1:2（v/v）；其中芽孢菌B1指的是枯草芽孢杆菌（CGMCC1.504），芽孢菌B2指的是解淀粉芽孢杆菌（CGMCC3413），乳酸菌R1指的是凝结芽孢杆菌（CGMCC1.1322），乳酸菌R2指的是粪肠球菌（CGMCC1.130）。本专利技术进一步公开了一种微生物发酵保育期仔猪液态饲料的制备方法和应用，其特征在于按如下的步骤进行：1）将乳酸菌在MRS培养基液体42℃静置培养24h，芽孢菌在LB培养基35℃,200转/分钟，震荡培养18h，得到乳酸菌种子液和芽孢菌种子液；LB培养基（g/L）：胰蛋白胨10，酵母浸出粉5，NaCl10，pH7.5。MRS培养基（g/L）：蛋白胨10，牛肉膏10，酵母浸出粉5，葡萄糖5，CH3COONa5，柠檬酸二胺2，吐温801，K2HPO42，MgSO4•7H2O0.2，MnSO4•7H2O0.05，pH6.2。2）将植物性原料粉碎，与水混合均匀，加热到100℃，维持时间10min；3）待温度降到30℃左右，接种液体微生物种子液，混合均匀后装入塑料桶或不锈钢桶内发酵；在本专利技术的一些实施例中，在所述步骤2）中，植物性原料粉碎粒度达到物料80%通过40目。在本专利技术的一些实施例中，在所述步骤3）中，植物性原料与水质量比为1:3~1:4.5（W/V）。在本专利技术的一些实施例中，在所述步骤3）中一种用于发酵液态仔猪饲料的液体菌液，其特征在于它是由芽孢菌和乳酸菌组合而成；其中芽孢菌与乳酸菌混合接种量为4%~6%（v/w），芽孢菌与乳酸菌接种比例为2:1~3:1（v/v），芽孢菌B1与芽孢菌B2接种比例为1:1（v/v），乳酸菌R1和乳酸菌R2接种比例为1:2（v/v）。所述的芽孢菌B1指的是枯草芽孢杆菌（CGMCC1.504），芽孢菌B2指的是解淀粉芽孢杆菌（CGMCC3413），乳酸菌R1指的是凝结芽孢杆菌（CGMCC1.1322），乳酸菌R2指的是粪肠球菌（CGMCC1.130）。在本专利技术的一些实施例中，在所述步骤3）中，植物性原料配比为：玉米粉:豆粕=3:1。在本专利技术的一些实施例中，在所述步骤2）中，发酵温度30℃～35℃，发酵时间为4天～10天，得到发酵液态保育期仔猪饲料，该发酵饲料还原糖含量达到1.56%以上，乳酸含量达到4.0%以上，乳酸菌数达到109cfu/g以上，大肠杆菌检测不到。本专利技术更进一步公开了用于液体菌液发酵液态仔猪饲料,该发酵液态饲料可提高仔猪饲料的利用率，改善饲料风味，而且提高防治断奶仔猪综合征。实验结果显示:发酵液态仔猪饲料增加了饲料消化吸收效率，日增重提高11.68%；而且发酵饲料中的益生菌改善肠道的微生态环境，提高了机体免疫力，使仔猪腹泻率下降54.88%。该发酵液态仔猪饲料通过发酵后，提高了饲料的适口性和消化率，大大减缓由母乳直接到固体饲料对断奶仔猪的应激，从而减少腹泻率和死亡率。本专利技术更加详细的描述如下：（1）发酵菌种的筛选本专利技术从9株菌中筛选目标菌株。菌种按类别可分为芽胞菌4株，分别是枯草芽孢杆菌（B10-5）、枯草芽孢杆菌（WL-BA-1）、解淀粉芽孢杆菌（BI2）、枯草芽孢杆菌（BI1）；乳酸菌5株，分别是植物乳杆菌、凝结芽孢杆菌、豆粕乳杆菌、粪肠球菌LJ、发酵乳杆菌。1）芽孢菌菌株的筛选将活化好的芽胞菌分别点接到淀粉培养基和酪素培养基平板上，然后放入37℃恒温生化培养箱中培养，观察菌株周围是否有透明圈产生，挑取产生透明圈的菌株再次活化，稀释涂布到平板上，使之产生单菌落，观察产生透明圈的大小，挑取透明圈大的菌株.通过产淀粉酶实验和产蛋白酶实验从4株芽胞菌中筛选出高产淀粉酶和高产蛋白酶的菌株。分别是枯草芽孢杆菌B1（CGMCC1.504）、解淀粉芽孢杆菌B2（CGMCC3413）。2）乳酸菌菌株的筛选将活化好的乳酸菌菌液分别按照5%的比例接种于饲料中，然后搅拌饲料使之充分混匀，装入发酵袋置于37℃环境中发酵3d后进行检测。检测时称取5g发酵饲料放入三角瓶中，加入45ml蒸馏水振荡20min，然后离心取上清，稀释相应倍数后用生物传感分析仪测定其乳酸含量，选取乳酸含量高的2株菌株。通过乳酸菌产乳酸性能实验从6株乳酸菌中筛选出产酸高的乳酸菌。分别是凝结芽孢杆菌R1（CGMCC1.1322）、粪肠球菌R2（CGMCC1.130）。（2）发酵条件的优化：1）发酵液态饲料芽孢菌与乳酸菌混合比例的优化：将筛选出的2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为8%，芽孢菌与乳酸菌接种比例分别为1:2，1:1，2:1，3:1，4:1，2株芽孢菌接种比例为1:1，2株乳酸菌接种比例为1:1，料水比为1:3.5，37℃恒温生化培养箱中发酵3d后，检测其中的还原糖含量、乳酸含量和益生菌数等指标。表1芽孢菌与乳酸菌混合比例发酵后还原糖含量、乳酸含量与益生菌数由表1可以看出，当芽孢菌和乳酸菌的混合比例为2:1时，还原糖含量最高，益生菌数也较高。因此，芽孢菌与乳酸菌的混合比例选择是2:1。2）发酵饲料2株芽孢菌比例的优化：将2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为8%，芽孢菌与乳酸菌接种比例为2:1，2株芽孢菌B1和B2接种比例分别为3:1，2:1，1:1，1:2，1:3，2株乳酸菌接种比例为1:1，料水比为1:3.5，37℃恒温生化培养箱中发酵3d后，检测其中的还原糖含量、乳酸含量和益生菌数等指标。表2两种芽孢菌不同混合比例发酵后还原糖含量、乳酸含量与益生菌数由表2可以看出，芽孢菌B1和B2的混合比例为1:1与其他混合比例相比，还原糖含量最高。因此，最终确定2株芽孢菌B1和B2的混合比例为1:1。3）发酵饲料2株乳酸菌比例的优化:将2株芽孢菌和2株乳酸菌活化2代，接入预先混合好的发酵料中，接种量为8%，芽本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于发酵液态仔猪饲料的液体菌液，其特征在于它是由芽孢菌和乳酸菌组合而成；芽孢菌与乳酸菌接种的体积份数比为2:1~3:1（v/v），所述芽孢菌指的是芽孢B1与芽孢菌B2，B1 B2接种比例为1:1（v/v），所述乳酸菌指的是：乳酸菌R1和乳酸菌R2，R1和R2接种比例为1:2（v/v）；其中芽孢菌B1指的是枯草芽孢杆菌（CGMCC 1.504），芽孢菌B2指的是解淀粉芽孢杆菌（CGMCC3413），乳酸菌R1指的是凝结芽孢杆菌（CGMCC1.1322），乳酸菌R2指的是粪肠球菌（CGMCC1.130）。

【技术特征摘要】
1.一种用于发酵液态仔猪饲料的液体菌液，其特征在于它是由芽孢菌和乳酸菌组合而成；芽孢菌与乳酸菌接种的体积份数比为2:1~3:1（v/v），所述芽孢菌指的是芽孢B1与芽孢菌B2，B1B2接种比例为1:1（v/v），所述乳酸菌指的是：乳酸菌R1和乳酸菌R2，R1和R2接种比例为1:2（v/v）；其中芽孢菌B1指的是枯草芽孢杆菌（CGMCC1.504），芽孢菌B2指的是解淀粉芽孢杆菌（CGMCC3413），乳酸菌R1指的是凝结芽孢杆菌（CGMCC1.1322），乳酸菌R2指的是粪肠球菌（CGMCC1.130）。2.一种采用权利要求1所述液体菌液进行液态仔猪饲料发酵的制备方法，其特征在于，包括以下步骤；1）将仔猪全价植物性原料粉碎，与水混合均匀，加热到100℃，维持时间10min；其中原料与水比为1:3~1:4.5（w/w）；2）待温度降到30-35℃，接种液体菌液，接...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭宏，王德培，李洁，张孟阳，马鑫，杨建松，
申请(专利权)人：天津牧丰饲料有限公司，天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津,12